萬(wàn)思敬

（山東省青島市動(dòng)物衛(wèi)生監(jiān)督所 山東青島 266199）

豬瘟（Classical swine fever，CSF）是由豬瘟病毒（Classical swine fever virus，CSFV）引起的豬的一種高度接觸性傳染病，是目前威脅我國(guó)養(yǎng)豬業(yè)的主要疫病之一，我國(guó)采取以疫苗免疫接種為主的防控措施，因此提高疫苗的免疫效果對(duì)豬瘟的防控至關(guān)重要[1]。黃芪多糖是中藥黃芪的主要活性成分，具有誘導(dǎo)機(jī)體產(chǎn)生干擾素、提高淋巴細(xì)胞數(shù)量和轉(zhuǎn)化率及增強(qiáng)機(jī)體免疫功能等生物學(xué)活性[2]。本研究探討了將黃芪多糖作為稀釋液稀釋豬瘟疫苗后對(duì)豬瘟疫苗免疫效果的影響，為黃芪多糖在豬瘟疫苗免疫中的推廣應(yīng)用提供理論支持。

1 材料與方法

1.1 黃芪多糖、仔豬

黃芪多糖購(gòu)自山東方舟生物科技有限公司；21日齡斷奶仔豬來(lái)自膠州思保養(yǎng)豬場(chǎng)。

1.2 疫苗、試劑盒

豬瘟活疫苗（細(xì)胞源）購(gòu)自廣東永順生物制藥有限公司；豬瘟病毒正向間接血凝（IHA）抗體檢測(cè)試劑盒購(gòu)自中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院蘭州獸醫(yī)研究所；

1.3 黃芪多糖稀釋液的制備

將1g黃芪多糖溶解于1,000mL純化水中，高壓滅菌后4℃保存?zhèn)溆谩?/p>

1.4 試驗(yàn)分組與疫苗免疫接種

將60頭21日齡健康斷奶仔豬隨機(jī)分成2組（對(duì)照組和黃芪多糖組），每組30頭仔豬。將豬瘟活疫苗（20頭份/mL）分別用滅菌生理鹽水和黃芪多糖稀釋液稀釋成2頭份/mL，分別免疫接種對(duì)照組仔豬和黃芪多糖組仔豬，免疫接種方式均為耳根后方肌內(nèi)注射，劑量均為1.0mL（2頭份）/頭，對(duì)照組和黃芪多糖組仔豬日常飼養(yǎng)管理均完全一致，試驗(yàn)期為28d。

1.5 血清樣品的采集

分別在疫苗免疫前（0d）以及免疫后7、14、21和28d，用5.0mL注射器于每頭豬的前腔靜脈處采集血液1.0mL，將其全部打入1.5mL離心管中，將離心管依次置于37℃放置2h、4℃放置4h后，5,000rpm離心10min，將上清液移入另一個(gè)新的1.5mL離心管中，-20℃保存?zhèn)溆谩?/p>

1.6 豬瘟抗體效價(jià)檢測(cè)

嚴(yán)格按照豬瘟病毒正向間接血凝（IHA）抗體檢測(cè)試劑盒使用說(shuō)明分別測(cè)定豬瘟疫苗免疫前（0d）以及免疫后7、14、2和28d采集的血清樣品中豬瘟抗體效價(jià)（log2）。

1.7 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)與分析

表1 黃芪多糖稀釋液對(duì)豬瘟抗體效價(jià)的影響（log2）

采用SPSS13.0軟件對(duì)不同時(shí)間的豬瘟抗體水平檢測(cè)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)與分析，結(jié)果以“平均值±標(biāo)準(zhǔn)差”表示。

2 結(jié)果與分析

如表1所示，在疫苗免疫前（0d），黃芪多糖組與對(duì)照組的豬瘟抗體效價(jià)（log2）差異均不顯著（P＞0.05）；在疫苗免疫后 7、14、21、28d，黃芪多糖組的豬瘟抗體效價(jià)（log2）較對(duì)照組分別提高5.3%（P＞0.05）、9.8%（P＜0.05）、14.0%（P＜0.05）、14.2%（P＜0.05），表明利用黃芪多糖稀釋液稀釋豬瘟疫苗可顯著提高豬瘟疫苗免疫后的抗體水平。

3 討論

黃芪多糖作為綠色環(huán)保的新型飼料添加劑和疫苗佐劑在獸用臨床中已經(jīng)得到了廣泛應(yīng)用，但其作為疫苗稀釋液的研究與應(yīng)用還處于剛起步階段。豬瘟疫苗的免疫效果直接關(guān)系到豬瘟防控工作的成敗，而疫苗免疫后的抗體水平檢測(cè)是直接反映疫苗免疫效果最簡(jiǎn)單、最基本的方法。故本研究選擇檢測(cè)血清中豬瘟抗體效價(jià)來(lái)評(píng)價(jià)黃芪多糖稀釋液對(duì)豬瘟活疫苗的免疫增強(qiáng)作用，結(jié)果顯示黃芪多糖稀釋液可刺激機(jī)體迅速產(chǎn)生抗體，至疫苗免疫后14d，其產(chǎn)生的豬瘟抗體水平已比常規(guī)豬瘟疫苗提升9.8%，達(dá)到顯著性差異水平，且高水平的抗體效

價(jià)維持時(shí)間較長(zhǎng)，至疫苗免疫后28d，其產(chǎn)生的豬瘟抗體水平仍比常規(guī)豬瘟疫苗高14.2%。表明黃芪多糖稀釋液稀釋豬瘟疫苗可使抗體產(chǎn)生快、效價(jià)高及維持時(shí)間長(zhǎng)，增強(qiáng)了豬瘟疫苗的免疫效果，這與朱輝等[3]報(bào)道的黃芪多糖注射液可提高家兔對(duì)豬瘟疫苗的免疫應(yīng)答反應(yīng)，表現(xiàn)出了極其相似的一致性。由此可見，將黃芪多糖作為疫苗稀釋液配合豬瘟疫苗的使用，可提高豬瘟疫苗的免疫效果，可在豬瘟疫苗免疫時(shí)推廣應(yīng)用?！?/p>

[1] 李德如,李少文,賴華松.豬瘟的流行特點(diǎn)與綜合防控[J].福建畜牧獸醫(yī),2016,38(5)：59-60.

[2] 柳序,田科雄,彭燦陽(yáng),等.黃芪多糖的免疫調(diào)節(jié)作用及其在動(dòng)物生產(chǎn)中的應(yīng)用[J].中國(guó)飼料,2016(22)：12-15.

[3] 朱輝,沈志強(qiáng),王振勇,等.黃芪多糖注射液對(duì)豬瘟耐熱保護(hù)劑活疫苗在兔體內(nèi)免疫效果的影響 [J].中國(guó)畜牧獸醫(yī),2011,38(7)：66-70.