李小霞+肖仲久+姜仕敏

摘要：為了研究不同藥劑對山茶枯斑病菌的毒力作用，對山茶枯斑病的防治提供幫助。采用生長速率法進行了試驗，測定了20%井.唑.多菌靈、75%百菌清、72%農(nóng)用硫酸鏈霉素、68%精甲霜.錳鋅和35%快克5種藥劑在不同濃度下對山茶枯斑病病菌的影響。結(jié)果表明：75%的百菌清對病原菌的抑菌的抑制效果最好，EC50為145.6829 μg/mL；其次是20%井唑多菌靈，EC50為257.9576 μg/mL；35%快克的抑菌效果最差，EC50為13563.7054 μg/mL。

關(guān)鍵詞：山茶；枯斑病病菌；殺菌劑；毒力

中圖分類號：S685文獻標識碼：A文章編號：16749944（2017）03011102

1引言

山茶（Camellia japonica L.）是山茶花科的常綠灌木，又名曼陽羅樹、紅茶花等，小喬木或灌木，葉卵形或橢圓形，邊有細鋸齒，革質(zhì)，表面亮綠色。花瓣多，呈圓形，花的顏色多樣，花期因品種不同而異。山茶花具有觀賞價值和藥用價值[1]。

山茶枯斑病菌，由交鏈格孢菌（Alternaria alternata）侵染山茶葉片而引起。病斑癥狀多發(fā)生于葉面，由暗綠色斑紋擴大成不規(guī)則大斑，顏色由褐色變?yōu)楹谏?，病斑擴散到整個葉片，從而引起大落葉。因此本試驗通過室內(nèi)毒力測定方法測定了5種殺菌劑對山茶枯斑病病菌的毒力，旨在為山茶枯斑病病菌的防治提供理論依據(jù)。

2材料與方法

2.1菌種來源

山茶枯斑病樣本分別采自貴州遵義桐梓縣松坎鎮(zhèn)、正安縣土坪鎮(zhèn)及遵義市區(qū)鳳凰山、三閣公園，采集有山茶枯斑病典型癥狀的山茶葉部樣本經(jīng)分離、純化和致病性鑒定[2]，最終確定是由交鏈格孢菌（Alternaria alternata）引起的，將其置于4℃的環(huán)境下保存?zhèn)溆谩?/p>

2.2供試藥劑

毒力測定所采用的5種實驗藥劑名稱、劑型、生產(chǎn)廠家見表1。

2.3試驗方法

以大田施用濃度為參考值，按有效成分從高濃度到低濃度逐步測試，每種藥劑選定5個濃度進行測定，每個處理重復(fù)3次，通過預(yù)實驗得出殺菌劑的濃度梯度如表2。然后將供試菌株接種于PSA培養(yǎng)基上，25 ℃培養(yǎng)5 d，待菌絲長滿培養(yǎng)皿后，用無菌的打孔器打取直徑

為5 mm的菌餅備用[3]。

采用生長速率測定法，測定致病菌的菌絲在上述5種藥劑中的敏感性，從而篩選高效的藥劑。將上述藥劑分別配制成所需濃度10倍的藥劑，取1 mL加入9 mL約50 ℃的PSA中混勻，倒入培養(yǎng)皿中制成含藥平板，中央接入直徑為5 mm的菌餅，27 ℃下培養(yǎng)3 d后測量菌落直徑，計算抑菌率[4，5]：

抑菌率（%）=（對照菌落直徑-5）-（處理菌落直徑-5）（對照菌落直徑-5）×100

將抑菌率換算成抑制幾率值，以設(shè)定的藥劑濃度的對數(shù)值為橫坐標，抑制幾率值為縱坐標，作回歸曲線，求得殺菌劑對該菌的抑制回歸方程Y=A+BX和抑制濃度（EC50）及相關(guān)系數(shù)（r）。EC50值與藥劑毒力大小成反比，EC50值越小，說明毒力越強[6～8]。試驗結(jié)果如表3。

4試驗結(jié)果

試驗結(jié)果表明（圖1，表2），5種藥劑對山茶枯斑病菌菌絲生長均有一定的抑制作用，5種藥劑的EC50值結(jié)果顯示，35%快克菌靈最大，13563.7054ug/ml，75%百菌清最小，為145.6829ug/ml。綜合殺菌劑的EC50值，對山茶枯斑病病菌菌絲生長的抑制作用75%百菌清最強，其次是20%井.唑.多菌靈，35%快克最弱。

5討論與結(jié)論

本試驗以5種藥劑對山茶枯斑病病原菌進行了毒力測定，這5種藥劑對該病原菌都有一定的抑制作用，但抑制效果不同。通過本試驗，可以初步確定75%百菌清和20%井唑多菌靈者兩種殺菌劑為防治山茶枯斑病的高效藥劑。在綜合考慮病害防治成本的前提下，應(yīng)該合理確定田間使用濃度，本研究是在室內(nèi)離體條件下進行的，但在試驗過程中得到的試驗數(shù)據(jù)是否可以運用于實際生產(chǎn)中，還待進行田間試驗明確供試藥劑對山茶枯斑病的防效，為生產(chǎn)上山茶枯斑病防治藥劑的選擇提供理論依據(jù)。表2不同殺菌劑對山茶枯斑病菌的室內(nèi)測定

藥劑毒力回歸方程Y=A+BX EC50/（μg/mL）相關(guān)系數(shù)/r20%井唑多菌靈y=0.4840+1.8726x257.9576r=0.914975%百菌清

參考文獻：

[1]張艷芳，屈愛桃.山茶花的研究進展[J].中國名族醫(yī)藥雜志，2012，10（10）：41～44.

[2]方中達.植病研究方法（第三版）[M].北京：中國農(nóng)業(yè)出版社，1994.

[3]紀兆林，劉娟，童蘊慧，等.不同殺菌劑對桃流膠病的毒力測定[J].中國南方果樹，2012，41（4）：39～41，46.

[4]陸錚錚，肖仲久，蔣選利.幾種殺菌劑對辣椒膠孢炭疽菌的室內(nèi)毒力測定[J].植物醫(yī)生，2010，23（4）：8～10.

[5]李小霞，肖仲久，李鳳華.5種殺菌劑對蘇鐵葉枯病病菌的室內(nèi)毒力測定[J].江蘇農(nóng)業(yè)科學(xué)，2012，40（4）：143～144.

[6]李石磊，劉君昂，趙瑩，等.6種殺菌劑對油菜主要病害的室內(nèi)毒力測定[J].中南林業(yè)科技大學(xué)學(xué)報，2013，33（9）：60～62.

[7]胡秀榮，鹿連明，蒲占湑，等.7種殺菌劑對柑橘炭疽病菌的室內(nèi)毒力測定[J].中國農(nóng)學(xué)通報，2010，26（11）：272～275.

[8]魯鵬，肖仲久，李小霞，等.白術(shù)白絹病菌的生物學(xué)特性及殺菌劑對其室內(nèi)毒力測[J].貴州農(nóng)業(yè)科學(xué)，2010，38（8）：90～93.