林明敏曲寧寧趙燕春
(1.威海市文登區(qū)張家產(chǎn)畜牧獸醫(yī)工作站,山東威海 266440;2.威海市文登區(qū)侯家畜牧獸醫(yī)工作站,山東威海 266440;3.威海市文登區(qū)葛家畜牧獸醫(yī)工作站,山東威海 266440)
豬傳染性腦脊髓炎的診斷與防治研究
林明敏1曲寧寧2趙燕春3
(1.威海市文登區(qū)張家產(chǎn)畜牧獸醫(yī)工作站,山東威海 266440;2.威海市文登區(qū)侯家畜牧獸醫(yī)工作站,山東威海 266440;3.威海市文登區(qū)葛家畜牧獸醫(yī)工作站,山東威海 266440)
豬傳染性腦脊髓炎在國內當前發(fā)病較少,但是隨著與國際養(yǎng)豬業(yè)的交流日益頻繁,其發(fā)病幾率陡然升高,加強對其了解非常必要。本文對該病進行了較為詳盡的分析,重點分析了其診斷方法和防治措施,希望能引起相關部門的重視。
豬傳染性腦脊髓炎;診斷;防治
病原為小RNA病毒科腸道病毒屬成員。病原可分為兩類,即豬捷申病毒(PTV)和豬腸道病毒(PEV)。病毒對外界環(huán)境具有很強的抵抗力,15℃下能存活168d,在液體糞尿中保存很長時間。病毒對乙醚有抵抗力,在眾多消毒劑中,次氯酸鈉、20%漂白粉和70%乙醇能使病毒完全失活。病毒在pH2~9條件下穩(wěn)定,在低溫下保存時間較長,如保存于50%甘油中可于4℃下長期保持毒力,-70℃下存活數(shù)年。冷凍干燥明顯降低毒力。
病豬和帶毒豬是本病的傳染源,病毒隨糞便排出體外,污染飼料、飲水和圈舍等。臨床康復豬在第7周仍能通過糞便排毒。
本病毒主要通過糞便-口腔途徑傳播,此外,也可通過呼吸道和帶毒的公豬精液傳播。通過消化道和呼吸道感染后,病毒很快在腸道內復制。強毒感染后,能夠形成病毒血癥,但弱毒感染則不能形成病毒血癥。豬是本病唯一的易感動物,成年豬往往為隱性感染,仔豬感染后死亡率很高。迄今為止,尚未發(fā)現(xiàn)其他動物能感染豬腸病毒的報道,然而妊娠豚鼠感染豬腸道病毒后(PEV-8),胎盤可發(fā)生病變。
潛伏期2~28d,平均14d。
PTV血清1型強毒株感染豬后,引起嚴重的腦脊髓炎癥狀,即傳統(tǒng)的捷申病,發(fā)病率可達50%,死亡率達70~90%。病初出現(xiàn)發(fā)熱,體溫達41℃,厭食,精神不振,隨后出現(xiàn)共濟失調、跟球震顫、抽搐和角弓反張、昏迷等癥狀。麻痹是疾病晚期的癥狀,此時,如果有聲音或觸摸等刺激,角弓反張和抽搐癥狀更加嚴重。出現(xiàn)癥狀后3~4d通常死亡。如果食欲恢復,動物可耐過,但可出現(xiàn)肌肉萎縮或癱瘓等。發(fā)生麻痹后,皮膚反射降低或消失。有的文獻報道,可觀察到豬眼瞼水腫、視物不清等。
由毒力較低的血清1型毒株和其他血清型毒株引起的“泰法病”,又稱為溫和性地方流行性麻痹,發(fā)病率和死亡率低。癥狀輕微,病初體溫也升高,逐漸發(fā)展為運動失調和背部軟弱,幾天內消失。很少發(fā)生完全麻痹。
由腸道病毒屬病毒感染導致的其他臨床癥狀還有妊娠中期的繁殖障礙,即所謂的SMEDI和不育。此外,還可引起腹瀉、肺炎、心包炎、心肌炎以及表皮損傷等。但是其與腦脊髓炎病例的相關性尚未清楚。
腦脊髓炎病例的特征性病變不明顯。病豬腦膜水腫,腦膜和腦血管充血,心肌和骨骼肌萎縮,腸絨毛膜不萎縮,其他組織無可見肉眼變化。組織學變化主要是典型的非化膿性腦脊髓灰質變化。:主要部位是脊髓的腹側柱、小腦灰質和腦干。神經(jīng)細胞變性壞死,或增生聚集,有明顯的噬神經(jīng)現(xiàn)象,小血管周圍有淋巴細胞浸潤,神經(jīng)細胞漿內有嗜酸性包涵體。
4.1 一般性診斷
本病發(fā)生于2~6月齡豬,出現(xiàn)神經(jīng)癥狀,聲音和觸摸刺激后,癥狀加劇,死亡率較高等,可作為流行病學初步診斷依據(jù)。
4.2 病原學診斷
(1)病原分離鑒定
應采集剛出現(xiàn)神經(jīng)癥狀小豬的脊髓、腦干和小腦或流產(chǎn)胎兒的肺臟。木乃伊胎中往往不含有活的病毒,因而不能用于病毒分離。哺乳仔豬由于母源抗體的保護,從腸道中很少分離出病毒。樣品需冷藏或放人50%甘油生理鹽水中,送往實驗室檢測。
將含毒組織勻漿處理后接種敏感細胞(如PK-15細胞),如病料中含有病毒,接種后3~4d出現(xiàn)病變,再進一步連續(xù)盲傳3代,使病毒穩(wěn)定。免疫熒光試驗、免疫過氧化物酶試驗和中和試驗,可以確認病毒。最后,用仔豬接種來測定毒株的致病性。
(2)免疫熒光技術
采用病毒感染后12~16h(細胞病變產(chǎn)生之前)的細胞玻片,PBS洗滌后,室溫干燥,用冷丙酮固定,依次用抗PTV的多抗或單抗、異硫氰酸熒光素標記的二抗進行染色。單抗的效果較好,因為多抗染色較易產(chǎn)生交叉反應。
(3)血清中和試驗
進行病毒分離株的血清型確定。將病毒液作10倍連續(xù)稀釋,與不同的標準血清混合后在4℃或37℃下孵育1h,接種單層細胞,37℃繼續(xù)培養(yǎng)。72h后,觀察判定。與陰性對照血清組相比,如果某一種標準血清能使病毒致細胞病變的毒價下降103,那么,就可以判定分離的病毒為該血清型的PTV。
(4)免疫組化試驗
對石蠟包埋的組織切片,采用此方法進行檢測。過程較為復雜,不同批次之間結果不太一致。所以本法不太常用。
(5)RT-PCR
一些實驗室已經(jīng)使用RT-PCR來檢測PTV,巢式PCR能夠進一步區(qū)分PTV和PEV。
4.3 血清學診斷
采集急性期和康復期的血清進行ELISA和中和試驗,血清效價增加4倍以上,才能具有診斷意義。
5.1 預防
綜合防控措施:加強檢疫,避免引人感染后帶毒的豬。對發(fā)病豬隔離,移至光線陰暗、安靜的地方。用敏感的消毒劑對環(huán)境進行嚴格的消毒。豬場糞便堆積發(fā)酵可殺滅其中的病毒??刂气B類、加強滅鼠等有助于本病的預防。
免疫預防:中歐和馬達加斯加在發(fā)生PTV-1引起的捷申病時,曾使用滅活疫苗和培養(yǎng)致弱的活疫苗,對健康易感犬進行免疫預防,但目前在這些地區(qū)已經(jīng)不再使用疫苗。
通過將后備母豬在配種前1個月與不同來源的豬混養(yǎng)而實現(xiàn)自然感染,產(chǎn)生的抗體可以保護仔豬。
5.2 治療
目前尚無有效的治療措施與抗病毒藥物。據(jù)報道,聯(lián)合使用長效磺胺、地塞米松、清熱解毒的中藥制劑以及黃芩多糖等藥物,有一定的療效。
5.3 診療注意事項
本病應與表現(xiàn)神經(jīng)癥狀的其他疾病相區(qū)分,如豬鏈球菌病、日本乙型腦炎、李氏桿菌病、豬偽狂犬病、血凝性腦脊髓炎和食鹽中毒等相區(qū)分。
[1] 劉振豐,張希鳳.豬傳染性腦脊髓炎的診斷報告[J].現(xiàn)代畜牧獸醫(yī),1994,(1):29-30.