覃婕+黃釗
(1.惠州學(xué)院,廣東 惠州 516007;2.惠州原藝科技有限公司,廣東 惠州 516002)
摘 要:本文研究LED為光源的光環(huán)境調(diào)控對紅掌愈傷組織誘導(dǎo)及分化的影響,結(jié)果表明:葉柄比葉片更易產(chǎn)生愈傷組織;光質(zhì)配比為5R:1B,光強(qiáng)為10~15μmol/m2·s的組合光源對紅掌愈傷組織培養(yǎng)最有利。
關(guān)鍵詞:LED;紅掌;組培
中圖分類號:S682.14 文獻(xiàn)標(biāo)識碼:A DOI:10.11974/nyyjs.20170230032
光在組織培養(yǎng)中是重要的環(huán)境影響因子,本實(shí)驗(yàn)應(yīng)用新型照明能源LED燈(即發(fā)光二極管)對紅掌組培的光環(huán)境進(jìn)行調(diào)控和研究。
1 材料與方法
1.1 材料
供試材料為紅掌品種“維多”的試管苗,LED組合光源在無錫諾達(dá)克生物照明科技有限公司定制。無菌苗的葉柄切成1cm長,葉片切成 1cm見方小塊。
1.2 方法
愈傷組織誘導(dǎo)培養(yǎng)基:1/2MS+1.0mg/L6-BA+0.2mg/L2,4-D,愈傷組織增殖培養(yǎng)基:1/2MS+1.0mg/L6-BA+1.0mg/LTDZ,分別添加瓊脂6.5 g/L,白糖30 g/L,pH調(diào)至5.8,溫度(25±2)℃;該實(shí)驗(yàn)每瓶接種 5個外植體,每個處理接種10瓶。
光照處理光周期為12h/d;分別設(shè)置3種光質(zhì)組合處理3R:1B,5R:1B,7R:1B,以及一個對照CK(白色熒光燈);光強(qiáng)以光量子通量密度計算,單位為μmol/m2·s,設(shè)置0,5,10,15,20五個水平。
2 結(jié)果與分析
2.1 光質(zhì)影響
表1 不同光質(zhì)處理對愈傷組織誘導(dǎo)及分化的影響
3R:1B 5R:1B 7R:1B CK(白色熒光燈)
接種數(shù) 50 50 50 50
愈出數(shù)(40d) 45 49 30 41
葉柄 分化芽塊數(shù) 29 39 15 25
芽分化率% 64.4 79.6 50 60
接種數(shù) 50 50 50 50
愈出數(shù) 40 45 28 40
葉片 分化芽塊數(shù) 24 37 15 21
芽分化率 60 82.2 53.5 52.5
表1結(jié)果表明,“維多”愈傷組織誘導(dǎo)中,葉柄愈出率高于葉片,光質(zhì)組合中5R:1B的組合對外植體誘導(dǎo)效果最好,葉柄愈出率達(dá)98%,葉片也有90%,接種12d后可見葉柄兩端膨大,接種17d后可見葉片邊緣膨大,7R:1B組合效果較差,3R:1B組合與對照的愈出效果相近;在愈傷組織的分化中,5R:1B的組合也表現(xiàn)最好,在該組合下葉片愈傷組織的芽分化率達(dá)到82.2%,稍高于葉柄。
2.2 光強(qiáng)影響
愈傷組織分化需要一定光強(qiáng)刺激,以上面實(shí)驗(yàn)篩選出的5R:1B光質(zhì)組合為基礎(chǔ),再通過光強(qiáng)組合來篩選適合愈傷組織分化的光環(huán)境組合。
表2 不同光強(qiáng)處理對愈傷組織分化的影響
光量子通量密度/(μmol/m2·s)
0 5 10 15 20
愈傷組織塊數(shù) 30 30 30 30 30
葉柄 分化塊數(shù) 3 19 28 25 11
分化率 10 63.3 93.3 83.3 36.7
芽的質(zhì)量 細(xì)弱 較細(xì) 密,較細(xì) 密,較粗 較細(xì)
愈傷組織塊數(shù) 30 30 30 30 30
葉片 分化塊數(shù) 2 15 26 25 12
分化率 6.7 50 86.7 83.3 40
芽的質(zhì)量 細(xì)弱 較細(xì) 密,較細(xì) 密,較粗 較細(xì)
表2結(jié)果表明10~15μmol/m2·s強(qiáng)度光照有利于紅掌愈傷組織分化,其中10μmol/m2·s分化率最高達(dá)93.3%,但芽質(zhì)量最好的是15μmol/m2·s的光照,暗環(huán)境下芽的分化難以進(jìn)行,20μmol/m2·s光照對芽的分化不利。
3 結(jié)論與討論
綜合來看,“維多”的葉柄比葉片誘導(dǎo)愈傷容易,愈出率高,愈出時間短,分化芽 的數(shù)量較多,2個部位分化芽的質(zhì)量無明顯差異。光質(zhì)配比為5R:1B,光強(qiáng)為10~15μmol/m2·s的組合光源對紅掌愈傷組織培養(yǎng)最有利。
本實(shí)驗(yàn)只研究了光環(huán)境對紅掌愈傷組織培養(yǎng)的影響,其結(jié)果還受取材部位,培養(yǎng)基配方,激素配比,設(shè)備環(huán)境等因素的影響,有些條件的設(shè)置是根據(jù)前人的研究數(shù)據(jù)[1],結(jié)果會有一定的差異性,還需要進(jìn)一步的研究,以期為紅掌組培快繁體系的優(yōu)化提供更準(zhǔn)確的數(shù)據(jù)支持。
參考文獻(xiàn)
[1]林茂,王華新,唐遒冥,等.紅掌組織培養(yǎng)研究進(jìn)展[J].北方園藝,2012(24):192-196.
[2]蘭芹英,李啟任,何蕙英,等.紅掌愈傷組織誘導(dǎo)和芽的分化[J].園藝學(xué)報,2003,30(1):107-109.