劉 莉 錢 程 甘志德 夏興建

(1.江蘇農(nóng)牧科技職業(yè)學(xué)院，江蘇泰州 225300；2.江蘇省如皋市丁堰鎮(zhèn)畜牧獸醫(yī)站，江蘇如皋 226500)

不同硒添加水平對仔豬生長性能和腸黏膜免疫的影響

劉 莉1錢 程1甘志德1夏興建2

(1.江蘇農(nóng)牧科技職業(yè)學(xué)院，江蘇泰州 225300；2.江蘇省如皋市丁堰鎮(zhèn)畜牧獸醫(yī)站，江蘇如皋 226500)

目的：在飼糧中添加兩種不同劑量的亞硒酸鈉來研究亞硒酸鈉對仔豬生長性能和腸黏膜免疫功能的影響，并與基礎(chǔ)日糧組進(jìn)行比較觀察，來探討亞硒酸鈉提高仔豬生長性能和腸黏膜免疫功能的作用機(jī)制。方法：選用30頭體重相近的新生杜長大三元雜交仔豬進(jìn)行試驗(yàn)，試驗(yàn)分3組，每組10頭，第一組為對照組添加基礎(chǔ)日糧，第二組仔豬飼喂基礎(chǔ)日糧+0.6mg·kg-1亞硒酸鈉，第三組仔豬飼喂基礎(chǔ)日糧+0.8mg·kg-1亞硒酸鈉。在仔豬14、24、32和45日齡時稱重測定生長性能。并在仔豬45日齡每組各剖殺3頭仔豬，剖殺取得的樣品用于測定仔豬小腸上皮間淋巴細(xì)胞（IELs）和杯狀細(xì)胞（GSs）數(shù)量。結(jié)果：兩組亞硒酸鈉都能顯著提高仔豬生長性能和小腸上皮間淋巴細(xì)胞、杯狀細(xì)胞數(shù)量。

仔豬 硒 生長性能 腸黏膜免疫

硒是動物機(jī)體必需的微量元素[1]，具有提高機(jī)體的抗氧化能力、免疫力和促進(jìn)生長、改善肉質(zhì)等功能。仔豬缺硒會引起白肌病、肝壞死、食欲下降和生長遲緩。

據(jù)報道，在我國有一條從東北向西南走向的狹長地帶，屬于缺硒地帶。在這一地區(qū)的生產(chǎn)中為了滿足仔豬健康生長的需要量，必須在日糧中添加一定量的外源性硒[2]。但是添加劑量如何確定，必須要經(jīng)過實(shí)驗(yàn)研究。因?yàn)樘砑舆^少起不到補(bǔ)硒的目的，過多又極易引起仔豬中毒。本文以生長性能和腸黏膜免疫功能為指標(biāo)闡述了不同劑量硒對仔豬免疫力的影響，為現(xiàn)代養(yǎng)豬場的硒添加水平提供了理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)動物

供試動物為泰州市某豬場提供的“杜長大”三元雜交仔豬。將日齡一致、體重相近的3窩（共30頭）新生“杜長大”仔豬隨機(jī)分為三組，每組三窩（10頭），進(jìn)行編號。第一組為對照組添加基礎(chǔ)日糧，第二組仔豬飼喂基礎(chǔ)日糧+0.6mg·kg-1亞硒酸鈉，第三組仔豬飼喂基礎(chǔ)日糧+0.8mg·kg-1亞硒酸鈉。實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)日糧是參照美國NRC（1998版）仔豬營養(yǎng)需要配合而成，其配方及營養(yǎng)水平見表1。處理組日糧是在基礎(chǔ)日糧的基礎(chǔ)上，以逐級放大混勻方法預(yù)混后密封保存?zhèn)溆谩Ｗ胸i從7日齡開始誘食，24日齡斷奶，在14日齡時對試驗(yàn)組加入亞硒酸鈉預(yù)混日糧。試驗(yàn)期為45d。試驗(yàn)豬采取群飼，自由采食、飲水。每次喂量以仔豬吃飽后料槽內(nèi)略有余料為度。試驗(yàn)期間的免疫消毒按豬場常規(guī)程序進(jìn)行。

表1 基礎(chǔ)日糧配方及營養(yǎng)水平

*向每千克基礎(chǔ)日糧提供：VA5250IU；VD31050IU；VE4.5IU；VK31.2mg；VB10.375mg；VB21.8mg；VB60.15mg；VB120.0075mg；煙酸（煙酰胺）6mg；泛酸鈣3.75mg；葉酸0.15mg；生物素0.0075mg；賴氨酸0.75mg；抗氧化劑0.045mg；酶制劑1000mg；香味劑40mg；甜味劑 40mg；新霉素20mg；Mn（MnSO4·H2O） 10.18mg；I（KI）0.4mg；Se（Na2SeO3）0.3mg.

*Provided per kilogram of basal diet：VA5250IU；VD31050IU；VE4.5IU；VK31.2mg；VB10.375mg；VB21.8mg；VB60.15mg；VB120.0075mg；Niacin 6mg；Pantothenic calcium 3.75mg；Folic acid 0.15mg；D-biotin 0.0075mg；Lysine 0.75mg；Antioxidant 0.045mg；Enzyme preparation 1000mg；Flavour agents 40mg；Sweet agents 40mg；Neomycin 20mg；Mn（MnSO4·H2O）10.18mg；I（KI）0.4mg；Se（Na2SeO3）0.3mg。

1.2 實(shí)驗(yàn)藥物

亞硒酸鈉粉劑

1.3 實(shí)驗(yàn)方法

1.3.1 生長性能

在試驗(yàn)正式開始后的第14、24、45d，每天上午7：00～9：00對試驗(yàn)仔豬進(jìn)行空腹稱重、稱量剩余的料量，記錄階段耗料量，計算日采食量、平均日增重和料重比。同時記錄試驗(yàn)仔豬24～45日齡之間，每天每組腹瀉頭數(shù)，并計算腹瀉率。

平均日采食量=（配料總量-剩料量）/試驗(yàn)天數(shù)×每組豬數(shù)。

平均日增重=（試驗(yàn)?zāi)┢骄w重-試驗(yàn)初平均體重）/試驗(yàn)天數(shù)。

料重比=平均日采食量/平均日增重。

腹瀉率（%）=∑（腹瀉頭數(shù)×腹瀉天數(shù)）/（實(shí)驗(yàn)總天數(shù)×仔豬總頭數(shù)）×100%。

1.3.2 小腸上皮間淋巴細(xì)胞（IELs）和杯狀細(xì)胞（GSs）數(shù)量的檢測：

仔豬剖殺均在剖殺日齡當(dāng)日進(jìn)行。剖殺前12h停食，隨機(jī)從各處理組中選三頭，采用頸靜脈放血的辦法處死，打開腹腔，立即結(jié)扎賁門瓣幽門瓣直腸遠(yuǎn)端，將消化道及消化腺取出，小心剝離開，小腸按解剖位置分成十二指腸、空腸、回腸三段。在十二指腸近端（5cm處）、空腸近端1/4處、空腸遠(yuǎn)端1/4處、回腸中段分別用利剪連續(xù)取下近1cm的腸管三段，迅速放入備用10%甲醛固定液中，搖勻，待做組織切片，24h后將10%甲醛固定液中的標(biāo)本經(jīng)水洗、透明、浸蠟、包埋等處理后，在室溫下切成4um的切片，蘇木精-伊紅染色，封片。在十二指腸、空腸前段、回腸組織切片上，選5個典型視野（絨毛完整、走向平直），測量每100個腸上皮細(xì)胞中淋巴細(xì)胞數(shù)和杯狀細(xì)胞數(shù)。

1.4 數(shù)據(jù)處理與分析

數(shù)據(jù)均以X±SD表示，采用SAS9.0統(tǒng)計軟件中的ANOVA過程進(jìn)行方差分析，多重比較采用Duncan’s法。

2 結(jié)果與分析

2.1 硒對仔豬生長性能的影響

由表2可知，與第一組比較：仔豬個體重在45日齡時，第二組極顯著升高（P＜0.01），第三組升高顯著（P＜0.05）；平均日增重在14～24日齡第二組升高顯著（P＜0.05），24～45日齡第二組升高極顯著（P＜0.01），第三組升高顯著（P＜0.05）；平均日采食量24～45日齡極顯著升高（P＜0.01）；料重比在24～45日齡第二組升高極顯著（P＜0.01），第三組升高顯著（P＜0.05）；腹瀉指數(shù)第二組、第三組升高均極顯著（P＜0.01）。

與第三組比較：第二組仔豬個體重在45日齡時，升高顯著（P＜0.05）；平均日增重在14～45日齡升高顯著（P＜0.05）；平均日采食量在24～45日齡升高極顯著（P＜0.01）；料重比在24～45日齡升高顯著（P＜0.05）。

表2 3組仔豬生產(chǎn)性能及腹瀉率的比較

2.2 硒對仔豬腸上皮間淋巴細(xì)胞數(shù)量的影響

表3 3組仔豬小腸黏膜上皮間淋巴細(xì)胞數(shù)量的比較

由表3可見第二組的上皮內(nèi)淋巴細(xì)胞數(shù)極顯著高于第一組（p＜0.01）；第三組在十二指腸和空腸前端部位的IELs數(shù)極顯著高于第一組（p＜0.01），而在空腸后端和回腸部位是顯著高于第一組（P＜0.05）；第二組與第三組相比只有十二指腸和回腸部位升高顯著（P＜0.05），其他部位不顯著（P＞0.05）。

2.3 硒對仔豬腸上皮間杯狀細(xì)胞數(shù)量的影響

表4 3組仔豬小腸黏膜上皮間杯狀細(xì)胞數(shù)量的比較

由表4可以看出第二組小腸各個部位上皮內(nèi)杯狀細(xì)胞數(shù)都極顯著高于第一組（p＜0.01）；而第三組只有空腸后端GSs數(shù)與對照組相比升高不顯著其他三個部位上皮內(nèi)杯狀細(xì)胞數(shù)都顯著高于第一組（p＜0.05）；第二組在十二指腸部位極顯著高于第三組（p＜0.01），在回腸部位升高不顯著（P＞0.05），其他兩個部位GSs數(shù)都顯著高于第二組（p＜0.05）。各實(shí)驗(yàn)組，杯狀細(xì)胞的數(shù)量從十二指腸到回腸，呈從前到后逐漸增多趨勢。

3 討論

初生仔豬生長發(fā)育快，新陳代謝旺盛，但各項(xiàng)生理指標(biāo)不健全，所以易受各種因素影響，導(dǎo)致機(jī)體機(jī)能下降，抵抗力降低，腸道菌群失調(diào)。特別是斷奶時，腸絨毛萎縮，天然黏膜保護(hù)屏障作用降低，黏膜抵御能力下降，使得致病性大腸桿菌在斷奶仔豬腸中大量繁殖，從而引起腹瀉，進(jìn)而導(dǎo)致生長遲緩甚至死亡。有試驗(yàn)結(jié)果顯示，硒添加劑可以通過影響仔豬免疫內(nèi)分泌系統(tǒng)而促進(jìn)仔豬生長[3]。本試驗(yàn)中，添加了不同劑量亞硒酸鈉后，仔豬的體重、日增重和日采食量均顯著或極顯著升高，腹瀉率卻極顯著降低。但是可以看出添加劑量為0.6mg·kg-1的實(shí)驗(yàn)組效果要優(yōu)于添加劑量為0.8mg·kg-1的實(shí)驗(yàn)組，說明硒的添加要適量。

Gaskins（1996）報道，腸上皮細(xì)胞是仔豬抵抗飼料毒素及外來致病菌的第一道防線，其表面含有毒素及細(xì)菌受體，且包含具有一定免疫功能的淋巴細(xì)胞和杯狀細(xì)胞[4]。初生仔豬腸上皮這些免疫組分在結(jié)構(gòu)和功能上均發(fā)育不全，使腸道對抗外來刺激的能力下降。這時飼喂固體飼料，雖然腸道受到的刺激很強(qiáng)，但仔豬卻沒有能力對這些刺激產(chǎn)生應(yīng)答，故腸道表現(xiàn)為較低的免疫激活狀態(tài)。從本實(shí)驗(yàn)結(jié)果可以看出添加一定劑量的硒可顯著提高仔豬小腸黏膜上皮間淋巴細(xì)胞和杯狀細(xì)胞數(shù)量。

[1] 屈健.動物營養(yǎng)中重要的微量元素-硒[J].飼料工業(yè)，1997，18（2）：13-16.

[2] 楊維東，劉潔生，彭喜春編著.微量元素與健康[M].湖北：華中科技大學(xué)出版社，2007：53.

[3] 楊華，傅衍，陳安國.有機(jī)硒對杜長大商品豬生產(chǎn)性能、胴體性狀、肉質(zhì)的影響[J].中國飼料，2004，（6）：21-24.

[4] Gaskins H R.The intestinal immune system：gut reaction and growth of the pig[J].Journal of Animal Science，1996，74（Supp1.1）：169．