周俊勇

（南宮市農(nóng)業(yè)局，河北邢臺(tái)055750）

引言

有關(guān)于免疫膠體金快速診斷技術(shù)，最早研究時(shí)間可以去追溯到1985年，在1985年人們首次將免疫膠體金技術(shù)應(yīng)用到對(duì)于血清和尿液方面的免疫滲濾試驗(yàn)當(dāng)中之后，后續(xù)在1989年，世界上首次成功的研制了能夠用于檢測(cè)人類免疫缺陷病毒抗體的試劑盒。因?yàn)槊庖吣z體金快速診斷技術(shù)自身所具備的快速、簡(jiǎn)便等特點(diǎn)，其本身無(wú)論是在醫(yī)療方面還是在其他的領(lǐng)域都是得到了廣泛的應(yīng)用。但是，就目前國(guó)內(nèi)的實(shí)際現(xiàn)狀而言，對(duì)于免疫膠體金在獸醫(yī)行業(yè)領(lǐng)域的應(yīng)用，依舊還是處于一種不穩(wěn)定的起步階段。故而，本文以免疫膠體金快速診斷技術(shù)為基礎(chǔ)，淺析免疫膠體金快速診斷技術(shù)在獸醫(yī)診斷方面的應(yīng)用。

1　免疫膠體金快速診斷技術(shù)的主要原理和優(yōu)點(diǎn)特征

免疫膠體金快速診斷技術(shù)的主要原理是通過(guò)微孔濾膜來(lái)作為主要的固相載體，并且將已知的抗病原和抗體加入到需要進(jìn)行檢測(cè)的樣本之中，在此基礎(chǔ)上，經(jīng)過(guò)微孔膜自身的滲濾作用來(lái)去讓樣本中的抗體和抗原和膜上所包裹的抗原和抗體進(jìn)行更完善的結(jié)合。在此之后，通過(guò)運(yùn)用膠體金標(biāo)記物來(lái)和它之間產(chǎn)生化學(xué)上的反應(yīng)，以此，來(lái)去形成可見(jiàn)的結(jié)果論據(jù)。

就目前來(lái)看，國(guó)內(nèi)常用的方式主要有以下兩種，一種是免疫滲濾實(shí)驗(yàn)，也被稱之為是滴金免疫滲濾實(shí)驗(yàn)，而另一種則是免疫層析實(shí)驗(yàn)。目前，這兩種實(shí)驗(yàn)應(yīng)用的方法是最為廣泛的。

1.1　免疫滲透實(shí)驗(yàn)的應(yīng)用步驟

在進(jìn)行免疫滲濾實(shí)驗(yàn)的過(guò)程中，第一步驟是需要將微孔濾膜來(lái)作為固相的載體，在微孔濾膜的上面去固定已經(jīng)得知或者是已經(jīng)具有異變性的抗體和抗原。在這之后，將它放入到充滿著吸水材料的滲濾裝置當(dāng)中，一般來(lái)說(shuō)的話，這種裝置基本上是一個(gè)扁形的小盒，盒子的上方會(huì)有一個(gè)小孔，在進(jìn)行實(shí)驗(yàn)的過(guò)程中，可以將標(biāo)本和記標(biāo)的結(jié)合物分先后順序依次滴加到膜上，然后其會(huì)在膜上發(fā)生相應(yīng)的免疫結(jié)合反應(yīng)并出現(xiàn)色彩痕跡。

反應(yīng)本身因?yàn)闄z測(cè)物質(zhì)上的不同，所以其最終的實(shí)驗(yàn)過(guò)程和所得出的結(jié)果也是各不相同。一般來(lái)說(shuō)的話，常規(guī)的實(shí)驗(yàn)步驟一般在三到五步左右。

1.2　免疫層析實(shí)驗(yàn)的應(yīng)用步驟

在進(jìn)行免疫層析實(shí)驗(yàn)之前，首先需要將異性抗原或者是抗體去固定到膜上作為檢測(cè)帶使用，將膠體金標(biāo)記物在干燥的情況下放置在玻璃纖維的結(jié)合品墊上，將一端和膜進(jìn)行連接，而另一端則和樣品墊進(jìn)行鏈接。開(kāi)始進(jìn)行實(shí)驗(yàn)的時(shí)候，在加入液體樣本之后，樣品本身通過(guò)表面的毛細(xì)管開(kāi)始向四周圍移動(dòng)，并且其含有標(biāo)志物的玻璃纖維此刻也再度開(kāi)始水化，其也和膠體金標(biāo)記物產(chǎn)生一定的化學(xué)反應(yīng)。在此基礎(chǔ)上，兩者之間都會(huì)向前繼續(xù)涌動(dòng)至檢測(cè)線附近。如果在這期間出現(xiàn)非常明顯的紅色標(biāo)記，那么就代表著檢測(cè)樣品內(nèi)部并不含有待測(cè)物。

1.3　免疫膠體金檢測(cè)的主要優(yōu)點(diǎn)

對(duì)于此類檢測(cè)方法的主要優(yōu)點(diǎn)，其主要是操作方便，不需要用到任何的儀器、易于判定、特異性好、反應(yīng)快捷迅速、靈敏度高等方面的特點(diǎn)和優(yōu)勢(shì)

2　免疫膠體金快速診斷技術(shù)在獸醫(yī)診斷當(dāng)中的實(shí)際應(yīng)用

2.1　通過(guò)對(duì)于免疫金快速診斷技術(shù)的應(yīng)用來(lái)去檢測(cè)抗體

對(duì)于這種方法的應(yīng)用基本上是圍繞在NC膜和其內(nèi)被包裹的抗原，利用膠體金來(lái)去標(biāo)記相應(yīng)的抗原或者是SPA，在這期間，如果檢測(cè)出來(lái)的結(jié)果是陽(yáng)性的話，那么檢測(cè)樣品中的抗體就會(huì)分別和NC膜上的抗原以及金標(biāo)抗原或者是金標(biāo)SPA相結(jié)合。這之后會(huì)出現(xiàn)類似于紅色的線或者是紅色斑點(diǎn)，倘若檢測(cè)樣品呈陰性的話，則不會(huì)出現(xiàn)此類的反應(yīng)。

2.2　采用免疫金快速診斷技術(shù)來(lái)更好的檢測(cè)病原

首先，我們以雙抗體夾心法為例，在進(jìn)行實(shí)驗(yàn)之前，首先我們先選擇兩種病原的抗體，在這抗體之中將其分別用來(lái)包被NC膜和標(biāo)記膠體金。等到實(shí)驗(yàn)完成之后，如果現(xiàn)實(shí)樣品為陽(yáng)性的話，那么樣品中所包含的病源就會(huì)和NC膜上的抗體和金標(biāo)抗體相結(jié)合，從而，在樣品結(jié)果當(dāng)中顯示出紅色的斑點(diǎn)和線，如果呈陰性，則不會(huì)出現(xiàn)這樣的反應(yīng)。

結(jié)語(yǔ)

從免疫金技術(shù)的角度上來(lái)說(shuō)，首先，它已經(jīng)廣泛的應(yīng)用到我國(guó)的實(shí)際醫(yī)學(xué)臨床治療。除此之外，免疫金技術(shù)快速診斷技術(shù)為我國(guó)的動(dòng)物疫病診斷提供了新的發(fā)展方向，而且，依據(jù)其本身所具有的便捷、快速等方面的特點(diǎn)，對(duì)于我國(guó)未來(lái)的牲畜診斷機(jī)制而言，是具有著非常重要的價(jià)值和意義。

[1]免疫膠體金快速診斷技術(shù)的臨床應(yīng)用與質(zhì)量控制[J].張書永.中國(guó)醫(yī)學(xué)裝備.2013(05).

[2]膠體金免疫層析技術(shù)在獸醫(yī)臨床診斷中的應(yīng)用進(jìn)展[J].莊金秋,梅建國(guó),沈志強(qiáng).中國(guó)動(dòng)物檢疫.2012(09).

[3]膠體金免疫技術(shù)在豬瘟診斷上的應(yīng)用進(jìn)展 [J].陳劍閣.中國(guó)動(dòng)物保健.2011(06).

[4]膠體金快速診斷技術(shù)在獸醫(yī)臨床診斷中的應(yīng)用[J].楊雪林,張福官,楊衛(wèi)華,周海南,沈政會(huì).安徽農(nóng)學(xué)通報(bào)(下半月刊).2010(02).