扁桃斑鳩菊無性快繁及栽培產業(yè)化技術

王華宇+陳乃明+楊利平+梁剛++蔡林

摘要：建立了扁桃斑鳩菊的組培快繁技術體系，并進行了扦插育苗和造林技術研究，初步完成了種苗的規(guī)?；a和示范林建設。研究結果表明，外植體表面消毒以75%乙醇預處理10 s，再用0.1%氯化汞浸泡8 min效果最好；繼代培養(yǎng)的最適宜培養(yǎng)基為MS+6-BA 0.2 mg/L+IBA 0.05 mg/L，增殖系數可達到4.0；最適宜的生根培養(yǎng)基為 1/2MS+IBA 0.1 mg/L，生根率可達100%；將生根后的植株進行移栽，在輕基質（泥炭 ∶[KG-*3]珍珠巖=2 ∶[KG-*3]1）和黃心土中成活率均可達90%以上；其插穗在輕基質中扦插成活率為86.7%。造林1年后，成活率達到96%以上，平均株高可達2.9 m，適應性強，易于實現產業(yè)化。

關鍵詞：扁桃斑鳩菊；無性快繁；栽培

中圖分類號：S317文獻標志碼：A

文章編號：1002-1302（2017）05-0033-04

扁桃斑鳩菊（Vernonia amygdalina Del.），別稱桃葉斑鳩菊、神奇葉、苦樹、南非樹等，為菊科斑鳩菊屬植物，原產于非洲。扁桃斑鳩菊可以長成大樹，栽培狀態(tài)下多被修剪為灌木或籬笆，高2～5 m，喜光，宜在潮濕環(huán)境中生長，也耐干旱，適應所有土壤類型。扁桃斑鳩菊葉子可以安全食用，在尼日利亞等地被當作一種蔬菜。其葉片具有獨特的氣味和苦澀感，因而常被稱為苦葉[1-3]，可作為殺菌劑或啤酒花的替代品[4]。在西部非洲，扁桃斑鳩菊的葉子提取物被用作藥物，用于治療瘧疾、蠕蟲感染、厭食和婦科疾病治療，有研究認為，其葉可以安全食用[5]。此外，Howard等通過扁桃斑鳩菊的提取物作用于乳腺癌細胞試驗，認為Vernonia amygdalina是較好的純天然抗腫瘤制劑[6]。目前，已從扁桃斑鳩菊中分離出5類共32種化合物，其主要活性成分有皂苷、生物堿、萜類、類固醇、香豆素類等，具有多種藥用價值，其中包括確切的抗腫瘤作用值得在腫瘤治療中應用[1]。

目前，已知菊科斑鳩菊屬植物約1 000多種，我國已發(fā)現該屬植物約30種，主要分布于西南至東南、臺灣、新疆等地區(qū)[7]。扁桃斑鳩菊在東南亞及中國臺灣等地民間應用較多，而中國大陸則相對比較陌生，近年來，兩廣地區(qū)陸續(xù)引進種植。關于扁桃斑鳩菊的生物學特征及繁育方面報道甚少，而選擇優(yōu)良種源和單株，通過植物組織培養(yǎng)、扦插等無性快繁技術，可以保證母本的優(yōu)良性狀，實現新品種快速開發(fā)。尤其是植物組培快繁技術，有利于種苗快速繁殖和種質資源保存，也為更深層次的開發(fā)研究提供了技術平臺。本研究通過構建組培快繁技術體系和扦插繁殖技術研究，初步實現了扁桃斑鳩菊種苗的規(guī)?；a，并進行了造林技術研究和示范林營建，為扁桃斑鳩菊的標準化生產和推廣應用提供了參考依據。

1材料與方法

1.1材料

材料來源為廣西欽州市林業(yè)科學研究所試驗苗圃栽培的扁桃斑鳩菊。選取生長健壯、無病蟲害的優(yōu)良植株，剪取木質化程度較輕的當年生嫩枝為外植體。

1.2試驗方法

1.2.1外植體消毒

將采回的莖段截成長1.2～1.5 cm的帶節(jié)小段，剪去葉片，只保留葉柄基部長約0.5 cm，流水沖洗20 min備用。在超凈工作臺上，用75%乙醇浸泡10 s，0.1%氯化汞振蕩消毒5～12 min，再用無菌水沖洗5次洗去殘留藥液，用無菌濾紙吸干水分后，切去莖段兩端和葉柄上部少許，長度保留約0.2 cm，接種于誘導培養(yǎng)基上。氯化汞消毒時間設定為5、8、10、12 min，每種處理20個外植體，篩選出最佳滅菌時間。

1.2.2培養(yǎng)基配方設計

誘導培養(yǎng)基為MS+6-BA 0.5 mg/L+NAA 0.05 mg/L。繼代培養(yǎng)時，以MS為基本培養(yǎng)基，添加6-BA（0.1～0.5 mg/L）、NAA（0.00～0.05 mg/L）或IBA（0.00～0.05 mg/L）等不同激素濃度組合進行培養(yǎng)。生根培養(yǎng)時，以1/2MS為基本培養(yǎng)基（僅大量元素減半），添加不同濃度的NAA（0.00～0.15 mg/L）或IBA（0.00～0.15 mg/L）進行培養(yǎng)。

1.2.3組織培養(yǎng)條件

除特別說明外，上述培養(yǎng)基均添加3.0%蔗糖和0.6%瓊脂粉，高壓滅菌前pH值調整至6.0。培養(yǎng)室培養(yǎng)溫度為（23±2）℃，繼代培養(yǎng)光照時間12 h/d，光照強度1 500～2 500 lx；生根培養(yǎng)光照時間16 h/d，光照強度 1 500～2 500 lx。

1.2.4組織培養(yǎng)過程

將消毒完成后的外植體接種于誘導培養(yǎng)基中，定期觀察記錄消毒結果，記錄內容包括消毒外植體數、消毒時間過長造成的外植體死亡數、外植體霉菌細菌污染數、外植體成活數和側芽的生長情況。3周后將記錄結果進行統(tǒng)計，取各組的平均值作為結果。

[JZ]誘導率=（出芽外植體數/接種數）×100%。

繼代和生根均用手術刀和鑷子進行操作。待無菌芽生長至2～3 cm時，轉入繼代培養(yǎng)基進行培養(yǎng)，培養(yǎng)周期為21 d。在相同培養(yǎng)基中連續(xù)培養(yǎng)2個周期，待增殖苗生長穩(wěn)定后，觀察芽的生長情況。每種處理為150個接種芽，隨機抽取30個接種芽，統(tǒng)計增殖系數，篩選最適宜的增殖培養(yǎng)基。增殖率=（增殖株數/接種數）×100%；芽增殖系數=增殖芽數/出芽株數。

取帶有2～3個節(jié)的試管苗頂端轉入生根培養(yǎng)基進行培養(yǎng)，截取長度約3 cm，每種處理為150株。生根培養(yǎng)2周后，隨機抽取30株組培苗，統(tǒng)計植株高度、葉色、生根率、平均生根數等生長指標，篩選最佳的生根培養(yǎng)基。生根率=（生根株數/接種數）×100%；平均生根數=生根數量/接種株數。

1.2.5不同栽培基質對扁桃斑鳩菊移栽苗生長的影響

將完成生根階段的試管苗，洗干凈基部培養(yǎng)基，分別種植于輕基質（泥炭 ∶[KG-*3]珍珠巖=2 ∶[KG-*3]1）和黃心土中。分別移栽500株，3周后統(tǒng)計移栽成活率。成活率=（成活株數/移栽株數）×100%。

1.2.6不同基質對扁桃斑鳩菊扦插的影響

扦插試驗采用容器（黑色育苗袋）扦插。選取長10～30 cm的2～3年生健壯枝條為插穗，扦插前均在200 mg/L NAA溶液中浸泡 30 min（液面浸沒插穗下部1/4～1/3）。扦插基質選用黃心土和輕基質（泥炭 ∶[KG-*3]珍珠巖=2 ∶[KG-*3]1，體積比）2種基質，裝袋后均用0.5%的KMnO4溶液噴灑消毒。

1.2.7不同栽植方式對扁桃斑鳩菊造林苗生長的影響

扁桃斑鳩菊造林地選擇欽州市林業(yè)科學研究所試驗林地，年均氣溫約22 ℃，坡度10°～35°，土質微酸性，光照充足，林地通風良好。造林選用容器苗造林，造林面積1 hm2，行距 1.5 m，株距1.5 m。扁桃斑鳩菊容器苗造林5個月后，于2015年5月選擇其中立地條件相似的幼苗200株，進行截頂處理，截頂高度為距地面25～30 cm，截頂后截面用蠟密封處理。2015年12月，分別統(tǒng)計不同栽植方式的成活率、株高、分枝數、抗性、單株葉片鮮質量等生長指標。成活率=（成活株數/200株）×100%；單株葉片鮮質量采取隨機抽取30株，全部摘除葉片后立即稱質量，取其平均值。

2結果與分析

2.1無菌材料獲得

在誘導培養(yǎng)基中，會在外植體的表面或莖段基部出現愈傷組織，但大多呈現水漬狀且質地疏松，很難誘導出芽，而側芽則易于誘導且生長迅速（圖1-A）。初代培養(yǎng)3周時，側芽可高達3～4 cm，具3張以上葉片（圖1-B），轉入增殖培養(yǎng)基進行繼代培養(yǎng)。

2.2扁桃斑鳩菊的繼代培養(yǎng)

扁桃斑鳩菊生長迅速，培養(yǎng)3周即可進行下一次繼代，超過4周易出現黃葉和小芽死亡的情況，影響增殖效率。培養(yǎng)中發(fā)現扁桃斑鳩菊對植物激素的種類和濃度比較敏感，從表2可以看出，當6-BA濃度達到0.3 mg/L時容易出現玻璃化現象，當濃度達到0.5 mg/L時，玻璃化現象尤為嚴重，且基部水漬狀愈傷組織較多；6-BA濃度為0.1 mg/L時，植株生長細弱，節(jié)間長，基部分枝少，影響增殖效率和種苗質量。當 6-BA 濃度為0.2 mg/L時，植株生長健壯（圖1-C），6-BA與IBA配合使用時，試管苗的生長狀況最佳。因此選用 MS+6-BA 0.2 mg/L+IBA 0.05 mg/L為扁桃斑鳩菊繼代的最適宜培養(yǎng)基。

2.3扁桃斑鳩菊的生根誘導

扁桃斑鳩菊生根培養(yǎng)2周時，觀察統(tǒng)計各組培養(yǎng)基的試驗效果。統(tǒng)計生根數量時，長度達到0.5 cm的肉質根方可計入生根數。從表3可以看出，以1/2MS為基本培養(yǎng)基附加濃度0.05～0.15 mg/L的NAA或IBA均可取得較高的生根率，且平均生根數量都在5條以上，說明扁桃斑鳩菊的生根誘導較為容易。但采用NAA誘導時，雖然已經降低了基本培養(yǎng)基中無機鹽的用量，但仍會出現不同程度的愈傷組織和玻璃化現象，不利于試管苗的移栽。采用IBA誘導生根時，以1/2MS+IBA 0.1 mg/L誘導生根的效果最好，根系最為發(fā)達，小苗的長勢最好，最適合后期移栽。

[HTK]2.4不同栽培基質對扁桃斑鳩菊移栽苗生長的影響[HT]

3結論與討論

目前，斑鳩菊屬植物的研究重點主要集中在抗腫瘤活性、對免疫系統(tǒng)影響、皮膚病治療和抗感染等藥理學方面，尤以新疆阿克蘇地區(qū)的中藥材——驅蟲斑鳩菊的研究為多。關于該屬植物生物學特性、親緣關系、繁殖方法等方面研究較少，如何加強相關基礎研究，構建現代生物技術研究平臺，對加速推進該屬植物的產業(yè)開發(fā)尤為重要。

扁桃斑鳩菊生長迅速，繼代苗的培養(yǎng)周期僅為3周，但容易出現玻璃化現象，繼代初期，參照胡石開等驅蟲斑鳩菊的組培技術[8]，試驗培養(yǎng)基MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.5 mg/L，試管苗玻璃化嚴重，且大多不可逆轉。后經反復試驗，設定培養(yǎng)基MS+6-BA 0.2 mg/L+IBA 0.05 mg/L，光照強度為1 500～2 500 lx時扁桃斑鳩菊增殖系數達到4.0，且小苗生長健壯。

組培生根環(huán)節(jié)中發(fā)現，當添加生根誘導激素NAA濃度超過0.05 mg/L時組培苗即易出現玻璃化現象，而添加IBA濃度達到0.15 mg/L時尚未出現玻璃化，在金葉苔草的組培育苗過程中也曾發(fā)現類似的現象[9]。說明雖然NAA、IBA都是誘導組培苗生根的最常用植物生長調節(jié)劑，但對特定植物誘導生根的效果有時差別明顯，這可能與其作用機制有關。王喆之等在研究槐樹試管苗生根時，就不同生長素種類對誘導的不定根來源、形態(tài)方面進行了專門研究，研究結果表明，IBA、NAA對不定根發(fā)生、生長都有促進作用，但IBA誘導的不定根細而長，生長快，且不定根直接來源于莖，而NAA誘導的根短而粗，且不定根表面常重新愈傷化，不利于試管苗成活[10]。

扁桃斑鳩菊的移栽苗在黃心土、輕基質中成活率均可達到90%以上，其插穗在2種基質中扦插成活率分別達到 84.7%、86.7%，說明扁桃斑鳩菊適應性強，對土壤要求不嚴

格。選擇輕基質還是黃心土進行育苗，需要結合生產規(guī)模、運輸距離等因素進行成本核算和風險分析。小規(guī)模經營時，扦插繁殖具有取材方便、設施要求不高的優(yōu)勢，但由于插穗的粗細、老嫩程度、內源激素含量等因素影響，扦插苗的萌芽、生根和生長情況一致性較差，不適合標準化生產。

扁桃斑鳩菊、適應性強，造林后生長迅速，1年生造林苗高度可達2.9 m。其葉片是食用和藥用的主要部位，試驗不同栽培管理技術對葉片生物量的影響具有現實意義。造林苗生長初期截頂處理后，較留頂苗而言，株高矮化，分枝數增加，葉色濃綠，節(jié)間縮短，抗風能力增強，平均單株葉片生物量較大，便于進行林地管理和葉片采收。本研究尚未針對最佳截頂時機進行對比篩選，以及在植株達到 2 m 以上高度時是否應進行二次截頂或去枝促萌處理以達到葉片高產，這些都需要進一步深入研究。扁桃斑鳩菊的銷售體系尚未成熟，推廣種植尚存在較大風險，亟需加強其藥效研究和市場宣傳，進一步發(fā)掘其應有的價值。

參考文獻：

[1][ZK（#]楊早. 南非葉化學成分及藥理作用研究進展[J]. 南京中醫(yī)藥大學學報，2013，29（4）：397-400.

[2]Grubben G，Debton O A. Vegetables plant resources of tropical Africa：2[M]. Wageningen：Backhuys Publishers，2004：543-546.

[3]江燕. 抗癌植物扁桃斑鳩菊化學成分的研究[D]. 南寧：廣西大學，2010.

[4]孫東方. 扁桃斑鳩菊甲醇提取物對高粱糖化及釀造特性的影響[J]. 釀酒，1998（1）：66-68.

[5]Ibrahim N D，Abdurahman E M，Ibrahim G. Elemental analysis of the leaves of Vernonia amygdalina and its biological evaluation in rats[J]. Nigerian Journal of Natural Products and Medicine，2001，5（1）：13-16.

[6]Howard C，Stevens J，Izevbigie E，et al. Time and dose-dependent modulation of phase 1 and phase 2 gene expression in response to treatment of MCF-7 cells with a natural anti-cancer agent[J]. Cellular and Molecular Biology，2003，49（7）：1057-1065.

[7]孫力，巴玉蘭，于魯海，等. 斑鳩菊屬植物藥理活性研究進展[J]. 新疆中醫(yī)藥，2009，27（6）：82-85.

[8]胡石開，王曉軍，郝秀英，等. 驅蟲斑鳩菊的組織培養(yǎng)與快速繁殖[J]. 植物生理學通訊，2008，44（2）：310.

[9]王華宇，何貴整，陳乃明，等. 金葉苔草標準化繁育技術研究[J]. 上海農業(yè)學報，2013，29（4）：64-67.[ZK）]

[10][ZK（#]王喆之，胡正海. IAA，IBA，NAA和2，4-D對槐樹試管苗生根的影響[J]. 陜西師范大學學報（自然科學版），1997，25（2）：57-59.

王華宇 陳乃明 楊利平 梁剛 蔡林

摘要：建立了扁桃斑鳩菊的組培快繁技術體系，并進行了扦插育苗和造林技術研究，初步完成了種苗的規(guī)模化生產和示范林建設。研究結果表明，外植體表面消毒以75%乙醇預處理10 s，再用0.1%氯化汞浸泡8 min效果最好；繼代培養(yǎng)的最適宜培養(yǎng)基為MS+6-BA 0.2 mg/L+IBA 0.05 mg/L，增殖系數可達到4.0；最適宜的生根培養(yǎng)基為 1/2MS+IBA 0.1 mg/L，生根率可達100%；將生根后的植株進行移栽，在輕基質（泥炭 ∶[KG-*3]珍珠巖=2 ∶[KG-*3]1）和黃心土中成活率均可達90%以上；其插穗在輕基質中扦插成活率為86.7%。造林1年后，成活率達到96%以上，平均株高可達2.9 m，適應性強，易于實現產業(yè)化。

關鍵詞：扁桃斑鳩菊；無性快繁；栽培

中圖分類號：S317文獻標志碼：A

文章編號：1002-1302（2017）05-0033-04

扁桃斑鳩菊（Vernonia amygdalina Del.），別稱桃葉斑鳩菊、神奇葉、苦樹、南非樹等，為菊科斑鳩菊屬植物，原產于非洲。扁桃斑鳩菊可以長成大樹，栽培狀態(tài)下多被修剪為灌木或籬笆，高2～5 m，喜光，宜在潮濕環(huán)境中生長，也耐干旱，適應所有土壤類型。扁桃斑鳩菊葉子可以安全食用，在尼日利亞等地被當作一種蔬菜。其葉片具有獨特的氣味和苦澀感，因而常被稱為苦葉[1-3]，可作為殺菌劑或啤酒花的替代品[4]。在西部非洲，扁桃斑鳩菊的葉子提取物被用作藥物，用于治療瘧疾、蠕蟲感染、厭食和婦科疾病治療，有研究認為，其葉可以安全食用[5]。此外，Howard等通過扁桃斑鳩菊的提取物作用于乳腺癌細胞試驗，認為Vernonia amygdalina是較好的純天然抗腫瘤制劑[6]。目前，已從扁桃斑鳩菊中分離出5類共32種化合物，其主要活性成分有皂苷、生物堿、萜類、類固醇、香豆素類等，具有多種藥用價值，其中包括確切的抗腫瘤作用值得在腫瘤治療中應用[1]。

目前，已知菊科斑鳩菊屬植物約1 000多種，我國已發(fā)現該屬植物約30種，主要分布于西南至東南、臺灣、新疆等地區(qū)[7]。扁桃斑鳩菊在東南亞及中國臺灣等地民間應用較多，而中國大陸則相對比較陌生，近年來，兩廣地區(qū)陸續(xù)引進種植。關于扁桃斑鳩菊的生物學特征及繁育方面報道甚少，而選擇優(yōu)良種源和單株，通過植物組織培養(yǎng)、扦插等無性快繁技術，可以保證母本的優(yōu)良性狀，實現新品種快速開發(fā)。尤其是植物組培快繁技術，有利于種苗快速繁殖和種質資源保存，也為更深層次的開發(fā)研究提供了技術平臺。本研究通過構建組培快繁技術體系和扦插繁殖技術研究，初步實現了扁桃斑鳩菊種苗的規(guī)模化生產，并進行了造林技術研究和示范林營建，為扁桃斑鳩菊的標準化生產和推廣應用提供了參考依據。

1材料與方法

1.1材料

材料來源為廣西欽州市林業(yè)科學研究所試驗苗圃栽培的扁桃斑鳩菊。選取生長健壯、無病蟲害的優(yōu)良植株，剪取木質化程度較輕的當年生嫩枝為外植體。

1.2試驗方法

1.2.1外植體消毒

將采回的莖段截成長1.2～1.5 cm的帶節(jié)小段，剪去葉片，只保留葉柄基部長約0.5 cm，流水沖洗20 min備用。在超凈工作臺上，用75%乙醇浸泡10 s，0.1%氯化汞振蕩消毒5～12 min，再用無菌水沖洗5次洗去殘留藥液，用無菌濾紙吸干水分后，切去莖段兩端和葉柄上部少許，長度保留約0.2 cm，接種于誘導培養(yǎng)基上。氯化汞消毒時間設定為5、8、10、12 min，每種處理20個外植體，篩選出最佳滅菌時間。

1.2.2培養(yǎng)基配方設計

誘導培養(yǎng)基為MS+6-BA 0.5 mg/L+NAA 0.05 mg/L。繼代培養(yǎng)時，以MS為基本培養(yǎng)基，添加6-BA（0.1～0.5 mg/L）、NAA（0.00～0.05 mg/L）或IBA（0.00～0.05 mg/L）等不同激素濃度組合進行培養(yǎng)。生根培養(yǎng)時，以1/2MS為基本培養(yǎng)基（僅大量元素減半），添加不同濃度的NAA（0.00～0.15 mg/L）或IBA（0.00～0.15 mg/L）進行培養(yǎng)。

1.2.3組織培養(yǎng)條件

除特別說明外，上述培養(yǎng)基均添加3.0%蔗糖和0.6%瓊脂粉，高壓滅菌前pH值調整至6.0。培養(yǎng)室培養(yǎng)溫度為（23±2）℃，繼代培養(yǎng)光照時間12 h/d，光照強度1 500～2 500 lx；生根培養(yǎng)光照時間16 h/d，光照強度 1 500～2 500 lx。

1.2.4組織培養(yǎng)過程

將消毒完成后的外植體接種于誘導培養(yǎng)基中，定期觀察記錄消毒結果，記錄內容包括消毒外植體數、消毒時間過長造成的外植體死亡數、外植體霉菌細菌污染數、外植體成活數和側芽的生長情況。3周后將記錄結果進行統(tǒng)計，取各組的平均值作為結果。

[JZ]誘導率=（出芽外植體數/接種數）×100%。

繼代和生根均用手術刀和鑷子進行操作。待無菌芽生長至2～3 cm時，轉入繼代培養(yǎng)基進行培養(yǎng)，培養(yǎng)周期為21 d。在相同培養(yǎng)基中連續(xù)培養(yǎng)2個周期，待增殖苗生長穩(wěn)定后，觀察芽的生長情況。每種處理為150個接種芽，隨機抽取30個接種芽，統(tǒng)計增殖系數，篩選最適宜的增殖培養(yǎng)基。增殖率=（增殖株數/接種數）×100%；芽增殖系數=增殖芽數/出芽株數。

取帶有2～3個節(jié)的試管苗頂端轉入生根培養(yǎng)基進行培養(yǎng)，截取長度約3 cm，每種處理為150株。生根培養(yǎng)2周后，隨機抽取30株組培苗，統(tǒng)計植株高度、葉色、生根率、平均生根數等生長指標，篩選最佳的生根培養(yǎng)基。生根率=（生根株數/接種數）×100%；平均生根數=生根數量/接種株數。

1.2.5不同栽培基質對扁桃斑鳩菊移栽苗生長的影響

將完成生根階段的試管苗，洗干凈基部培養(yǎng)基，分別種植于輕基質（泥炭 ∶[KG-*3]珍珠巖=2 ∶[KG-*3]1）和黃心土中。分別移栽500株，3周后統(tǒng)計移栽成活率。成活率=（成活株數/移栽株數）×100%。

1.2.6不同基質對扁桃斑鳩菊扦插的影響

扦插試驗采用容器（黑色育苗袋）扦插。選取長10～30 cm的2～3年生健壯枝條為插穗，扦插前均在200 mg/L NAA溶液中浸泡 30 min（液面浸沒插穗下部1/4～1/3）。扦插基質選用黃心土和輕基質（泥炭 ∶[KG-*3]珍珠巖=2 ∶[KG-*3]1，體積比）2種基質，裝袋后均用0.5%的KMnO4溶液噴灑消毒。

1.2.7不同栽植方式對扁桃斑鳩菊造林苗生長的影響

扁桃斑鳩菊造林地選擇欽州市林業(yè)科學研究所試驗林地，年均氣溫約22 ℃，坡度10°～35°，土質微酸性，光照充足，林地通風良好。造林選用容器苗造林，造林面積1 hm2，行距 1.5 m，株距1.5 m。扁桃斑鳩菊容器苗造林5個月后，于2015年5月選擇其中立地條件相似的幼苗200株，進行截頂處理，截頂高度為距地面25～30 cm，截頂后截面用蠟密封處理。2015年12月，分別統(tǒng)計不同栽植方式的成活率、株高、分枝數、抗性、單株葉片鮮質量等生長指標。成活率=（成活株數/200株）×100%；單株葉片鮮質量采取隨機抽取30株，全部摘除葉片后立即稱質量，取其平均值。

2結果與分析

2.1無菌材料獲得

在誘導培養(yǎng)基中，會在外植體的表面或莖段基部出現愈傷組織，但大多呈現水漬狀且質地疏松，很難誘導出芽，而側芽則易于誘導且生長迅速（圖1-A）。初代培養(yǎng)3周時，側芽可高達3～4 cm，具3張以上葉片（圖1-B），轉入增殖培養(yǎng)基進行繼代培養(yǎng)。

2.2扁桃斑鳩菊的繼代培養(yǎng)

扁桃斑鳩菊生長迅速，培養(yǎng)3周即可進行下一次繼代，超過4周易出現黃葉和小芽死亡的情況，影響增殖效率。培養(yǎng)中發(fā)現扁桃斑鳩菊對植物激素的種類和濃度比較敏感，從表2可以看出，當6-BA濃度達到0.3 mg/L時容易出現玻璃化現象，當濃度達到0.5 mg/L時，玻璃化現象尤為嚴重，且基部水漬狀愈傷組織較多；6-BA濃度為0.1 mg/L時，植株生長細弱，節(jié)間長，基部分枝少，影響增殖效率和種苗質量。當 6-BA 濃度為0.2 mg/L時，植株生長健壯（圖1-C），6-BA與IBA配合使用時，試管苗的生長狀況最佳。因此選用 MS+6-BA 0.2 mg/L+IBA 0.05 mg/L為扁桃斑鳩菊繼代的最適宜培養(yǎng)基。

2.3扁桃斑鳩菊的生根誘導

扁桃斑鳩菊生根培養(yǎng)2周時，觀察統(tǒng)計各組培養(yǎng)基的試驗效果。統(tǒng)計生根數量時，長度達到0.5 cm的肉質根方可計入生根數。從表3可以看出，以1/2MS為基本培養(yǎng)基附加濃度0.05～0.15 mg/L的NAA或IBA均可取得較高的生根率，且平均生根數量都在5條以上，說明扁桃斑鳩菊的生根誘導較為容易。但采用NAA誘導時，雖然已經降低了基本培養(yǎng)基中無機鹽的用量，但仍會出現不同程度的愈傷組織和玻璃化現象，不利于試管苗的移栽。采用IBA誘導生根時，以1/2MS+IBA 0.1 mg/L誘導生根的效果最好，根系最為發(fā)達，小苗的長勢最好，最適合后期移栽。

[HTK]2.4不同栽培基質對扁桃斑鳩菊移栽苗生長的影響[HT]

3結論與討論

目前，斑鳩菊屬植物的研究重點主要集中在抗腫瘤活性、對免疫系統(tǒng)影響、皮膚病治療和抗感染等藥理學方面，尤以新疆阿克蘇地區(qū)的中藥材——驅蟲斑鳩菊的研究為多。關于該屬植物生物學特性、親緣關系、繁殖方法等方面研究較少，如何加強相關基礎研究，構建現代生物技術研究平臺，對加速推進該屬植物的產業(yè)開發(fā)尤為重要。

扁桃斑鳩菊生長迅速，繼代苗的培養(yǎng)周期僅為3周，但容易出現玻璃化現象，繼代初期，參照胡石開等驅蟲斑鳩菊的組培技術[8]，試驗培養(yǎng)基MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.5 mg/L，試管苗玻璃化嚴重，且大多不可逆轉。后經反復試驗，設定培養(yǎng)基MS+6-BA 0.2 mg/L+IBA 0.05 mg/L，光照強度為1 500～2 500 lx時扁桃斑鳩菊增殖系數達到4.0，且小苗生長健壯。

組培生根環(huán)節(jié)中發(fā)現，當添加生根誘導激素NAA濃度超過0.05 mg/L時組培苗即易出現玻璃化現象，而添加IBA濃度達到0.15 mg/L時尚未出現玻璃化，在金葉苔草的組培育苗過程中也曾發(fā)現類似的現象[9]。說明雖然NAA、IBA都是誘導組培苗生根的最常用植物生長調節(jié)劑，但對特定植物誘導生根的效果有時差別明顯，這可能與其作用機制有關。王喆之等在研究槐樹試管苗生根時，就不同生長素種類對誘導的不定根來源、形態(tài)方面進行了專門研究，研究結果表明，IBA、NAA對不定根發(fā)生、生長都有促進作用，但IBA誘導的不定根細而長，生長快，且不定根直接來源于莖，而NAA誘導的根短而粗，且不定根表面常重新愈傷化，不利于試管苗成活[10]。

扁桃斑鳩菊的移栽苗在黃心土、輕基質中成活率均可達到90%以上，其插穗在2種基質中扦插成活率分別達到 84.7%、86.7%，說明扁桃斑鳩菊適應性強，對土壤要求不嚴

格。選擇輕基質還是黃心土進行育苗，需要結合生產規(guī)模、運輸距離等因素進行成本核算和風險分析。小規(guī)模經營時，扦插繁殖具有取材方便、設施要求不高的優(yōu)勢，但由于插穗的粗細、老嫩程度、內源激素含量等因素影響，扦插苗的萌芽、生根和生長情況一致性較差，不適合標準化生產。

扁桃斑鳩菊、適應性強，造林后生長迅速，1年生造林苗高度可達2.9 m。其葉片是食用和藥用的主要部位，試驗不同栽培管理技術對葉片生物量的影響具有現實意義。造林苗生長初期截頂處理后，較留頂苗而言，株高矮化，分枝數增加，葉色濃綠，節(jié)間縮短，抗風能力增強，平均單株葉片生物量較大，便于進行林地管理和葉片采收。本研究尚未針對最佳截頂時機進行對比篩選，以及在植株達到 2 m 以上高度時是否應進行二次截頂或去枝促萌處理以達到葉片高產，這些都需要進一步深入研究。扁桃斑鳩菊的銷售體系尚未成熟，推廣種植尚存在較大風險，亟需加強其藥效研究和市場宣傳，進一步發(fā)掘其應有的價值。

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