黃昌艷+盧家仕+李春牛+王曉國++閆海霞++卜朝陽+??
摘要:以單瓣茉莉組培苗為試驗材料,研究不同基本培養(yǎng)基、不同激素濃度對茉莉繼代生根的影響;此外,以優(yōu)良的組培苗為材料,研究不同基質(zhì)對茉莉組培苗移栽成活率、生長狀況的影響。結(jié)果表明,適宜茉莉繼代增殖的培養(yǎng)基為MS+5.0 mg/L 6-BA+0.01 mg/L NAA,適宜茉莉生根的培養(yǎng)基為1/2 MS+0.8 mg/L IBA,移栽基質(zhì)以純泥炭較佳,移栽成活率可達(dá)100.0%,且生長狀況最佳。
關(guān)鍵詞:單瓣茉莉;繼代培養(yǎng);生根;移栽;基質(zhì)篩選
中圖分類號: S685.160.4+3文獻(xiàn)標(biāo)志碼: A
文章編號:1002-1302(2017)03-0116-03
收稿日期:2015-12-11
基金項目:國家星火計劃(編號:2014GA790015);生態(tài)廣西建設(shè)引導(dǎo)基金[編號:桂財建函(2014)139];廣西農(nóng)業(yè)科技重點項目(編號:201411);廣西戰(zhàn)略性新興產(chǎn)業(yè)專項[編號:桂發(fā)改高科(2015)553號]。
作者簡介:黃昌艷(1985—),女,廣西梧州人,碩士,助理研究員,從事花卉組織培養(yǎng)工作。E-mail:hcy23007@163.com。
通信作者:卜朝陽,碩士,研究員,從事花卉育種研究。E-mail:yangnv@126.com。
茉莉[Jasminum sambac (L.) Aiton]為木犀科茉莉?qū)俪>G灌木,樹冠呈直立狀或半開展?fàn)頪1],原產(chǎn)于熱帶、亞熱帶地區(qū)。常見的茉莉品種有蔓生茉莉、木本茉莉、寶珠茉莉、洋茉莉等60多種,依其花形構(gòu)造可分為單瓣茉莉、雙瓣茉莉、多瓣茉莉3種。中國是世界上茉莉產(chǎn)量最多的國家,年產(chǎn)量占世界總產(chǎn)量的60%以上,現(xiàn)以廣西、福建、廣東、云南等地種植最為廣泛,其中廣西是我國茉莉花最大的產(chǎn)地,占全國產(chǎn)量的80%[2]。單瓣茉莉是茉莉的一種,植株矮小,高70~90 cm,莖枝較細(xì),呈藤蔓型,故有“藤本茉莉”之稱,其香氣濃郁,是其他茉莉品種所不及的[3]。3個茉莉品種的香氣濃郁度依次為單瓣茉莉>雙瓣茉莉>多瓣茉莉[4]。然而,茉莉花栽培品種單一,長期以來僅栽培廣西橫縣當(dāng)?shù)仉p瓣茉莉,且病蟲害逐漸增多,如白絹病已開始蔓延;茉莉自然結(jié)實率低,如雙瓣茉莉僅為0.19%[5];有性繁殖后代分離嚴(yán)重,生產(chǎn)上多采用扦插繁殖,但長期的無性繁殖導(dǎo)致茉莉種性退化、抗逆性下降、花朵產(chǎn)量逐年降低[6]。因此,應(yīng)盡快應(yīng)用組培快繁技術(shù)進(jìn)行茉莉良種的商品化繁育,通過母樹外植體的復(fù)壯和篩選再作離體培養(yǎng),可進(jìn)一步提高種苗質(zhì)量;此外,也可以通過芽變篩選獲得新品系。組培所需外植體材料很少,且增殖系數(shù)高,而扦插則需要大量枝條。因此,良種的繁育應(yīng)以組培途徑為主,應(yīng)加大茉莉組培良種繁育的研究及推廣力度[7]。目前,大部分有關(guān)茉莉組織培養(yǎng)的研究主要集中在雙瓣茉莉上,而有關(guān)單瓣茉莉組織培養(yǎng)的研究很少[3,8-10]。本試驗以單瓣茉莉組培苗為試驗材料,進(jìn)一步優(yōu)化繼代生根培養(yǎng)基,篩選適宜的移栽基質(zhì),完善單瓣茉莉的組培再生體系,旨在為單瓣茉莉種苗大規(guī)模商業(yè)化生產(chǎn)提供理論指導(dǎo)。
1材料與方法
茉莉組培苗為廣西農(nóng)業(yè)科學(xué)院花卉研究所組培室繼代繁殖的單瓣茉莉組培苗。
1.1茉莉繼代培養(yǎng)基的優(yōu)化試驗
供試材料為5 cm左右、生長正常、葉片張開、葉色濃綠的茉莉無菌組培幼苗,在超凈臺上將其取出后,切去葉片,切成帶1個腋芽的莖段,選取中部的莖段分別接種到繼代培養(yǎng)基中,每瓶接種20個莖段。繼代培養(yǎng)基設(shè)12個處理(表1),每個處理培養(yǎng)基中均加入蔗糖30 g/L,瓊脂4 g/L,pH值調(diào)至6.0±0.2,于123 ℃高溫滅菌20 min,每個處理培養(yǎng)基接種5瓶。接種后置于溫度(25±2) ℃、光照度1 500~2 000 lx、光照培養(yǎng)時間 12 h/d 條件下培養(yǎng)。培養(yǎng)30 d后統(tǒng)計腋芽萌發(fā)率、株高、節(jié)間數(shù),分析不同培養(yǎng)基對茉莉組培苗腋芽萌發(fā)情況的影響。
1.2茉莉生根培養(yǎng)基的優(yōu)化試驗
供試材料為5 cm左右、生長正常、葉片張開、葉色濃綠的茉莉無菌組培幼苗,在超凈臺上將其取出后,切取帶頂芽的 3 cm 左右的幼苗分別接種到生根培養(yǎng)基中,每瓶接種10株。生根培養(yǎng)基設(shè)6個處理,每個處理培養(yǎng)基中均加入蔗糖 30 g/L、瓊脂4 g/L,pH值調(diào)至6.0±0.2,于123 ℃高溫滅菌20 min,每個處理培養(yǎng)基均接種5瓶。接種后置于(25±2) ℃、1 500~2 000 lx、光照培養(yǎng)時間12 h/d條件下。培養(yǎng) 30 d 后統(tǒng)計生根率、株高、主根數(shù)、主根長,分析不同培養(yǎng)基對茉莉組培苗生根情況的影響。
1.3茉莉組培苗移栽基質(zhì)的篩選試驗
13.1煉苗及預(yù)處理
選擇在生根培養(yǎng)基中培養(yǎng)時間為 40 d、高約7 cm、葉片7~9張、長勢一致的已生根茉莉組培苗。在移栽環(huán)境強光下,不開瓶蓋煉苗10~15 d,然后打開瓶蓋再煉苗3~4 d。移栽時選取生長狀況良好、株高3~5 cm、根長2~3 cm、每株具4~5條根系的組培苗作為移栽材料,用鑷子將小苗輕輕取出后用自來水沖洗干凈。
1.3.2移栽基質(zhì)的消毒及配制
選用珍珠巖、河沙、黃泥土、泥炭這4種純基質(zhì),以及黃泥、泥炭按體積比1 ∶[KG-*3]1混合配制,共5種移栽基質(zhì)處理,每種基質(zhì)裝2個育苗框。
1.3.3組培苗的移栽
將預(yù)處理的組培苗移栽到5種不同的試驗基質(zhì)中,每個育苗框移栽30株組培苗,每個處理60株,隨機移苗。本試驗采用南京農(nóng)業(yè)大學(xué)農(nóng)學(xué)系王紹華設(shè)計的方差分析軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析和差異顯著性檢驗。
2結(jié)果與分析
2.1不同繼代培養(yǎng)基對茉莉組培苗增殖的影響
在同樣的基本培養(yǎng)基中,當(dāng)NAA的濃度一致時,隨著 6-BA濃度的升高,萌發(fā)率、株高、節(jié)數(shù)都逐漸提高,均以 5 mg/L 最適宜;當(dāng)6-BA濃度一致時,NAA以低濃度水平的處理較好,即0.01 mg/L;對比基本培養(yǎng)基,WPM處理的苗偏高,但萌發(fā)率不及MS處理,且MS處理的生長較穩(wěn)定,植株長勢比WPM處理的好,腋芽葉色較深、健壯(表1、圖1)。因此,選用MS+5 mg/L 6-BA+0.01 mg/L NAA作為茉莉的繼代增殖培養(yǎng)基比較適宜。
2.2不同生根培養(yǎng)基對茉莉組培苗生根的影響
在6個處理中,NAA處理的生根率明顯低于IBA處理,且NAA處理的根過于肥大,容易從基部碰斷,屬畸形根,雖然株高、主根數(shù)、主根平均長度都高于IBA處理,但生根率以及根的質(zhì)量仍為生根培養(yǎng)基考慮的最重要因素,因此,茉莉生根培養(yǎng)基中,IBA處理優(yōu)于NAA處理。在IBA處理中,隨著IBA濃度的提高,生根率、株高都先上升后下降,當(dāng)IBA濃度為0.8 mg/L時,生根率達(dá)到94.0%,平均株高達(dá)8.11 cm,且與其他處理差異明顯,根系發(fā)達(dá)、植株健壯(圖2、表2)。綜合考慮,選用1/2 MS+0.8 mg/L IBA培養(yǎng)基最適宜茉莉的生根培養(yǎng)。
2.3不同基質(zhì)對茉莉組培苗移栽的影響
基質(zhì)類型對組培苗移栽有明顯影響,其中在泥炭基質(zhì)中茉莉組培苗移栽成活率達(dá)100.0%,且長勢旺盛,根系發(fā)達(dá)、粗壯;珍珠巖、河沙這2種基質(zhì)由于養(yǎng)分較少,植株生長差,不長新葉;黃泥土黏性太高,組培苗生長慢,根系細(xì)弱,不利于組培苗的生長;黃泥與泥炭組合雖然在一定程度上緩解黃泥土黏性太高的缺點,但長勢仍不及純泥炭的處理(表3、圖3)。因此,為保證成活率、提高組培苗移栽質(zhì)量,選用純泥炭作為移栽基質(zhì)最適宜。
2.4移栽管理
剛出瓶的組培苗對水分最敏感,對基質(zhì)水分的管理原則是“寧少勿多”。移栽后將組培苗置于自動噴淋系統(tǒng)下栽培,通過噴霧保持葉面濕潤狀態(tài),08:00—18:00期間每隔1 h噴水1次,每次噴淋30~60 s,根據(jù)不同季節(jié)進(jìn)行調(diào)整,夏季噴淋時間長而冬季短。2周后,植株開始發(fā)新根,空氣濕度可保持在70%~80%,可適當(dāng)澆水。移栽期間的施肥以葉面肥為主,移栽后20 d后,每周施1次肥料,可以選擇硝酸鉀、磷酸二氫鉀、腐殖酸類等,以及復(fù)合肥和稀釋的MS培養(yǎng)基等。3個月后,即可移栽至大田種植(圖4)。
[FK(W9][TPHCY4.tif][FK)]
3討論
[JP2]近年來,國內(nèi)外學(xué)者對茉莉花的化學(xué)成分、藥理作用、常規(guī)栽培、病蟲害防治等方面進(jìn)行了廣泛的研究,但針對木犀科茉莉?qū)俚能岳蚱贩N進(jìn)行組培研究的相關(guān)報道較少,而以單瓣茉莉品種進(jìn)行組培研究更未見公開報道。本試驗研究單瓣茉莉組培技術(shù),旨在建立一套完整的茉莉花離體培養(yǎng)體系,為單瓣茉莉種苗大規(guī)模商業(yè)化生產(chǎn)提供理論指導(dǎo),促進(jìn)茉莉產(chǎn)業(yè)發(fā)展。[JP]
本試驗以MS、WPM為基本培養(yǎng)基,比較了不同6-BA和NAA配比對茉莉增殖的影響,篩選出適宜茉莉繼代增殖的培養(yǎng)基為MS+5.0 mg/L 6-BA+0.01 mg/L NAA,其腋芽葉色濃綠、健壯,對增殖效果最好。適宜茉莉生根的培養(yǎng)基為1/2 MS+0.8 mg/L IBA,生根培養(yǎng)基不適宜添加NAA,這與前人的研究結(jié)果均不一樣[6,8,10],可能由于他們研究的是雙瓣茉莉,本試驗的對象是單瓣茉莉,因此在生根培養(yǎng)基的激素使用上存在差異。栽培基質(zhì)是作物生長的介質(zhì),它直接影響作物生長發(fā)育,本研究發(fā)現(xiàn)移栽基質(zhì)以純泥炭較佳,移栽成活率可達(dá)100.0%,且生長狀況最佳。泥炭土含有大量的有機質(zhì),并且疏松,透氣透水性能好,保水保肥能力強,質(zhì)地輕,無病害孢子和蟲卵,適合作為茉莉組培苗移栽基質(zhì)。
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