陳芙蓉 朱丹 陳慧 袁菲 王臨英 黃鄭銘

●檢測診斷

非小細胞肺癌患者血清鱗狀細胞癌抗原水平與循環(huán)腫瘤細胞的關系研究

陳芙蓉 朱丹 陳慧 袁菲 王臨英 黃鄭銘

目的 探討非小細胞肺癌（NSCLC）患者血清鱗狀細胞癌抗原（SCC-Ag）水平與循環(huán)腫瘤細胞（CTC）的關系。方法選取NSCLC患者41例（NSCLC組）、健康體檢者40例（對照組）及良性疾病者30例（良性組），采用Cell Search系統(tǒng)檢測入選者體內CTC數(shù)，酶聯(lián)免疫吸附試驗檢測血清SCC-Ag水平并進行對照分析。結果 NSCLC組CTC數(shù)高于良性組及對照組（均P＜0.05）；NSCLC組CTC數(shù)與血清SCC-Ag水平呈正相關（r=0.782，P＜0.05）。 結論 對于臨床可疑的NSCLC患者檢測血清SCC-Ag水平與CTC數(shù)，能夠提高NSCLC的臨床檢出率，有助于患者進行及時有效的治療。

非小細胞肺癌 循環(huán)腫瘤細胞 鱗狀細胞癌抗原

肺癌是一類發(fā)生于支氣管黏膜上皮的惡性腫瘤，在我國乃至全世界范圍都算是一類發(fā)病率和致死率極高的疾病，臨床上非小細胞肺癌（NSCLC）的發(fā)病率占肺癌總發(fā)病率的60%左右，特別是隨著近年來隨著城市空氣污染的日趨嚴重，導致肺癌患者數(shù)量大幅升高[1-2]。由于早期肺癌的臨床表現(xiàn)并不明顯，所以NSCLC患者的檢出率也較低，通?；颊弑淮_診為肺癌的時候已經(jīng)處于晚期，錯過了最佳治療時間。為了能夠早期診斷NSCLC患者，對患者進行及時有效的治療，筆者將NSCLC患者體內循環(huán)腫瘤細胞（CTC）數(shù)以及血清鱗狀細胞癌抗原（SCC-Ag）水平分別與健康體檢者和肺部良性疾病患者進行對照分析，探討NSCLC患者SCCAg水平與CTCs的相關性，以期為早期診斷NSCLC提供參考。

1 對象和方法

1.1 對象 選取本院2013年4月至2015年2月收治的NSCLC患者41例（NSCLC組），其中男24例，女17例；年齡52～82（65.3±9.2）歲；均為鱗癌。納入標準：經(jīng)氣管鏡或穿刺活檢取得病理組織，診斷為原發(fā)性NSCLC患者且尚未進行任何治療；均無器官移植史且未并發(fā)其他系統(tǒng)腫瘤。同時選取在本院進行體檢的健康者40例（對照組）以及肺部良性疾病患者30例（良性組，均表現(xiàn)為體積較小的氣管或支氣管瘤，少數(shù)有咳嗽和肺部感染等表現(xiàn)，多數(shù)無任何癥狀）。對照組男22例，女18例；年齡50～75（68.2±8.7）歲；良性組男16例，女14例；年齡55～78（66.3±6.8）歲。3組患者的年齡、性別比較差異均無統(tǒng)計學意義（均P＞0.05）。本研究經(jīng)醫(yī)院醫(yī)學倫理委員會批準，經(jīng)患者知情同意。

1.2 方法 采用Cell Tracks Auto Prep系統(tǒng)和Cell Tracks AnalyzerⅡ系統(tǒng)（美國強生公司產(chǎn)）測定CTC及SCCAg水平，配合移液器、漩渦震蕩儀、上樣緩沖液、清洗液、去離子水以及Cell Search CTC試劑盒和質控試劑盒。Cell Save專用收集管采集研究對象外周血，將每支Cell Save管中的7.5ml血液注入帶有適當標記的Cell Tracks Auto Prep錐形瓶中。向裝有樣本的每支錐形瓶加入6.5ml稀釋緩沖液。800g離心15min，在 Cell Tracks Auto Prep系統(tǒng)上對試管進行處理。采集血液后于室溫保存并于96h進行檢測，按照儀器操作說明進行檢測和結果判定。

1.3 統(tǒng)計學處理 采用SPSS19.0統(tǒng)計軟件，計量資料以表示，多組間比較采用單因素方差分析，兩兩比較采用SNK-q法；計數(shù)資料以百分率表示，組間比較之采用χ2檢驗；相關性分析采用Pearson相關。

2 結果

2.1 3組CTC、SCC-Ag水平比較 見表1。

由表1可見，NSCLC組CTC數(shù)及SCC-Ag水平均高于對照組及良性組，差異均有統(tǒng)計學意義（均P＜0.05）。

表1 3組CTC、SCC-Ag水平比較

2.2 NSCLC患者CTC數(shù)與SCC-Ag水平的相關性分析 相關分析示NSCLC患者外周血液中CTC數(shù)與血清SCC-Ag水平呈正相關（r=0.782，P＜0.05）。

3 討論

隨著NSCLC患者數(shù)量逐年擴增，如何在患者早期提前檢測出腫瘤的存在問題得到了越來越多專家學者的關注。但是因為早期NSCLC的癥狀并不明顯，臨床上使用胸部X線及CT檢查等影像學診斷難以檢測出NSCLC的存在，致使大多數(shù)患者一旦被檢查出罹患肺癌已經(jīng)是處于癌癥中、晚期階段[3]。

臨床上除了使用胸部X線、CT等影像學檢查手段對NSCLC進行檢查之外，患者體內的血清標志物和分子標志物等因素也是肺癌診斷及預后判斷的參考依據(jù)[4]。患者體內SCC-Ag水平可在一定程度上體現(xiàn)NSCLC患者的臨床病情，幫助醫(yī)生進行診斷和判斷預后[5]。但是僅利用單一的腫瘤標志物對患者體內腫瘤進行檢測判斷存在一定的局限性，并不能夠準確地檢測出患者體內的腫瘤情況[6]。因此，本研究探索CTC數(shù)和血清SCC-Ag水平對早期診斷NSCLC的價值。腫瘤標志物是反映腫瘤存在的一類化學物質，在細胞發(fā)生癌變和增殖的過程中產(chǎn)生[7]。其分類主要有癌胚蛋白、腫瘤相關抗原、酶、特殊血漿蛋白、激素和原癌基因、抑癌基因及其產(chǎn)物等[8]。而CTC則是存在于患者外周血液中的各類腫瘤細胞的總稱，該類腫瘤細胞是從實體腫瘤病灶上脫落進入外周血液，大部分CTC會凋亡或者被吞噬細胞吞噬，小部分CTC則會逐漸發(fā)展成轉移灶[9-10]。血清SCC-Ag首次發(fā)現(xiàn)于1977年，從宮頸鱗癌組織中分離出來，是一組腫瘤相關蛋白，與鱗狀癌細胞的侵襲、轉移以及復發(fā)和預后有著密切的關系[11]。

本次研究結果顯示，NSCLC患者外周血液中的CTC數(shù)顯著高于健康人及肺部良性疾病者，NSCLC患者血清SCC-Ag水平高于健康人及良性疾病者；NSCLC患者外周血液中的CTC數(shù)與血清SCC-Ag水平呈正相關。健康人體內不存在CTC，只存在微量的血清SCCAg，而NSCLC患者體內才存在CTC和大量血清SCCAg，并且在NSCLC患者與肺部良性疾病者的比較中可以發(fā)現(xiàn)，隨著患者病情的惡化，患者體內的CTC數(shù)以及血清SCC-Ag水平均會顯著增高[12-13]。對于臨床可疑的NSCLC患者檢測血清SCC-Ag水平與CTC數(shù)，能夠提高NSCLC的臨床檢出率和降低誤診率，從而對患者進行及時有效的治療。

[1]浙江省抗癌協(xié)會抗癌藥物專業(yè)委員會專家組.浙江省非小細胞肺癌血液EGFR基因突變檢測專家共識[J].浙江醫(yī)學,2016,38(4):233-236, 290.

[2]Hong D,Zhang G,Zhang X,et al.Pulmonary Toxicities of Gefitinib in Patients With Advanced Non-Small-CellLung Cancer:AMeta-Analysis of Randomized Controlled Trials[J].Medicine(Baltimore), 2016,95(9):e3008.

[3]張為迪,李輝,宋平平,等.非小細胞肺癌肺靜脈血中循環(huán)腫瘤細胞的檢測分析[J].山東醫(yī)藥,2012,52(24):51-53.

[4]Takeda M,Sakai K,Okamoto K,et al.Genome sequencing for non-small cell lung cancer identifies a basis for nintedanib sensitivity[J].Ann Oncol,2016,27(4):748-750.

[5]陳鵬,李雷.非小細胞肺癌循環(huán)腫瘤細胞檢測進展[J].中國腫瘤臨床, 2013,40(14):862-865.

[6]Decatris M P,Farrugia D,O'Byrne K J.Clinician Perspective on Molecular Profiling of Non-Small-CellLung Cancer[J].J Clin Oncol,2016,34(8):884-886.

[7]陳燕,鄧安梅.非小細胞肺癌患者循環(huán)腫瘤細胞與SCC-Ag的相關性分析[J].國際檢驗醫(yī)學雜志,2014,35(7):900-901.

[8]Masters G A,Temin S,Azzoli C G,et al.Systemic Therapy for Stage IV Non-Small-Cell Lung Cancer:American Society of Clinical Oncology Clinical Practice Guideline Update[J].J Clin Oncol,2015,33(30):3488-3515.

[9]王加,潘世揚,張炳峰,等.特異性循環(huán)肺癌細胞流式檢測參考區(qū)間的建立及在非小細胞肺癌化療中的應用[J].中華檢驗醫(yī)學雜志, 2015,38(1):45-48.

[10]趙文華,劉艷萍,于起濤,等.血清CEA水平與晚期非小細胞肺癌患者腦轉移的相關因素分析[J].廣西醫(yī)科大學學報,2015,32(3):401-404.

[11]Camposilvan I,Akhtar-Danesh N,Schneider L,et al.The effect of surgeon volume on procedure selection in non-small cell lung cancer surgeries[J].J Thorac Cardiovasc Surg,2015,150 (3):507-512.

[12]洪衛(wèi),林寶釵,張貝貝,等.BCL-2基因多態(tài)性與復治晚期非小細胞肺癌TKI治療療效的關聯(lián)研究[J].浙江醫(yī)學,2014(5):382-385.

[13]楊慧,吳玉芬,黃勇.非小細胞肺癌腦轉移的危險因素分析[J].山東醫(yī)藥,2015,55(7):41-43.

2016-06-28）

（本文編輯：馬雯娜）

10.12056/j.issn.1006-2785.2017.39.7.2016-985

321000 金華市中心醫(yī)院呼吸內科

陳芙蓉，E-mail：chenxi4560@163.com