王 杰 崔 凱 王世琴 刁其玉 張乃鋒(中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院飼料研究所，農(nóng)業(yè)部飼料生物技術(shù)重點開放實驗室，北京100081)

蛋氨酸水平對羔羊體況發(fā)育、消化道組織形態(tài)及血清抗氧化指標的影響

王 杰 崔 凱 王世琴 刁其玉 張乃鋒*
(中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院飼料研究所，農(nóng)業(yè)部飼料生物技術(shù)重點開放實驗室，北京100081)

本試驗旨在研究蛋氨酸水平對羔羊體況發(fā)育、消化道組織形態(tài)及血清抗氧化指標的影響。試驗選取12對7日齡斷母乳的湖羊雙胞胎公羔，采用配對試驗設(shè)計，分為對照(CON)組和低蛋氨酸(LM)組，1對雙胞胎羔羊分到不同的組中。試驗分2個階段進行，第1階段(8～56日齡)，CON組羔羊飼喂基礎(chǔ)代乳粉和基礎(chǔ)開食料；LM組羔羊飼喂的代乳粉和開食料在CON組基礎(chǔ)上分別全部扣除(0.70%和0.40%)額外添加的蛋氨酸，其余營養(yǎng)水平保持一致。第2階段(57～84日齡)，2組羔羊停止飼喂代乳粉且飼糧均為基礎(chǔ)開食料。在56和84日齡，各選取6對雙胞胎羔羊進行屠宰，分離消化道組織，采集血清樣品。結(jié)果表明：1)在采食量方面，LM組羔羊?qū)Φ鞍彼岵墒沉吭?～56日齡、8～84日齡階段均極顯著低于CON組(P<0.01)，而干物質(zhì)采食量卻均顯著高于CON組(P<0.05)；在體尺指標方面，56日齡，LM組除體重、體斜長、胸圍和體長指數(shù)顯著低于CON組(P<0.05)外，其他體況發(fā)育指標2組間均無顯著性差異(P>0.05)；84日齡，2組間體況發(fā)育指標均無顯著性差異(P>0.05)。2)56日齡，LM組羔羊的瘤胃乳頭寬度顯著低于CON組(P<0.05)，2組羔羊的其他消化道形態(tài)發(fā)育指標差異不顯著(P>0.05)。3)56日齡，LM組羔羊血清中超氧化物歧化酶活性極顯著低于CON組(P<0.01)；84日齡，LM組羔羊血清中除谷胱甘肽過氧化物酶活性顯著低于CON組(P<0.05)外，2組羔羊的其他血清抗氧化指標差異均不顯著(P>0.05)。結(jié)果提示，飼糧低蛋氨酸水平抑制了羔羊體況(體重、體斜長、胸圍、體長指數(shù))發(fā)育及瘤胃乳頭寬度的增加，同時降低了機體血清中超氧化物歧化酶活性，然而卻提高了干物質(zhì)采食量；提高飼糧蛋氨酸水平后，羔羊體況發(fā)育及消化道組織形態(tài)發(fā)育也隨之得到補償，但機體抗氧化防御系統(tǒng)仍未得到完全改善。

蛋氨酸；羔羊；體況發(fā)育；消化道形態(tài)；抗氧化指標

羔羊出生前后的生長發(fā)育是確定其后期健康生長及育肥潛力的重要時期。新生羔羊由于其消化代謝系統(tǒng)的發(fā)育不成熟而具有極大的可塑性，也極易受到環(huán)境因素變化(營養(yǎng)調(diào)控)的影響而改變其后期育肥性能的發(fā)揮。研究發(fā)現(xiàn)，對于早期斷奶的羔羊，易受到營養(yǎng)物質(zhì)供給因素影響產(chǎn)生較大的應(yīng)激反應(yīng)[1-2]，從而導(dǎo)致消化道功能紊亂[3-5]，并能引起小腸形態(tài)結(jié)構(gòu)的損傷性變化，絨毛長度降低，隱窩深度降低，腸道消化吸收面積減少[6-10]。另外，蛋氨酸作為必需氨基酸中唯一的含硫氨基酸，對動物體內(nèi)蛋白質(zhì)合成具有重要作用。Abdelrahman等[11]研究報道，飼糧中補充蛋氨酸不僅提高了羔羊?qū)ΦV物質(zhì)的生物利用率，還能提高羔羊的生長性能。因此，滿足出生后羔羊機體蛋氨酸的營養(yǎng)需要，對于維持其生長發(fā)育和健康具有重要意義。

胃腸道是反芻動物主要的消化吸收場所，其黏膜結(jié)構(gòu)的正常發(fā)育是營養(yǎng)物質(zhì)被充分消化吸收的生理基礎(chǔ)。研究表明，腸道組織重量僅占到體重的5%～7%，但卻消耗機體所需營養(yǎng)物質(zhì)的15%～20%[12]。在單胃動物上，Manzoor等[13]報道肉雞飼喂低蛋氨酸水平飼糧可降低肉雞的體重，同時抑制了胃腸道形態(tài)結(jié)構(gòu)的發(fā)育。另外，Krutthai等[14]研究發(fā)現(xiàn)，斷奶仔豬飼喂含低蛋氨酸水平的飼糧抑制了仔豬生長發(fā)育，同時顯著降低了血清中尿素氮、白蛋白含量及胃腸道形態(tài)發(fā)育。在實際生產(chǎn)中，常因羔羊健康狀況、飼糧原料及飼養(yǎng)管理等因素造成斷奶前羔羊缺乏生長發(fā)育所必需的蛋氨酸，從而使哺乳期羔羊體況發(fā)育存在較大的個體差異，最終不利于集約化和規(guī)模化管理。目前，研究者多從飼糧中單一補充蛋氨酸方向研究對羔羊或育肥羊生長發(fā)育的影響[15]，而研究飼糧中蛋氨酸缺乏與補充對羔羊斷奶前后生長發(fā)育的影響尚未報到。因此，本試驗通過人為調(diào)控羔羊斷奶前后飼糧中蛋氨酸水平，研究羔羊前期缺乏蛋氨酸導(dǎo)致的生長發(fā)育受阻是否可以通過后期補充蛋氨酸使羔羊的生長狀況得到補償，為實際生產(chǎn)中健康養(yǎng)羊提供理論支持。

1 材料與方法

1.1 試驗動物與試驗時間

試驗選取7日齡斷母乳、體重為(4.93±0.20) kg、發(fā)育正常的12對湖羊雙胞胎公羔羊。試驗于2015年10月至2015年12月在山東省臨清市潤林牧業(yè)有限公司開展。

1.2 試驗飼糧

試驗用蛋氨酸規(guī)格：DL-蛋氨酸含量≥99%；干燥減重≤0.5%；砷≤0.002‰；重金屬≤0.02‰；硫酸鹽≤0.30%；氯化物≤0.20%；灼燒殘渣≤0.5%；亞硝基鐵氰化鈉試驗合格；硫酸銅試驗合格。

基礎(chǔ)開食料和基礎(chǔ)代乳粉的營養(yǎng)水平分別參考我國《肉羊飼養(yǎng)標準》(NY/T 816—2004)[16]及發(fā)明專利ZL 02128844.5[17]所設(shè)定；蛋氨酸水平參考Patureau-Mirand等[18]和王波等[19]的試驗結(jié)果設(shè)定的?；A(chǔ)代乳粉營養(yǎng)水平、基礎(chǔ)開食料組成及營養(yǎng)水平見表1。

表1 基礎(chǔ)代乳粉營養(yǎng)水平、基礎(chǔ)開食料組成及營養(yǎng)水平(干物質(zhì)基礎(chǔ))

1)基礎(chǔ)代乳粉為專利產(chǎn)品，專利編號ZL 02128844.5[17]。Basal milk replacer was patent product, and the patent No. was ZL 02128844.5[17].

2)復(fù)合氨基酸是由賴氨酸、色氨酸、蘇氨酸、纈氨酸、組氨酸等多種氨基酸組成。Compound amino acids were composed of lysine, tryptophane, threonine, valine, threonine and other amino acids.

3)每千克預(yù)混料含有One kg of premix contained the following：Fe 4～30 g，Mn 2～25 g，Cu 0.8～2.0 g，Zn 4～25 g，Se 0.04～0.30 g，I 0.04～0.50 g，Co 0.03～0.05 g，VA 800 000～2 500 000 IU，VD3200 000～400 000 IU，VE 3 000～4 000 IU。

4)營養(yǎng)水平除代謝能外均為實測值。ME was a calculated value, while others were measured values.

1.3 試驗設(shè)計與飼養(yǎng)管理

采用配對試驗設(shè)計，12對羔羊分為對照(control，CON)組和低蛋氨酸(low methionine，LM)組，1對雙胞胎羔羊分到不同的組中。試驗分2個階段進行。第1階段(8～56日齡)，CON組羔羊飼喂基礎(chǔ)代乳粉和基礎(chǔ)開食料；LM組羔羊飼喂的代乳粉和開食料在CON組基礎(chǔ)上分別全部扣除(0.70%和0.40%)額外添加的蛋氨酸，其余營養(yǎng)水平保持一致。第2階段(57～84日齡)，2組羔羊停止飼喂代乳粉且飼糧均為基礎(chǔ)開食料。所有試驗羔羊從8日齡開始人工飼喂代乳粉至56日齡結(jié)束；另外，從8日齡開始補飼開食料，直到84日齡試驗結(jié)束。

試驗開始之前，用強力消毒靈溶液對整個圈舍進行全面的消毒，之后每周對所有欄位重復(fù)消毒1次。同時，試驗開始時所有試驗羔羊均進行正常的免疫程序。另外，飼喂代乳粉時，8～14日齡每天飼喂4次，15～28日齡每天飼喂3次，29～56日齡每天飼喂2次。代乳粉的飼喂具體參照王波等[19]的方法進行。同時，飼喂量還根據(jù)試驗過程中羔羊的健康狀況進行適當?shù)恼{(diào)整，以保證羔羊的正常生長。另外，除了每天按要求進行飼喂外，還需保證CON組和LM組羔羊補飼相近量的代乳粉和開食料。整個過程自由飲水。

1.4 測定指標和分析方法

1.4.1 代乳粉和開食料營養(yǎng)水平

氨基酸含量使用A300全自動氨基酸分析儀測定；總能使用Parr-6400氧彈量熱儀測定，用于計算代謝能；干物質(zhì)、粗蛋白質(zhì)、粗脂肪、粗灰分、鈣、磷含量參考《飼料分析及飼料質(zhì)量檢測技術(shù)》[20]測定。

1.4.2 羔羊的體重與體尺指標

分別于羔羊8、56和84日齡晨飼前準確稱量體重并進行羔羊的體尺測定。測量用的儀器有測仗、卷尺、圓形測量器等。測量時，將被測羔羊牽引到平地并使之穩(wěn)定，成自然站立狀態(tài)。

羔羊體尺指標測定及方法如下。1)體高：肩胛骨最高點到地面的垂直距離。2)體斜長：肩端至坐骨結(jié)節(jié)末端的直線距離。3)胸圍：肩胛骨后緣繞胸1周的長度。4)胸寬：肩胛骨后緣胸部最寬處的寬度。5)胸深：鬐甲至胸骨下緣的垂直距離。6)管圍：管骨上1/3的周圍長度。7)體長指數(shù)(%)=(體斜長/體高)×100；胸圍指數(shù)(%)=(胸圍/體高)×100；體軀指數(shù)(%)=(胸圍/體斜長)×100。

1.4.3 羔羊胃腸道組織樣的采集

分別在56和84日齡屠宰6對雙胞胎羔羊，屠宰前16 h需要禁食、禁水[21]，經(jīng)頸靜脈放血致死后，解剖，將各胃室分割，去食糜，分別稱鮮重；在瘤胃背囊取樣(1 cm×1 cm)，置于10%的福爾馬林溶液中固定，留待做石蠟切片；小腸各段分割后，先將內(nèi)容物洗凈，再稱取各段腸道鮮重。取各3 cm左右的十二指腸、空腸、回腸中段，保存在10%的福爾馬林溶液中固定，留待做石蠟切片。

1.4.4 羔羊胃腸道組織形態(tài)測定

瘤胃上皮形態(tài)觀察測定指標包括乳頭高度、乳頭寬度和肌層厚度。小腸各段黏膜上皮形態(tài)觀察測定指標包括絨毛高度、隱窩深度、黏膜厚度和肌層厚度。

在Olympus BX51顯微鏡下觀察羔羊瘤胃上皮和小腸壁結(jié)構(gòu)的組織形態(tài)，使用Olympus DP70圖像采集系統(tǒng)取樣，應(yīng)用Image-Pro Plus 5.1 Chinese圖像分析系統(tǒng)測量瘤胃乳頭高度、乳頭寬度和肌層厚度以及小腸各段絨毛高度、隱窩深度、黏膜厚度和肌層厚度。每個樣本觀察3張非連續(xù)切片，每張切片選取3個視野，每個視野分別測量5組數(shù)據(jù)，具體測量標準參考李輝[22]試驗報道中的方法進行，其平均值作為1個測定數(shù)據(jù)。

1.4.5 血清抗氧化指標測定

分別于56和84日齡，每組隨機選取3只試驗羔羊于前腔靜脈采血10 mL，3 000 r/min離心20 min，分離血清，并于-20 ℃保存。血清抗氧化指標包括：過氧化氫酶(CAT)、谷胱甘肽轉(zhuǎn)硫酶(GST)、超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-Px)的活性。GSH-Px和GST活性的測定方法為化學(xué)比色法；SOD活性的測定方法為鄰苯三酚自氧化法；CAT活性的測定方法為可見光分光光度法。測定儀器為全自動生化分析儀。

1.5 數(shù)據(jù)處理

試驗數(shù)據(jù)經(jīng)過Excel 2010初步整理后，使用SAS 9.2統(tǒng)計軟件Pairedt-test進行配對t檢驗，以P<0.05作為判斷差異顯著性的標準，以0.05≤P<0.10作為判斷有變化趨勢的標準。

2 結(jié)果與分析

2.1 蛋氨酸水平對羔羊采食量和體況發(fā)育的影響

蛋氨酸水平對羔羊采食量和體況發(fā)育的影響見表2。在采食量方面，LM組羔羊?qū)Φ鞍彼岬牟墒沉吭?～56日齡、8～84日齡階段均極顯著低于CON組(P<0.01)，而干物質(zhì)采食量卻均顯著高于CON組(P<0.05)。在體尺指標方面，在8日齡，CON組和LM組羔羊體重和體尺指標均差異不顯著(P>0.05)，而56日齡LM組羔羊的體重、體斜長、胸圍和體長指數(shù)均顯著低于CON組(P<0.05)，但84日齡時2組羔羊在體重和體尺指標上均差異不顯著(P>0.05)。

表2 蛋氨酸水平對羔羊采食量和體況發(fā)育的影響

同行數(shù)據(jù)肩標不同小寫字母代表有顯著性差異(P<0.05)。下表同。

In the same row，values with different small letter superscripts mean significant difference (P<0.05)． The same as below.

2.2 蛋氨酸水平對羔羊消化道組織形態(tài)的影響

蛋氨酸水平對羔羊消化道組織形態(tài)的影響見表3。在56日齡，與CON組相比，LM組羔羊瘤胃乳頭寬度(P<0.05)和乳頭高度(0.05≤P<0.10)較低；2組羔羊在其他消化道形態(tài)發(fā)育指標上差異不顯著(P>0.05)。在84日齡，LM組羔羊的瘤胃乳頭高度較CON組有降低的趨勢(0.05≤P<0.10)，2組在消化道形態(tài)發(fā)育方面均差異不顯著(P>0.05)。

表3 蛋氨酸水平對羔羊消化道組織形態(tài)的影響

2.3 蛋氨酸水平對羔羊血清抗氧化指標的影響

蛋氨酸水平對羔羊血清抗氧化指標的影響見表4。在56日齡，LM組羔羊血清中SOD活性極顯著低于CON組(P<0.01)，2組羔羊在其他血清抗氧化指標上差異均不顯著(P>0.05)。在84日齡，LM組羔羊血清中除GSH-Px活性顯著低于CON組(P<0.05)外，2組羔羊在其他血清抗氧化指標上差異均不顯著(P>0.05)。

表4 蛋氨酸水平對羔羊血清抗氧化指標的影響

3 討 論

3.1 蛋氨酸水平對羔羊體況發(fā)育的影響

蛋氨酸作為唯一含硫必需氨基酸對于反芻動物生長發(fā)育具有重要意義[24]。另外，研究發(fā)現(xiàn)非反芻階段羔羊每天蛋氨酸的最佳需要量為2 g，而對于育肥羊最適宜的蛋氨酸水平為0.64%左右[18,25]。本試驗在8～56日齡階段，LM組和CON組羔羊每天蛋氨酸的采食量分別為0.47和1.75 g，LM組較CON組降低了73.14%。另外，王杰等[23]研究還發(fā)現(xiàn)在8～56日齡階段，LM組羔羊平均日增重和飼糧利用率顯著低于CON組；57～84日齡，2組平均日增重和料重比均無顯著差異。當動物機體受到營養(yǎng)限制而不能滿足動物正常生長的基本營養(yǎng)需求時，動物機體將依據(jù)營養(yǎng)限制的時間和限制程度來動員體內(nèi)貯存的能量以維持機體的生長發(fā)育，最終導(dǎo)致機體失重、體況下降[26]。Rooke等[27]研究報道，母羊妊娠前期(1～90 d)飼喂含75%能量的飼糧，在90日齡時限制組母羊的體重顯著降低。Gao等[28]研究發(fā)現(xiàn)，母羊妊娠后期(91～150 d)通過飼喂限制能量的飼糧，在妊娠150 d時母羊體重損失的重量顯著增高，并且出生羔羊的體重也顯著降低。Puchala等[29]研究報道，限制育肥山羊采食量顯著降低其平均日增重、內(nèi)臟組織重及山羊體重，后期通過補充飼喂可對受限制山羊在體重上有補償恢復(fù)效應(yīng)。本試驗中，低蛋氨酸水平顯著抑制了羔羊的體重增加；而經(jīng)過28 d蛋氨酸補償后，2組羔羊體重差異不顯著。結(jié)果提示，限制飼糧蛋氨酸水平后，通過后期提高飼糧蛋氨酸水平能一定程度上恢復(fù)羔羊生長，這也與劉小剛[30]研究結(jié)果相一致。

動物機體的體尺指標直接反映動物的體格大小和體軀的結(jié)構(gòu)、發(fā)育等狀況，也間接反映動物的組織器官發(fā)育情況，其與動物的繁殖機能、抗病力及對外界生活條件的適應(yīng)能力等密切相關(guān)[31]。同時，體尺測量所得數(shù)值只能說明一個部位的生長發(fā)育情況，而不能說明動物的體態(tài)結(jié)構(gòu)，因此還要進行體尺指數(shù)的計算，用來說明動物各部位發(fā)育的相互關(guān)系和比例[32]。馬存壽等[33]通過對青海半細毛羊羔羊斷奶體重與體尺性狀進行了通徑分析，結(jié)果發(fā)現(xiàn)：體尺中胸圍對體重的表型相關(guān)和直接作用最大；體斜長對體重的表型相關(guān)和直接作用次之，其余各項體尺對體重的影響都較小。本試驗56日齡時，低蛋氨酸水平顯著降低了羔羊的胸圍、體斜長和體長指數(shù)。而提高蛋氨酸水平后，2組羔羊在體尺指標上均差異不顯著，此結(jié)果與羔羊體重相吻合。同樣，陳碧紅等[34]研究報道各體尺性狀因素都在不同程度上影響戴云山羊的體重。陳月麗等[35]研究發(fā)現(xiàn)11～14月齡奶水牛的體重與體高、體斜長和胸圍等體尺指標呈極顯著正相關(guān)。

3.2 蛋氨酸水平對羔羊消化道組織形態(tài)的影響

蛋白質(zhì)的營養(yǎng)價值實質(zhì)上是氨基酸的營養(yǎng)價值。蛋氨酸作為含硫的必需氨基酸，飼糧中蛋氨酸水平將會影響胃腸道結(jié)構(gòu)和功能的改變，最終影響胃腸道重量[36-37]。有研究發(fā)現(xiàn)，飼糧蛋氨酸水平高低將會調(diào)節(jié)腸道緊密連接蛋白表達量，從而改變腸道黏膜屏障功能，最終對動物預(yù)防疾病發(fā)生具有重要作用[38]。Riedijk等[39]研究發(fā)現(xiàn)蛋氨酸作為合成半胱氨酸和胱氨酸重要的前體物質(zhì)，在仔豬胃腸道中蛋氨酸通過轉(zhuǎn)甲基和轉(zhuǎn)硫作用對胃腸道健康發(fā)育有著重要作用。Malik等[40]研究報道，飼糧中添加蛋氨酸和蛋氨酸羥基類似物有助于改善仔豬胃腸道形態(tài)結(jié)構(gòu)，最終有利于對營養(yǎng)物質(zhì)的消化利用。對羔羊來說，飼糧是影響復(fù)胃發(fā)育最主要因素，其組成、物理形態(tài)、營養(yǎng)水平等均可以影響羔羊復(fù)胃的發(fā)育，飼糧營養(yǎng)水平直接影響胃腸道的組織形態(tài)學(xué)發(fā)育，營養(yǎng)不合理會導(dǎo)致復(fù)胃的生長發(fā)育受限[41]。

通常瘤胃上皮乳頭高度、乳頭寬度及其肌層厚度等相關(guān)指標均可用來評定瘤胃的組織形態(tài)學(xué)發(fā)育[42]。Lesmeister等[43]認為試驗不同處理手段首先對瘤胃乳頭高度產(chǎn)生最大影響，其次是瘤胃乳頭的寬度和肌層厚度等相關(guān)指標。研究發(fā)現(xiàn)，飼糧原料來源及飼糧精粗比例[44-45]均能影響羔羊瘤胃發(fā)育。同樣，蔡健森[46]曾研究證實不同飼糧中蛋白質(zhì)來源(植物性蛋白質(zhì)和乳源性蛋白質(zhì))可顯著增加斷奶羔羊瘤胃乳頭數(shù)量。另外，飼糧營養(yǎng)水平也會影響到瘤胃的發(fā)育。孫志洪[47]報道羔羊28日齡斷奶后，限制營養(yǎng)水平的羔羊瘤胃乳頭寬度、高度和絨毛表面積顯著減少。本試驗結(jié)果顯示，低蛋氨酸除顯著抑制羔羊瘤胃乳頭寬度發(fā)育外，還使瘤胃乳頭高度有降低的趨勢；另外，經(jīng)過28 d蛋氨酸補償后，LM組羔羊的瘤胃乳頭高度較CON組仍有降低的趨勢，而2組在其他胃腸道形態(tài)發(fā)育方面均差異不顯著。結(jié)果差異的出現(xiàn)，可能由于蛋氨酸限制時間、添加劑量或環(huán)境等因素造成的。

小腸是機體營養(yǎng)物質(zhì)消化、吸收和轉(zhuǎn)運的主要部位，良好的小腸黏膜結(jié)構(gòu)對完善消化生理功能，促進機體生長發(fā)育尤為重要[48]。小腸絨毛高度、隱窩深度、黏膜厚度、肌層厚度和絨毛高度/隱窩深度等均是衡量小腸消化吸收功能的重要指標，代表了腸道的功能狀況[49-50]。顧憲紅[51]報道，仔豬能量、蛋白質(zhì)營養(yǎng)不良，導(dǎo)致黏膜厚度、絨毛高度和寬度、絨毛表面積顯著下降。本試驗中，前期低蛋氨酸及后期蛋氨酸補償均未對2組羔羊小腸形態(tài)發(fā)育產(chǎn)生顯著影響。這可能由于小腸的形態(tài)發(fā)育受多種因素影響，僅通過49 d的低蛋氨酸處理并不能改變小腸的形態(tài)發(fā)育，同時蛋氨酸限制的水平也可能未達到抑制小腸形態(tài)發(fā)育的劑量。

3.3 蛋氨酸水平對羔羊血清抗氧化指標的影響

在羔羊的大豆餅粕等飼糧中，蛋氨酸作為一種限制性氨基酸，不僅參與體內(nèi)的蛋白質(zhì)合成，還具有抗氧化等多種作用。動物機體的氧化還原系統(tǒng)處于動態(tài)平衡狀態(tài)，含硫氨基酸的調(diào)節(jié)功能能夠使相關(guān)物質(zhì)處于活性或者失活狀態(tài)，進而調(diào)節(jié)機體多種生理反應(yīng)[52]。GSH-Px活性可反映機體清除氧自由基的能力，是機體抗氧化防御系統(tǒng)的主要組成部分[53]，在CAT活性或過氧化氫含量很低的組織中，可替代CAT清除過氧化氫。另外，GSH-Px活性高低能夠決定清除脂類氫過氧化物速度的快慢[54]。SOD是細胞膜結(jié)構(gòu)與功能完整性的保護酶之一，其活性的高低間接反映了機體清除自由基的能力，其活性升高有助于組織細胞抵御過氧化損傷[55]。蛋氨酸能夠提高SOD的活性，增強機體的免疫應(yīng)答反應(yīng)，有助于減少病原以及自由基對機體組織的損害，促進脂肪分解代謝，可加快動物的生長[56]。GST為生物體內(nèi)廣泛存在的催化谷胱甘肽與某些疏水性化合物的親電子基團相連接的胞質(zhì)酶，可以消除體內(nèi)自由基和達到解毒的功能[57]。因此，CAT、GST、SOD和GSH-Px活性是抗氧化性能的重要指標。

蛋氨酸對動物機體血清抗氧化指標的影響多見于禽類或大鼠中的報道。劉秀麗等[58]研究報道，低蛋氨酸飼糧能降低大鼠血清中GSH-Px活性，最終導(dǎo)致機體抗氧化防御系統(tǒng)減弱。麻麗坤等[59]研究報道，適量的蛋氨酸能夠提高蛋雞血清中SOD活性。林禎平等[60]研究發(fā)現(xiàn)，飼糧添加0.66%蛋氨酸能夠顯著提高28～70日齡獅頭鵝的機體血清中SOD活性。本試驗在56日齡，LM組羔羊血清中SOD活性極顯著低于CON組，這與上述研究相一致；同時，蛋氨酸對羔羊其他血清抗氧化指標上無顯著影響，可能是羔羊機體在蛋氨酸限制時期主要通過SOD活性這一指標反映清除自由基的能力，而其他抗氧化酶活性表現(xiàn)不明顯。在84日齡時，LM組羔羊血清中除GSH-Px活性顯著低于CON組外，2組羔羊在其他血清抗氧化指標上差異均不顯著。造成這種現(xiàn)象的出現(xiàn)，作者推測前期飼糧中低蛋氨酸水平雖未對羔羊機體GSH-Px活性產(chǎn)生顯著影響，但低蛋氨酸對機體抗氧化防御的抑制效應(yīng)延伸到本試驗結(jié)束時，通過GSH-Px活性這一指標來體現(xiàn)，其作用機理有待進一步探討。目前為止，蛋氨酸水平對羔羊機體抗氧化防御系統(tǒng)的作用了解甚少，相關(guān)報道還很缺乏，需要更多的試驗來研究。

4 結(jié) 論

① 飼糧低蛋氨酸水平抑制了羔羊體況(體重、體斜長、胸圍、體長指數(shù))發(fā)育及瘤胃乳頭寬度的增加，同時降低了機體血清中SOD活性，然而卻提高了干物質(zhì)采食量。

② 提高飼糧蛋氨酸水平后，羔羊體況發(fā)育及消化道組織形態(tài)發(fā)育也隨之得到補償，但機體抗氧化防御系統(tǒng)仍未得到完全改善。

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*Corresponding author, associate professor, E-mail: zhangnaifeng@caas.cn

(責任編輯 王智航)

Effects of Methionine Level on Development of Body Condition, Morphology of Digestive Tract and Serum Antioxidant Indexes in Lambs

WANG Jie CUI Kai WANG Shiqin DIAO Qiyu ZHANG Naifeng*
(FeedResearchInstituteofChineseAcademyofAgriculturalSciences,KeyLaboratoryofFeedBiotechnologyofMinistryofAgriculture,Beijing100081,China)

The aim of this study was to assess the effects of methionine level on development of body condition, morphology of digestive tract and serum antioxidant indexes in lambs. Twelve pairs of maleHutwin lambs weaned at 7 days of age were selected and divided into two groups [control (CON) group and low methionine level (LM) group] with a matched-pairs design, and one pair of lambs were assigned to the different groups. The experiment consisted of two stages. Stage 1 (8 to 56 days of age), lambs in the CON group were fed basal milk replacer and basal starter, while those in the LM group were fed basal milk replacer and basal starter deducting 0.70% and 0.40% methionine on the basis of CON group, respectively. Stage 2 (57 to 84 days of age), all lambs were stop feeding milk replacer and fed basal starter. Six twins at 56 and 84 days of age were slaughtered to collect gastrointestinal tract tissues and serum sample. The results showed as follows: 1) for feed intake of methionine, LM group was significantly lower than CON group at 8 to 56 days of age and 8 to 84 days of age (P<0.01), but dry matter intake in LM group was significantly higher than that in CON group (P<0.05); at 56 days of age, no significant differences were observed in development of body condition indexes between groups (P>0.05) except that body weight, body length, heart girth, body length index in LM group were significantly lower than those in CON group (P<0.05); at 84 days of age, no significant differences were observed in development of body condition indexes between groups (P>0.05). 2) At 56 days of age, ruminal papillary width in LM group was significantly lower than that in CON group (P<0.05), but no significant differences were observed in indexes of morphology of the digestive tract between groups (P>0.05). 3) At 56 days of age, serum superoxide dismutase activity in LM group was significantly lower than that in CON group (P<0.01); at 84 days of age, no significant differences were observed in serum antioxidant indexes between groups (P>0.05) except that glutathione peroxidase activity in LM group was significantly lower than that in CON group (P<0.05). In conclusion, low methionine level of diet not only results in inhibiting the growth of body weight, body length, heart girth, body length index and ruminal papillary width, but also decreases serum superoxide dismutase activity, however, increases dry matter intake; after the improvement of dietary methionine level, a subsequent recovery appear in development of body condition and morphology development of digestive tract, but body’s antioxidant system is not completely improved.[ChineseJournalofAnimalNutrition, 2017, 29(5)：1792-1802]

methionine; lamb; development of body condition; morphology of digestive tract; antioxidant indexes

10.3969/j.issn.1006-267x.2017.05.040

2016-11-01

國家公益性行業(yè)(農(nóng)業(yè))科研專項(201303143)；國家肉羊產(chǎn)業(yè)技術(shù)體系建設(shè)專項(CARS-39)

王 杰(1989—)，男，山東臨沂人，碩士研究生，研究方向為動物營養(yǎng)與飼料科學(xué)。E-mail： nkywangjie@163.com

*通信作者:張乃鋒，副研究員，碩士生導(dǎo)師，E-mail: zhangnaifeng@caas.cn

S826

A

1006-267X(2017)05-1792-11