郭亞男，曹思婷，何生虎，王 爽，張 鑫，孫 鵬，雷元元，馬 燁

(寧夏大學(xué)農(nóng)學(xué)院，寧夏銀川 750021)

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寧夏部分地區(qū)規(guī)模化奶牛場(chǎng)4種疫病的血清學(xué)調(diào)查分析

郭亞男，曹思婷，何生虎*，王 爽，張 鑫，孫 鵬，雷元元，馬 燁

(寧夏大學(xué)農(nóng)學(xué)院，寧夏銀川 750021)

為了解寧夏主要奶牛養(yǎng)殖區(qū)規(guī)?；膛?chǎng)牛傳染性鼻氣管炎(IBR)、牛病毒性腹瀉(BVD)、新孢子蟲(chóng)抗體和布魯菌病原的流行狀況，采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)對(duì)未接種過(guò)IBR、BVD、新孢子蟲(chóng)疫苗、接種過(guò)布魯菌疫苗的奶牛群體進(jìn)行血清抗體檢測(cè)，并對(duì)銀川、吳忠和青銅峽地區(qū)的陽(yáng)性狀況進(jìn)行分析。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，76份流產(chǎn)牛血清中，IBR抗體陽(yáng)性率為50.00%(38/76)，BVD抗體陽(yáng)性率為19.74%(15/76)，新孢子蟲(chóng)抗體陽(yáng)性率為27.63%(21/76)，布魯菌陽(yáng)性率為19.74%(15/76)，4種病原均感染的陽(yáng)性率為34.21%(26/76)，IBR和新孢子蟲(chóng)混合陽(yáng)性率占總陽(yáng)性率的34.62% ；408份非流產(chǎn)牛血清中，BVD抗體陽(yáng)性率為12.75%(52/408)，IBR抗體陽(yáng)性率為21.08%(86/408)；IBR和BVD在寧夏的3個(gè)主要養(yǎng)殖區(qū)均有不同程度的流行，其中以銀川地區(qū)陽(yáng)性率最高。說(shuō)明寧夏部分地區(qū)IBR和BVD在不同的地區(qū)存在著不同程度的感染，流產(chǎn)牛中普遍存在上述4種疫病的感染并且IBR和BVD陽(yáng)性率明顯高于非流產(chǎn)牛。

奶牛；牛傳染性鼻氣管炎；牛病毒性腹瀉；新孢子蟲(chóng)?。徊剪斁?/p>

隨著集約化、規(guī)?；曫B(yǎng)的快速發(fā)展，牛傳染性鼻氣管炎(Infective bovine rhinotracheitis，IBR)、牛病毒性腹瀉(Bovine viral diarrhoea，BVD)、新孢子蟲(chóng)和布魯菌等感染引起的疾病逐漸成為影響奶牛飼養(yǎng)的重要疾病， 此類(lèi)疾病傳播快、治愈率低、危害性大。IBR、BVD、新孢子蟲(chóng)、布魯菌不僅導(dǎo)致牛群出現(xiàn)群發(fā)性臨床癥狀，影響牛群的生長(zhǎng)發(fā)育和生產(chǎn)性能，而且也可導(dǎo)致不孕、流產(chǎn)等繁殖性癥狀。BVD陽(yáng)性可導(dǎo)致牛群的免疫抑制，繼而造成疾病高發(fā)，給集約化生產(chǎn)造成巨大的經(jīng)濟(jì)損失[1]。研究表明，IBR常常與BVD同時(shí)發(fā)生[2]。近年已有北京、上海、河北、安徽、山東、河南、重慶、廣西、遼寧、新疆、內(nèi)蒙古等地對(duì)這4種疾病調(diào)查的相關(guān)報(bào)道，但尚未見(jiàn)寧夏主要奶牛養(yǎng)殖區(qū)對(duì)這4種病原流行狀況和非流產(chǎn)牛IBR與BVD發(fā)病狀況的相關(guān)報(bào)道[2-6]。為了調(diào)查寧夏地區(qū)流產(chǎn)奶牛群中IBR、BVD、新孢子蟲(chóng)、布魯菌感染的流行狀況及非流產(chǎn)牛IBR與BVD的流行情況，對(duì)寧夏主要奶牛養(yǎng)殖地區(qū)規(guī)?；B(yǎng)殖場(chǎng)進(jìn)行抽樣調(diào)查，為寧夏地區(qū)奶牛場(chǎng)IBR、BVD、新孢子蟲(chóng)病、布魯菌病的防控及凈化提供依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 血清樣本 從寧夏銀川、吳忠、石嘴山市周邊的14個(gè)規(guī)模化奶牛場(chǎng)隨機(jī)采集的408份非流產(chǎn)牛血清；從吳忠地區(qū)3家奶牛場(chǎng)采集具有流產(chǎn)史的奶牛血清樣本76份。采樣牛群未接種過(guò)IBR、BVD、新孢子蟲(chóng)疫苗，接種過(guò)布魯菌疫苗。

1.1.2 主要試劑 牛新孢子蟲(chóng)抗體(N.caninum-Ab)酶聯(lián)免疫分析(ELISA)試劑盒、牛病毒性腹瀉抗體(BVD Ab)酶聯(lián)免疫分析(ELISA)試劑盒、牛傳染性鼻氣管炎抗體(IBR Ab)酶聯(lián)免疫分析(ELISA)試劑盒、牛布魯菌病(Brucellosis)酶聯(lián)免疫分析(ELISA)試劑盒均為武漢基因美生物科技有限公司產(chǎn)品。

1.2 方法

采用ELISA對(duì)寧夏吳忠地區(qū)3個(gè)規(guī)?；膛?chǎng)有流產(chǎn)史的奶牛血清樣品進(jìn)行IBR、BVD、新孢子蟲(chóng)抗體和布魯菌抗原檢測(cè)，寧夏主要奶牛養(yǎng)殖區(qū)規(guī)?；膛?chǎng)的408份非流產(chǎn)牛血清進(jìn)行IBR和BVD抗體檢測(cè)。IBR、新孢子蟲(chóng)、BVD檢測(cè)：采用雙抗原夾心ELISA檢測(cè)相關(guān)病原特異性抗體，用于診斷血清中是否存在IBR、新孢子蟲(chóng)、BVD抗體，具體參考武漢基因美生物科技有限公司試驗(yàn)操作說(shuō)明書(shū)。布魯菌檢測(cè)：用雙抗夾心ELISA法檢測(cè)布魯菌的特異性抗原，用于布魯菌的定性診斷，具體步驟參考武漢基因美生物科技有限公司試驗(yàn)操作說(shuō)明書(shū)。

2 結(jié)果

2.1 流產(chǎn)牛血清樣品檢測(cè)結(jié)果

由表1可知，對(duì)吳忠地區(qū)的76份流產(chǎn)牛血清進(jìn)行了BVD、IBR、新孢子蟲(chóng)抗體和布魯菌檢測(cè)， IBR抗體陽(yáng)性血清38份，陽(yáng)性率為50.00%，強(qiáng)陽(yáng)性血清2份，強(qiáng)陽(yáng)性率為2.63%；BVD抗體陽(yáng)性血清15份，陽(yáng)性率為19.74%，強(qiáng)陽(yáng)性血清2份，強(qiáng)陽(yáng)性率為2.63%；新孢子蟲(chóng)抗體陽(yáng)性血清21份，陽(yáng)性率為27.63%，強(qiáng)陽(yáng)性血清1份，強(qiáng)陽(yáng)性率為1.32%；布魯菌陽(yáng)性血清15份，陽(yáng)性率為19.74%，強(qiáng)陽(yáng)性血清4份，強(qiáng)陽(yáng)性率為5.26%；4種疫病混合陽(yáng)性的陽(yáng)性血清26份，陽(yáng)性率為34.21%。因此，在76份流產(chǎn)牛血清中，陽(yáng)性血清總數(shù)量為44份，總陽(yáng)性率為57.89%。

由表2和圖1可知，在26份混合陽(yáng)性的陽(yáng)性血清中，IBR和新孢子蟲(chóng)混合陽(yáng)性的陽(yáng)性率占總陽(yáng)性率的34.62%，4種疫病都陽(yáng)性的陽(yáng)性率占總陽(yáng)性率的23.08%，IBR、BVD和布魯菌混合陽(yáng)性的陽(yáng)性率占總陽(yáng)性率的11.54%，其余的混感陽(yáng)性率在總陽(yáng)性率中所占的比例均在8%以下。

2.2 非流產(chǎn)牛血清樣品檢測(cè)結(jié)果

由表3可知，在檢測(cè)的408份非流產(chǎn)牛血清中，BVD抗體陽(yáng)性血清52份，陽(yáng)性率為12.75%，強(qiáng)陽(yáng)性血清14份，強(qiáng)陽(yáng)性率為3.43%；IBR抗體陽(yáng)性血清86份，陽(yáng)性率為21.08%，強(qiáng)陽(yáng)性血清13份，強(qiáng)陽(yáng)性率為3.19%；IBR和BVD混合陽(yáng)性的陽(yáng)性率為9.56%。

表1 流產(chǎn)牛血清樣本BVD、IBR、新孢子蟲(chóng)抗體和布魯菌檢測(cè)結(jié)果

表2 流產(chǎn)牛血清樣本4種疫病混合陽(yáng)性統(tǒng)計(jì)結(jié)果

表3 非流產(chǎn)牛血清樣品BVD和IBR抗體檢測(cè)結(jié)果

1.IBR和新孢子蟲(chóng)混合陽(yáng)性；2.IBR和BVD混合陽(yáng)性；3.IBR和布魯菌病混合陽(yáng)性；4.新孢子蟲(chóng)和BVD混合陽(yáng)性；5.新孢子蟲(chóng)和布魯菌病混合陽(yáng)性；6.BVD和布魯菌病混合陽(yáng)性；7.IBR、新孢子蟲(chóng)和BVD混合陽(yáng)性；8.IBR、新孢子蟲(chóng)和布魯菌病混合陽(yáng)性；9.IBR、BVD和布魯菌病混合陽(yáng)性；10.新孢子蟲(chóng)、BVD和布魯菌病混合陽(yáng)性；11.新孢子蟲(chóng)、IBR、BVD和布魯菌病混合陽(yáng)性

2.3 IBR和BVD地區(qū)流行情況

在調(diào)查寧夏銀川、吳忠和青銅峽的12個(gè)規(guī)?；膛ｐB(yǎng)殖場(chǎng)中，IBR最高陽(yáng)性率為53.75%，最低陽(yáng)性率為0，BVD的最高陽(yáng)性率為23.75%，最低陽(yáng)性率為0；3個(gè)地區(qū)的IBR的平均陽(yáng)性率為21.08%，BVD的平均陽(yáng)性率為12.75%。說(shuō)明銀川、吳忠和青銅峽地區(qū)均存在IBR和BVD病原，其中銀川地區(qū)較為嚴(yán)重。

3 討論

臨床上可引起孕牛流產(chǎn)的病因很多，主要由傳染性因素造成，如布魯菌、BVDV、IBRV、衣原體、牛沙門(mén)菌、李斯特菌、牛彎曲菌、中山病原、赤羽病原、新孢子蟲(chóng)、弓形蟲(chóng)等病原。一般情況下，妊娠奶牛有3%～8%的流產(chǎn)率是正?，F(xiàn)象[7-9]。本研究對(duì)BVD、IBR、新孢子蟲(chóng)病和布魯菌病4種疾病進(jìn)行了血清學(xué)檢測(cè)，在對(duì)吳忠地區(qū)具有流產(chǎn)史的76份奶牛血清進(jìn)行BVD、IBR、新孢子蟲(chóng)抗體和布魯菌檢測(cè)發(fā)現(xiàn)，BVDV、IBRV、新孢子蟲(chóng)抗體和布魯菌病原檢測(cè)為陽(yáng)性的流產(chǎn)牛血清份數(shù)占總血清份數(shù)的57.89%，其中混合陽(yáng)性的流產(chǎn)牛血清份數(shù)占流產(chǎn)牛血清總份數(shù)的34.21%，IBR和新孢子蟲(chóng)混合陽(yáng)性的流產(chǎn)牛血清份數(shù)占混合陽(yáng)性總血清份數(shù)的34.62%。以上數(shù)據(jù)可以表明， BVD、IBR、新孢子蟲(chóng)病和布魯菌病等疾病在具有流產(chǎn)史奶牛群中發(fā)病率較高，其中具有兩種以上病原陽(yáng)性史的奶牛為主，并且在混合感染的奶牛中以IBR和新孢子蟲(chóng)感染率較高。故在牛場(chǎng)應(yīng)針對(duì)BVD、IBR、新孢子蟲(chóng)病和布魯菌病進(jìn)行重點(diǎn)預(yù)防，及早采取凈化處理措施。

表4 銀川、吳忠和青銅峽地區(qū)IBR、BVD流行情況

在檢測(cè)BVD和IBR的 408份血清中，BVD和IBR抗體陽(yáng)性率分別為12.75%和21.08%， 低于流產(chǎn)牛的BVD陽(yáng)性率(19.74%)和IBR陽(yáng)性率(50.00%)；銀川、吳忠、青銅峽3個(gè)地區(qū)12個(gè)奶牛場(chǎng)中有9個(gè)奶牛場(chǎng)檢出了BVD和IBR陽(yáng)性血清，并且在不同的奶牛場(chǎng)陽(yáng)性率不同，其中銀川地區(qū)BVD和IBR陽(yáng)性率相對(duì)高，BVD和IBR在同一場(chǎng)區(qū)均可檢測(cè)到。說(shuō)明BVD和IBR在流產(chǎn)牛中發(fā)病率高于非流產(chǎn)牛，可能是引起奶牛流產(chǎn)的原因，但抗體陽(yáng)性只能說(shuō)明該牛曾感染過(guò)或正在感染該病原，要確定BVD和IBR是否是引起奶牛流產(chǎn)的病因還需進(jìn)行病原學(xué)調(diào)查；銀川、吳忠、青銅峽3個(gè)地區(qū)均有BVD和IBR抗體陽(yáng)性，其中銀川地區(qū)較為嚴(yán)重，可能與近年來(lái)寧夏地區(qū)大力發(fā)展奶牛業(yè)，從甘肅、內(nèi)蒙、新疆等地大量購(gòu)買(mǎi)奶牛，沒(méi)有進(jìn)行BVD和IBR等疫病的檢疫之故。BVDV感染牛主要引起腸炎、腹瀉、呼吸綜合征、先天性缺陷、免疫抑制、繁殖障礙、急性和慢性黏膜病以及母畜流產(chǎn)、產(chǎn)死胎和畸形胎等癥狀[10]。BVDV急性和持續(xù)性感染可導(dǎo)致牛群體液和細(xì)胞免疫機(jī)能受到抑制，造成感染性疾病高發(fā)[11-12]；IBRV侵入牛體后，潛伏在三叉神經(jīng)節(jié)等部位，病牛長(zhǎng)期甚至終生帶毒，且可經(jīng)空氣和接觸傳染，經(jīng)過(guò)產(chǎn)道傳染給犢牛使新生犢牛帶毒，給本病的控制和凈化帶來(lái)了困難[13-15]。因此，養(yǎng)殖中應(yīng)做好對(duì)IBR和BVD兩種疫病的檢疫，并采取相應(yīng)的措施進(jìn)行防控。目前國(guó)內(nèi)尚缺乏這兩種疫病的疫苗及有效的治療藥物，應(yīng)以預(yù)防為主，提高飼養(yǎng)管理水平，定期檢疫，發(fā)現(xiàn)病牛及時(shí)隔離并淘汰帶毒牛。

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Parts of Ningxia Large-Scale Dairy Farm Four Kinds of Disease Serological Survey Analysis

GUO Ya-nan,CAO Si-ting,HE Sheng-hu,WANG Shuang,ZHANG Xin,SUN Peng,LEI Yuan-yuan,MA Ye

(CollegeofAgronomy,NingxiaUniversity,Yinchuan，Ningxia，750021，China)

In order to investigate the prevalence of Bovine infectious rhinotracheitis (IBR), Bovine viral diarrhea (BVD),Neosporacaninumand Brucella in large-scale dairy farming in Ningxia, enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) was used to detect the serum of cows without inoculation of IBR, BVD,Neosporacaninumand inoculated caninum Brucella vaccine, and the prevalence of Yinchuan, Wuzhong and Qingtongxia areas were analyzed. The results showed that; in the serum of 76 abortive cows, IBR positive rate was 50.00% (38/76), BVD positive rate was 19.74% (15/76),Neosporacaninumpositive rate was 27.63% (21/76),Brucellapositive rate was 19.74% (15/76), the positive rate that four kinds of pathogenswhich wasinfected was 34.21% (26/76), the mixed positive rate of IBR andNeosporacaninumaccounted for 34.62% of the total positive rate. In the serum of 408 non-abortive cows, BVD positive rate was 12.75% (52/408), IBR positive rate was 21.08% (86/408). In three major dairy farming areas in Ningxia, IBR and BVD had different prevalence, and highest positive rate was in Yinchuan.In summary, the IBR and BVD pathogens were different in different regions of Ningxia. There were 4 kinds of pathogen infection and IBR and BVD positive rate in abortive cows was significantly higher than thenon-abortive cows.

Dairy cow;IBR; BVD;Neosporacaninum;Brucella

2016-04-13

郭亞男(1991-)，男，河南南陽(yáng)人，碩士研究生，主要從事獸醫(yī)臨床診斷基礎(chǔ)研究。*通訊作者

S852.4

B

1007-5038(2017)05-0123-04