金美林 蔡元

摘要：研究不同濃度的丙酮酸鈉對雞精液稀釋保存效果的影響，本試驗在前期研究所獲得基礎(chǔ)液的基礎(chǔ)上，分別添加不等量的丙酮酸鈉，以改善丙酮酸鈉對雞精液稀釋的效果。結(jié)果表明：各組精液的存活指數(shù)、有效存活時間均與對照組無顯著性的差異（P>0.05），添加2.5mmol/l的基礎(chǔ)液對精液的稀釋保存與對照組相比有提高的趨勢，而添加其他濃度的稀釋液與對照組相比有降低的趨勢。

關(guān)鍵詞：丙酮酸鈉；雞；精液稀釋

中圖分類號：S858.31 文獻(xiàn)標(biāo)識碼：B 文章編號：2096-3637（2017）07-0002-01

丙酮酸鈉是丙酮酸的鈉鹽，作為內(nèi)源的能量代謝底物，是三大營養(yǎng)物質(zhì)的代謝樞紐，對維持組織細(xì)胞有氧代謝，保障機體能量代謝具有重要作用和較強的抗氧化作用。在許多細(xì)胞組織培養(yǎng)中，丙酮酸鹽得到廣泛應(yīng)用，并取得了較好效果。國內(nèi)外許多學(xué)者將丙酮酸鹽運用于人和動物精液的稀釋低溫保存或冷凍保存，取得的效果很好，但在家禽上還很少有人研究。

1 材料

1.1 10只海藍(lán)褐公雞 在西北民族大學(xué)生命科學(xué)與工程學(xué)院6樓飼養(yǎng)，采精后30min內(nèi)進(jìn)行精液稀釋。

1.2 儀器 有電子天平，烘箱，生物顯微鏡，恒溫水浴鍋，4℃冰箱，溫度計，載玻片，蓋玻片，容量瓶，移液槍，采精杯等。

1.3試劑 果糖、谷氨酸鈉、檸檬酸、氯化鉀、檸檬酸鈉、磷酸二氫鉀、磷酸氫二鉀、Tris、青霉素、鏈霉素、丙酮酸鈉。

2 方法

2.1 稀釋液制備

果糖1g/100ml，谷氨酸鈉0.2g/100ml，氯化鉀0.1g/100ml，檸檬酸鈉0.2g/100ml，磷酸二氫0.25g/100ml，磷酸氫二鉀0.7g/100ml，檸檬0.04g/100ml，和Tris0.04g/100ml所調(diào)試的基礎(chǔ)液上分別加入0.5mmol/l，1.0mmol/l，1.5mmol/l，2.0mmol/l，2.5mmol/l的丙酮酸鈉，準(zhǔn)確稱取所需要的試劑，（不添加丙酮酸鈉的為對照組）溶解后用100ml的容量瓶定容，分別裝入250ml的瓶中，100℃高溫滅菌30min后，加入10萬單位的青霉素和鏈霉素，蠟封冷卻至室溫后，放入4℃冰箱中保存?zhèn)溆谩?/p>

2.2 精液的稀釋與保存

供試精液的公雞，采用背腹聯(lián)合按摩法采集精液，采集后進(jìn)行品質(zhì)評定。將無糞尿污染的精液混合，活率大于 0.7時供稀釋保存之用。 將采集的混合鮮精液與各稀釋液按精液∶稀釋液 1∶4 進(jìn)行等溫稀釋， 再分裝于潔凈的青霉素空瓶中， 加蓋后用6層紗布包裹放入4 ℃冰箱中保存。

2.3 精液的品質(zhì)檢查

隔12h觀察一次精子的活率并記錄，到全部精子死亡，最后計算精子有效存活時間和生存指數(shù)。在試驗操作過程中始終保持無菌操作和精液保存溫度的恒定，試驗重復(fù)操作5次。

3 數(shù)據(jù)處理

試驗共分6個組，對照組的稀釋液為前期研究所獲得較好的基礎(chǔ)液，試驗組1～5的稀釋液在對照組的基礎(chǔ)上添加不同濃度的丙酮酸鈉。對所得的各組數(shù)據(jù)采用SPSS17.0統(tǒng)計軟件進(jìn)行比較，檢驗差異的顯著性，顯著性水平為P<0.05。

4 結(jié)果與分析

4.1 不同濃度的丙酮酸鈉對雞精液存活指數(shù)的影響

從表1中可以看出，試驗組5與對照組相比存活指數(shù)有提高了6.77%，而其他試驗組與對照組相比存活指數(shù)均有所減少了。但試驗組與對照組相比差異均不顯（P>0.05）。

4.2 不同濃度的丙酮酸鈉對雞精液有效存活時間的影響

從表2中可以看出，對照組與試驗組之間差異均不顯著（P>0.05），試驗組5與對照組相比有效存活時間有提高，而其他試驗組與對照組相比有效存活時間均降低。說明在本試驗條件下，添加不同濃度的丙酮酸鈉對雞精液稀釋保存的有效存活時間沒有顯著的影響（P>0.05）。

5 討論

丙酮酸作為機體中重要的一種有機小分子，在機體中也起著很重要的作用。

6 結(jié)論

在前期研究的基礎(chǔ)液上，添加不同濃度的丙酮酸鈉，對于雞精液稀釋保存的存活指數(shù)以及有效存活時間的影響差異不顯著，但添加2.5mmol/l的丙酮酸鈉相對于基礎(chǔ)液，可以使測定的三個指標(biāo)有提高的趨勢。

參考文獻(xiàn)

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