李晶，魏健

（1.吉林體育學(xué)院，吉林長春130033；2.長春師范大學(xué)，吉林長春130032）

刺五加、枸杞子配伍對(duì)糖尿病模型小鼠降血糖作用的研究

李晶1，魏健2，*

（1.吉林體育學(xué)院，吉林長春130033；2.長春師范大學(xué)，吉林長春130032）

探討野生刺五加聯(lián)合枸杞子對(duì)糖尿病模型小鼠的降血糖作用的影響。選取50只糖尿病模型小鼠隨機(jī)分為刺五加組（5g/kg）、枸杞子組（5g/kg）、刺五加、枸杞子（1∶1）配伍組、四氧嘧啶模型組、空白對(duì)照組，連續(xù)灌胃15 d。測定其空腹血糖，胰島素水平、血清SOD、MDA含量，進(jìn)行口服糖耐量實(shí)驗(yàn)。結(jié)果表明：刺五加、枸杞子配伍組與四氧嘧啶模型組比較可顯著降低糖尿病模型小鼠空腹血糖，提高胰島素水平和葡萄糖耐受量，顯著提高糖尿病小鼠血清中SOD活性，降低MDA的含量。長白山野生刺五加與枸杞子聯(lián)合對(duì)糖尿病模型小鼠有降血糖作用。

刺五加；枸杞子；降血糖

五加科植物刺五加味辛、微苦、性溫、無毒。又名五加參，老虎釘子，刺拐棒，刺木棒。刺五加常叢生于山地闊葉混交林下及林緣或采伐跡地上，吉林省長白山地區(qū)是主要生長區(qū)域。刺五加根莖中含有主要生物活性成分為皂苷和多糖，另外還含有香豆精、黃酮、琥珀酸和腺苷等化合物[1-2]。研究報(bào)道刺五加注射液具有擴(kuò)張心腦血管、降低心肌耗氧量、改善微循環(huán)、清除氧自由基等作用，具有提高葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)能力、降低血糖、治療糖尿病的作用。刺五加和其他藥物配伍組成合劑能降低糖尿病大鼠的血清生化指標(biāo)以及降低空腹血糖。但目前對(duì)于野生刺五加和枸杞子配伍組成合劑聯(lián)合降血糖影響未見深入研究。本試驗(yàn)以長白山野生刺五加和枸杞子為原料，通過探討野生刺五加聯(lián)合枸杞子配伍組成合劑對(duì)糖尿病模型小鼠的降血糖影響，以及進(jìn)一步闡明刺五加與枸杞子的降血糖的作用，為開發(fā)長白山野生刺五加與枸杞子產(chǎn)業(yè)提供參考依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料與試劑

刺五加、枸杞子：長白山松江河林業(yè)局；四氧嘧啶：美國Sigma公司；葡萄糖測定試劑盒：上海榮盛生物藥業(yè)有限公司；小鼠胰島素檢測試劑盒、SOD、MDA試劑盒：南京建成生物工程研究所。

1.2 刺五加和枸杞子水煎劑的制備

刺五加（枸杞子）干品→除雜→漂洗→浸泡→煎煮（100℃，30 min）→過濾→煎煮（100℃，30 min）→兩次煎劑混合→濃縮→調(diào)整濃度（藥液濃度為10%）→刺五加水煎劑

1.3 糖尿病小鼠模型的建立及分組

6周齡健康雄性昆明種小鼠[體重：（20±2）g，白求恩醫(yī)科大學(xué)提供]。適應(yīng)性飼養(yǎng)3 d，按四氧嘧啶溶液200 mg/kg的劑量，對(duì)禁食12 h后的小鼠進(jìn)行腹腔注射[6]。建立糖尿病動(dòng)物模型。96 h后，禁食12 h，測定空腹血糖，以血糖大于11.1 mmo1/L者作為糖尿病模型小鼠。將糖尿病模型小鼠隨機(jī)分為4組：四氧嘧啶模型組、刺五加組（5 g/kg）、枸杞子組（5 g/kg）、刺五加和枸杞子（質(zhì)量比1∶1）配伍組，每組10只；以普通正常小鼠作為空白對(duì)照組（10只）。試驗(yàn)期間各組小鼠連續(xù)灌胃15 d，四氧嘧啶模型組和空白對(duì)照組灌胃生理鹽水。

1.4 小鼠空腹血糖的測定

連續(xù)給藥15 d，以對(duì)小鼠灌胃當(dāng)天為第0天，每5天測定1次體質(zhì)量、血糖。末次給藥后測得最終體質(zhì)量和血糖濃度。

1.5 小鼠糖耐量的實(shí)驗(yàn)

給藥15 d后各組小鼠禁食不禁水6 h，小鼠尾靜脈取血作為0 h的血糖值。然后每只小鼠口服給予2 g/kg的葡萄糖溶液，分別測定0、0.5、1、2 h各組小鼠血糖值，比較口服葡萄糖耐量（OGTT）。

1.6 胰島素水平、SOD、MDA含量的測定

第15天測定空腹血糖后，摘眼球取血，分離血清，對(duì)小鼠進(jìn)行眼眶靜脈采血，3 500 r/min離心10 min取血清，按照小鼠胰島素檢測試劑盒說明書操作，測定血清SOD、MDA含量、胰島素濃度，使用公式計(jì)算胰島素抵抗指數(shù)HOMA-IR=[空腹血糖（mmol/L）×空腹胰島素（mIU/L）]/22.5。計(jì)算胰島素敏感指數(shù)（ISI），計(jì)算公式為ISI=1/（空腹血糖×空腹血清胰島素）。

1.7 統(tǒng)計(jì)分析

實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)采用Tukey-Kramer post-hoc檢驗(yàn)單因素方差分析進(jìn)行多重比較。組間顯著差異采用t檢驗(yàn)。所有數(shù)據(jù)均以平均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（Mean±SD）表示。采用SPSS 14 for Windows（SPSS Inc.，USA）統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行分析。P<0.05表示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果與分析

2.1 刺五加、枸杞子配伍對(duì)糖尿病小鼠空腹血糖的影響

刺五加、枸杞子配伍對(duì)糖尿病小鼠血糖的影響結(jié)果見表1。

表1 刺五加、枸杞子配伍對(duì)糖尿病小鼠血糖的影響Table 1The hypoglycemic effect of Acanthopanax senticosus and Chinese wolfberry fruit on diabetic mice

由表1可知，灌胃刺五加和枸杞子水煎劑后，與四氧嘧啶模型組比較，刺五加組、枸杞子組和配伍組糖尿病小鼠的血糖值均呈現(xiàn)下降的趨勢，在第10天開始出現(xiàn)血糖下降較為顯著（P<0.05），五味子、枸杞子配伍組血糖下降趨勢較大，在第15天血糖下降顯著（P< 0.01），接近空白對(duì)照組顯示的血糖值。

2.2 刺五加、枸杞子配伍對(duì)糖尿病小鼠口服糖耐量的影響

刺五加、枸杞子配伍對(duì)糖尿病小鼠糖耐量的影響結(jié)果見表2。

表2 刺五加、枸杞子配伍對(duì)糖尿病小鼠糖耐量的影響Table 2The glucose tolerance effect of Acanthopanax senticosus and Chinese wolfberry fruit on diabetic mice

由表2可知，灌胃刺五加和枸杞子水煎劑15d后，五味子、枸杞子配伍組和刺五加組、枸杞子組比較，給予葡萄糖后30 min時(shí)，血糖上升幅度最小，在60 min～120 min時(shí)五味子、枸杞子配伍組血糖水平下降較快，與四氧嘧啶模型組比較，具有顯著性差異（P＜0.01）。

2.3 刺五加、枸杞子配伍對(duì)糖尿病小鼠胰島素水平的影響

刺五加、枸杞子配伍對(duì)糖尿病小鼠胰島素水平的影響結(jié)果見表3。

表3 刺五加、枸杞子配伍對(duì)糖尿病小鼠胰島素水平的影響Table 3Fasting insulin effect of Acanthopanax senticosus and Chinese wolfberry fruit on diabetic mice

由表3可知，灌胃刺五加和枸杞子水煎劑后，刺五加、枸杞子配伍組與四氧嘧啶模型組比較胰島素水平、胰島素抵抗指數(shù)顯著低于模型組（P＜0.01），胰島素敏感顯著低于模型組（P＜0.05），單一灌胃刺五加或枸杞子組與四氧嘧啶模型組比較胰島素抵抗指數(shù)、胰島素敏感指數(shù)顯著低于四氧嘧啶模型組（P＜0.05）。

2.4 刺五加、枸杞子配伍對(duì)糖尿病小鼠SOD、MDA的影響

刺五加、枸杞子配伍對(duì)小鼠SOD、MDA的影響結(jié)果見表4。

表4 刺五加、枸杞子配伍對(duì)小鼠SOD、MDA的影響Table 4Serum SOD，serum MDA effect of Acanthopanax senticosus and Chinese wolfberry fruit on diabetic mice

由表4可知，刺五加、枸杞子配伍組與四氧嘧啶模型組比較，血清中SOD活性顯著高于模型組（P＜0.01）；血清MDA值顯著低于模型組（P＜0.01）。枸杞子組與四氧嘧啶模型組比較血清中SOD活性顯著高于模型組（P＜0.05）；刺五加組小鼠血清中血清MDA值顯著低于模型組（P＜0.05）。

3 結(jié)論與討論

糖尿病是一種由胰島素分泌缺陷或胰島素作用障礙所致的以高血糖為特征的代謝性疾病。糖尿病會(huì)引起胰島素絕對(duì)或相對(duì)分泌不足以及靶組織細(xì)胞對(duì)胰島素敏感性降低，在機(jī)體糖代謝的過程中，胰島素能促進(jìn)機(jī)體組織對(duì)葡萄糖的攝取和利用，同時(shí)能抑制糖原異生，并能促進(jìn)糖原分解[8-9]。本研究結(jié)果顯示，刺五加、枸杞子配伍對(duì)糖尿病小鼠的血糖具有顯著降低作用，同時(shí)其也能顯著提高糖尿病模型小鼠的糖耐量水平，刺五加、枸杞子配伍對(duì)糖尿病模型小鼠的降血糖的作用大于刺五加和枸杞子單獨(dú)作用時(shí)的降血糖作用，同時(shí)能顯著提高糖尿病模型小鼠血清中的胰島素水平，降低胰島素敏感指標(biāo)，促進(jìn)胰島素分泌的功能。

氧化自由基在機(jī)體糖代謝中起著重要作用，氧化自由基可以影響糖尿病胰島β細(xì)胞的活性，血糖較高時(shí)葡萄糖及糖化蛋白會(huì)產(chǎn)生自動(dòng)氧化，從而使機(jī)體自由基增加，所以，糖尿病患者容易受到自由基侵害，自由基的清除在糖尿病預(yù)防和治療中發(fā)揮著重要作用。營養(yǎng)補(bǔ)劑清除自由基的作用在糖尿病的研究中也備受關(guān)注[10-11]。SOD是清除體內(nèi)氧自由基的重要功能蛋白，SOD的活性往往反映著機(jī)體清除氧自由基的潛力和抗氧化能力。MDA是膜脂過氧化的終產(chǎn)物之一，可以反映機(jī)體內(nèi)的脂質(zhì)過氧化程度，其含量常作為衡量體內(nèi)脂質(zhì)過氧化程度的重要指標(biāo)[12-13]。本研究結(jié)果顯示，刺五加枸杞子配伍可有效提高糖尿病小鼠血清中SOD活性，降低MDA的含量，促進(jìn)機(jī)體內(nèi)自由基的清除，抑制脂質(zhì)過氧化，增強(qiáng)小鼠的抗氧化能力。對(duì)血清中SOD活性和MDA的含量影響大于刺五加或枸杞子單獨(dú)使用。

綜上所述，刺五加、枸杞子配伍煎劑具有調(diào)節(jié)胰島素水平和改善機(jī)體抗氧化功能的作用，由此可見刺五加和枸杞子配伍的降血糖作用優(yōu)于刺五加或枸杞子單獨(dú)作用時(shí)的降糖作用。

[1]樊如強(qiáng),傅宏征,金學(xué)英,等.刺五加有效成分提取工藝考察及不同產(chǎn)地刺五加中有效成分量的比較[J].中草藥,2014,45(5)：260-264

[2]許光輝,吳艷萍,羅友華,等.刺五加增強(qiáng)小鼠睡眠剝奪模型免疫功能和抗疲勞能力的實(shí)驗(yàn)研究[J].中國實(shí)驗(yàn)方劑學(xué)雜志,2012,18 (23)：173-175

[3]張英華,關(guān)雪.刺五加葉中黃酮類提取物的抗氧化性及抑菌作用研究[J].東北農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào),2014,43(3)：85-90

[4]靳祎,劉超,范林林,等.刺五加多糖對(duì)人宮頸癌HeLa細(xì)胞體外增殖和凋亡作用的實(shí)驗(yàn)研究[J].中成藥,2014,36(1)：162-164

[5]王知斌,郭江濤,姜海,等.刺五加葉的化學(xué)成分和藥理作用研究[J].中醫(yī)藥信息,2013,30(3)：31-33

[6]王益民,張珂,許飛華,等.不同品種枸杞子營養(yǎng)成分分析及評(píng)價(jià)[J].食品科學(xué),2014,35(1)：34-38

[7]MAO Fang,XIAO Bingxiu,FUKAMIH,et al.Anticancer effect of Lyciumbarbarum polysaccharides on colon cancer cells involves G0/ G1phase arrest[J].Medical Oncology,2011,28(1)：121-126

[8]Zhao L,FUKAMI H,KUSUMOTO A,et al.Antioxidant activity of aqueous extract fractions of velvet antler(Cervuselaphus Linnaeus) [J].Journal of Food&Drug Analysis,2010,18(5)：319-327

[9]Pravin S K,Durgacharan A B,Dinesh M S.Deer antlers-Traditional use and future perspectives[J].Indian Journal of Traditional Knowledge,2010,9(2)：245-251

[10]林龍,常建波,孫煜煊.孔石莼多糖降血糖作用研究[J].食品科技, 2012,37(6)：224-227

[11]陳紅漫,李寒雪,闞國仕,等.苦瓜多糖的抗氧化活性與降血糖作用相關(guān)性研究[J].食品工業(yè)科技,2012,33(18)：349-354

[12]李婷婷,吳彩娥,方升佐,等.青錢柳沖劑對(duì)糖尿病小鼠的降血糖功效[J].食品科學(xué),2012,33(1)：287-290

[13]張文,陳建偉,李祥,等.猴頭菌粉提取物對(duì)2型糖尿病小鼠降血糖作用研究[J].中國實(shí)驗(yàn)方劑學(xué)雜志,2012(7)：176-180

Effect of Compatibility of Acanthopanaxs enticosus and Chinese Wolfberry Fruit on Reducing Blood Sugar in Diabetic Model Mice

LI Jing1，WEI Jian2，*
（1.Jilin Sports University，Changchun 130033，Jilin，China；2.Changchun Normal University，Changchun130032，Jilin，China）

In this paper we investigated the hypoglycemic effect of wild Acanthopanax and Chinese wolfberry fruit towards diabetic mice.We made 50 diabetic mice randomly divided into the following groups：Acanthopanax group（5 g/kg），Chinese wolfberry fruit group（5 g/kg），Acanthopanax and Chinese wolfberry fruit（1∶1）group，alloxan model group and the blank control group.The mice were continouslyreceivedthe intragastricadministration for 15 days and measured the content of fasting blood glucose，insulin，serum SOD，serum MDA，then we conductedthe oral glucose tolerance experiment on the mice.Results：Acanthopanax and Chinese wolfberry fruit group and alloxan model group significantly reduced the fasting blood glucose in diabetic mice，increasing the level of insulin and glucose tolerance and significantly improving the SOD activity in serum of diabetic mice，mean while the content of MDA was reduced.Changbai Mountain wild Acanthopanax combined with fruit of Chinese wolfberry has a hypoglycemic effect on diabetic mice.

Acanthopanax senticosus；Chinese wolfberry fruit；lowering blood sugar

10.3969/j.issn.1005-6521.2017.09.041

2016-12-23

李晶（1982—），女（滿），講師，在讀博士，研究方向：食品營養(yǎng)與健康。

*通信作者：魏?。?980—），副教授，博士，研究方向：生命科學(xué)。