靳濤 徐倩 陳丹娜
【摘 要】 青藤堿(Sinomenine,SN)是從防己科植物青風(fēng)藤干燥的根莖中提取出來(lái)的一種生物堿單體,分子式為C19H23NO4,結(jié)構(gòu)與嗎啡相似,是一種植物中很強(qiáng)的組織胺釋放劑。目前對(duì)于青藤堿藥理作用的研究多集中在鎮(zhèn)痛鎮(zhèn)靜、鎮(zhèn)咳局麻、降血壓、抗炎、臨床上用于治療風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎和神經(jīng)痛等方面,隨著近些年研究的深化,人們對(duì)青藤堿的作用機(jī)制以及藥理研究有了新的看法,國(guó)內(nèi)外的的學(xué)者越來(lái)越多的重視到其在抗腫瘤方面的作用。本文概括了青藤堿近年來(lái)在抑制腫瘤生長(zhǎng)、促進(jìn)癌細(xì)胞凋亡方面的研究進(jìn)展,期望為臨床運(yùn)用提供一個(gè)新思路。
【關(guān)鍵詞】 青藤堿 抗腫瘤 研究進(jìn)展
癌癥(cancer),醫(yī)學(xué)上稱為:惡性腫瘤(malignant neoplasm),其具有生長(zhǎng)快,易浸潤(rùn)或向遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移,難以根治等特點(diǎn)。由于發(fā)病器官和組織部位的不同,呈現(xiàn)出不同的臨床表現(xiàn),早期沒(méi)有明顯癥狀,發(fā)病隱匿,大多數(shù)患者察覺(jué)出癥狀時(shí),癌癥已進(jìn)入中晚期。一般對(duì)于發(fā)現(xiàn)較早的實(shí)體腫瘤來(lái)說(shuō),手術(shù)一直是最佳的醫(yī)治手段,理論上可以根治。對(duì)于處于晚期或沒(méi)有實(shí)體腫瘤的癌癥,可選擇化學(xué)治療、放射線治療、靶向治療、免疫治療法等。實(shí)際治療中,大部分常用的治療手段在殺死癌細(xì)胞,抑制腫瘤生長(zhǎng)的過(guò)程中都會(huì)對(duì)機(jī)體和正常組織產(chǎn)生極強(qiáng)的毒副作用,給患者及家屬帶來(lái)極大的痛苦。因此怎樣在治療過(guò)程中盡可能的減少對(duì)正常組織的影響,降低傷害,并且醫(yī)療效果顯著的的治療手段成為近些年來(lái)癌癥研究的主要方向。
青藤堿(Sinomenine,Sino) 從防己科植物青藤和毛青藤中提取,主要成分是一種可分離的生物堿單體,其分子式為C19H23NO4,其結(jié)構(gòu)與嗎啡相似,具有鎮(zhèn)痛鎮(zhèn)靜、鎮(zhèn)咳局麻、降血壓、抗炎等作用,臨床藥物多以鹽酸青藤堿的形式存在。目前關(guān)于青藤堿藥理作用的研究報(bào)道大部分集中在抗炎鎮(zhèn)痛與免疫抑制方面,并且有動(dòng)物實(shí)驗(yàn)顯示,在休克狀態(tài)和受損器官中青藤堿能夠起到一定的保護(hù)作用,但在抑制腫瘤細(xì)胞方面的報(bào)道較少。研究表明,青藤堿能夠抑制人巨噬細(xì)胞,成纖維樣滑膜細(xì)胞的生長(zhǎng)與增殖,且在體內(nèi)外實(shí)驗(yàn)得到驗(yàn)證,而且研究發(fā)現(xiàn)青藤堿還能抑制與腫瘤產(chǎn)生、發(fā)展緊密聯(lián)系的基因表達(dá),熱休克蛋白27(HSP27),死亡結(jié)構(gòu)域相關(guān)蛋白,胎盤生長(zhǎng)因子(PIGF),如白介素6(IL-6)等的表達(dá),由于大量與之類似的異喹啉類生物堿都具有抗腫瘤活性,因此推斷青藤堿也具有促進(jìn)腫瘤細(xì)胞凋亡的作用。
1 抗腫瘤作用
1.1 抗乳腺癌
相關(guān)研究發(fā)現(xiàn)鹽酸青藤堿對(duì)乳腺癌細(xì)胞MCF-7的增殖具有明顯的抑制作用,并與臨床常用的抗癌藥物5-氟尿苷(5-FUR)進(jìn)行比較,2.5-5.0mmol/L青藤堿對(duì)人乳腺癌MCF-7細(xì)胞均產(chǎn)生阻礙其增殖、生長(zhǎng)的作用,并且青藤堿單獨(dú)作用于乳腺癌細(xì)胞系的抑制效果比5-FUR及青藤堿聯(lián)用5-FUR效果顯著。
只要條件適宜,癌細(xì)胞能夠無(wú)限繁殖,且分裂速度較普通細(xì)胞很快,因此,目前市面上主流的抗腫瘤藥物通常都是以抑制腫瘤細(xì)胞分裂來(lái)阻礙腫瘤的發(fā)展。進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn),在青藤堿的作用下處于G1/S細(xì)胞周期的癌細(xì)胞終止分裂,并進(jìn)一步殺死癌細(xì)胞,MAPK信號(hào)通路可能參與了這一分子機(jī)制的介導(dǎo)。青藤堿在有效抑制癌細(xì)胞生長(zhǎng)、殺死癌細(xì)胞的同時(shí)并未對(duì)其他組織產(chǎn)生影響。因此鹽酸青藤堿可用于乳腺癌的治療。
1.2 抗胃癌
LV[1]等通過(guò)以青藤堿作為實(shí)驗(yàn)組,用塞來(lái)昔步作為實(shí)驗(yàn)的陽(yáng)性對(duì)照,將青藤堿按照一定的濃度梯度作用于胃腺癌SGC-7901細(xì)胞。結(jié)果表明,青藤堿對(duì)胃腺癌SGC-7901細(xì)胞的增殖抑制及COX-2的表達(dá)抑制都有很好的效果,且呈濃度、時(shí)間依賴性;在塞來(lái)昔布或青藤堿的作用下,細(xì)胞變圓并出現(xiàn)分離形態(tài),這表明細(xì)胞出現(xiàn)凋亡現(xiàn)象。這表明青藤堿之所以對(duì)胃腺癌細(xì)胞有抑制作用與COX-2的表達(dá)是存在聯(lián)系的。Liao[2]等通過(guò)將青藤堿與5-氟尿嘧啶單獨(dú)作用于小鼠模型,與將二者合并用藥作用于小鼠模型的結(jié)果相對(duì)比,并記錄胃癌細(xì)胞的變化,結(jié)果表明,青藤堿能夠顯著加強(qiáng)5-氟尿嘧啶所介導(dǎo)的對(duì)癌細(xì)胞的生長(zhǎng)抑制作用,加速誘導(dǎo)了胃癌細(xì)胞的凋亡,因?yàn)榍嗵賶A的這種藥理特性,使之有機(jī)會(huì)成為5-氟尿嘧啶用藥醫(yī)治胃癌時(shí)的化療的敏化劑。
1.3 抗肝癌
研究表明,在體內(nèi)實(shí)驗(yàn)中,將青藤堿以不同濃度梯度注入人肝癌Hep3B細(xì)胞小鼠移植瘤模型,一段時(shí)間后觀察到小鼠體內(nèi)腫瘤的體積與重量均有明顯下調(diào);在體外實(shí)驗(yàn)中,鹽酸青藤堿呈時(shí)間和劑量依賴性方式顯著的抑制肝癌細(xì)胞系的生長(zhǎng),大部分肝癌細(xì)胞出現(xiàn)染色質(zhì)凝集以及核碎裂等現(xiàn)象,增加了細(xì)胞的凋亡。這表明青藤堿在體內(nèi)外均對(duì)癌細(xì)胞的增殖有很好的抑制作用。Hong等[3]通過(guò)TfR mAb聯(lián)合青藤堿抗腫瘤效應(yīng)的研究中發(fā)現(xiàn),使用TfR mAb單獨(dú)作用于人肝癌細(xì)胞HepG2,會(huì)使COX-2與VEGF的表達(dá)上調(diào),且表達(dá)與劑量呈正相關(guān);使用青藤堿單獨(dú)作用于的人肝癌細(xì)胞系,COX-2的表達(dá)與劑量呈負(fù)相關(guān)。使用TfRmAb與青藤堿聯(lián)合處理人肝癌細(xì)胞HepG2后, 明顯的降低了COX-2和VEGF的表達(dá),且較兩者單獨(dú)處理的細(xì)胞系更為顯著。表明青藤堿的抗腫瘤作用可能通過(guò)調(diào)節(jié)COX-2和VEGF的表達(dá)來(lái)完成。
何晶晶等[4]通過(guò)實(shí)驗(yàn)探討了青藤堿對(duì)人肝癌細(xì)胞HepG2的侵襲和轉(zhuǎn)移能力的影響。實(shí)驗(yàn)采用0.125-2.5mmol/L青藤堿和0.1mmol/L的氟尿嘧啶作為實(shí)驗(yàn)的陽(yáng)性對(duì)照組處理人肝癌細(xì)胞HepG2。最終得出結(jié)論:鹽酸青藤堿對(duì)人肝癌細(xì)胞HepG2的侵襲性和轉(zhuǎn)移性以及快速增殖都有很好的抑制作用。并且猜測(cè)青藤堿抑制人肝癌細(xì)胞的侵襲與轉(zhuǎn)移是通過(guò)抑制細(xì)胞外基質(zhì)實(shí)現(xiàn)的。
1.4 抗肺癌
通過(guò)近年研究發(fā)現(xiàn),非小細(xì)胞肺癌中COX-2明顯有上調(diào)的趨勢(shì),但是否能通過(guò)抑制COX-2的活性來(lái)醫(yī)治肺癌還有待討論。姜廷樞等[5]通過(guò)實(shí)驗(yàn)研究了青藤堿對(duì)肺癌細(xì)胞系A(chǔ)549生長(zhǎng)的影響。結(jié)果表明,用不同劑量的青藤堿(1.0,0.5,0.25mmol/L)劑量組處理A549細(xì)胞不同的梯度時(shí)間后,細(xì)胞增殖明顯受到抑制,且呈明顯的時(shí)間、劑量的依賴性。青藤堿處理組處于G1期細(xì)胞比例顯著上調(diào),凋亡率也較對(duì)照組升高,并且與劑量呈依賴性。這表明,青藤堿在體外能夠有效的抑制肝癌細(xì)胞A549的增殖與生長(zhǎng)。還有實(shí)驗(yàn)表明,通過(guò)使用青藤堿作用于肺癌細(xì)胞株Calu-1研究,表明青藤堿能夠呈時(shí)間和劑量依賴性地抑制人肺癌細(xì)胞株Calu-1的生長(zhǎng)、增殖,還能夠誘導(dǎo)其凋亡。
實(shí)驗(yàn)表明,青藤堿對(duì)肺癌細(xì)胞的信號(hào)通路也會(huì)造成一定的影響。Zhou等[6]在P13K/Akt和MEK/ERK信號(hào)通路的活化對(duì)青藤堿誘導(dǎo)的肺癌細(xì)胞凋亡影響實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn),P13K/Akt和MEK/ERK信號(hào)通路的活化能夠阻礙青藤堿誘導(dǎo)的肺癌細(xì)胞NCL-H460的凋亡,抑制這兩條通路可以增加青藤堿的效應(yīng)。也有實(shí)驗(yàn)表明,青藤堿作用癌細(xì)胞的同時(shí)伴隨著這兩條信號(hào)通路的活化,但是抑制這兩條信號(hào)通路后,青藤堿誘導(dǎo)的細(xì)胞凋亡率明顯上升。表明P13K/Akt和MEK/ERK兩條信號(hào)通路在青藤堿抗腫瘤作用中發(fā)揮著重要作用。
1.5 抗宮頸癌
張瑜等通過(guò)實(shí)驗(yàn)證明了青藤堿對(duì)宮頸癌Hela細(xì)胞的抑制作用。結(jié)果顯示,用0.1-2.5mmol/L的青藤堿作用于宮頸癌Hela細(xì)胞,均能抑制其增殖,且呈時(shí)間、劑量的依賴性;青藤堿作用Hela細(xì)胞后,細(xì)胞凋亡率顯著增高,并和濃度與作用時(shí)間呈正相關(guān),其機(jī)制與其誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡、阻滯細(xì)胞周期存在一定聯(lián)系。也有研究發(fā)現(xiàn),在體外實(shí)驗(yàn)中,青藤堿能夠明顯抑制人宮頸癌細(xì)胞Hela的生長(zhǎng)與增殖,其能夠誘導(dǎo)Hela細(xì)胞凋亡從而實(shí)現(xiàn)抑制作用,它的作用機(jī)制可能與P13K/Akt-Caspase-3信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路存在一定聯(lián)系。
研究表明聯(lián)合鉑類藥物對(duì)宮頸癌細(xì)胞也具有一定的影響。施榮東等[7]探討了青藤堿與順鉑(DDP)聯(lián)用對(duì)宮頸癌細(xì)胞Hela的影響。結(jié)果顯示,青藤堿能夠有效的抑制其增殖,并且呈現(xiàn)時(shí)間和劑量的依賴性,與順鉑聯(lián)合作用于宮頸癌Hela細(xì)胞后,癌細(xì)胞的增殖速度明顯減弱,這表明使用青藤堿與順鉑對(duì)兩種藥物聯(lián)合對(duì)宮頸癌Hela細(xì)胞的增殖可產(chǎn)生協(xié)同抑制的作用。在青藤堿與卡鉑聯(lián)用對(duì)宮頸癌Hela細(xì)胞抑制作用方面,吳敏等通過(guò)實(shí)驗(yàn)表明,兩藥聯(lián)合作用對(duì)宮頸癌Hela細(xì)胞有顯著的抑制作用,呈時(shí)間、濃度的依賴性,且抑制效果顯著高于單藥處理組,兩藥的協(xié)同抑制作用效果更加明顯。這表明,青藤堿可以有效提高化療藥物的療效。
1.6 抗白血病
童向民等[8]做了在血液系統(tǒng)腫瘤方面的研究發(fā)現(xiàn),結(jié)果顯示,青藤堿可以誘導(dǎo)白血病細(xì)胞K562的凋亡,COX-2與NF-KB表達(dá)程度在青藤堿作用后出現(xiàn)顯著下調(diào)。從而得到青藤堿誘導(dǎo)的K562細(xì)胞凋亡是以抑制COX-2與NF-kB表達(dá)程度來(lái)實(shí)現(xiàn)的結(jié)論。
2 抗多藥耐藥作用
多藥耐藥(mulitidrug resistance,MDR)是指腫瘤細(xì)胞對(duì)一種抗腫瘤藥物出現(xiàn)耐藥性的同時(shí),對(duì)其他結(jié)構(gòu)和作用機(jī)理不同的抗腫瘤藥物產(chǎn)生交叉耐藥性,分為原發(fā)性耐藥和獲得性耐藥,這是導(dǎo)致化療失敗的主要原因之一。據(jù)相關(guān)數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì),大約90%以上的腫瘤化療失敗是由于多藥耐藥性。Liu等[9]通過(guò)研究發(fā)現(xiàn),將柔比星作用于具備多藥耐藥性的結(jié)腸癌Caco-2細(xì)胞系時(shí),發(fā)現(xiàn)COX-2和多藥耐藥-1基因表達(dá)上調(diào),同時(shí)激活結(jié)腸癌Caco-2細(xì)胞中NF-KB信號(hào)通路。將青藤堿作用于該細(xì)胞系,發(fā)現(xiàn)青藤堿可以通過(guò)抑制NF-KB信號(hào)通路,因而使多藥耐藥-1基因和COX-2的表達(dá)得到抑制,從而提高藥耐藥性的結(jié)腸癌Caco-2細(xì)胞系對(duì)柔比星的敏感性。這個(gè)研究成果為解決癌癥治療時(shí)腫瘤多藥耐藥性現(xiàn)象提供了新的臨床思路。
3 結(jié)語(yǔ)
青藤堿通過(guò)口服和肌內(nèi)注射,進(jìn)行局部抗炎和鎮(zhèn)痛等治療。目前投入臨床使用的有正清風(fēng)痛寧片、緩釋片、鹽酸青藤堿注射液、毛青藤總堿片等制劑用于治療類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎及心律失常,取得非常不錯(cuò)的療效,為臨床用藥提供了一種新的治療思路,并且噴劑等已經(jīng)處于研發(fā)模式。近些年還有用于治療慢性腎炎、強(qiáng)直性脊柱炎、骨質(zhì)增生、心腦血管疾病、戒毒等多種研究報(bào)道,都取得了不錯(cuò)的療效。由于青藤堿對(duì)各類型腫瘤均有良好的抑制作用且效果顯著,以及它良好的抗多藥耐藥性,近年來(lái)已經(jīng)成為研究的熱點(diǎn),抗MDR作用機(jī)理可能是通過(guò)抑制COX-2和VEGF的的表達(dá)和抑制腫瘤細(xì)胞的生長(zhǎng)、抑制細(xì)胞繁殖來(lái)實(shí)現(xiàn)的,其涉及P13K/Akt、MEK/ERK和MAPK等多種信號(hào)通路;直接或間接影響轉(zhuǎn)錄因子家族(Fork-head、NF-KB、P53等)發(fā)揮細(xì)胞存活調(diào)控作用;促使細(xì)胞凋亡的啟動(dòng)者和效應(yīng)者Caspase-9活化,有效抑制凋亡抑制基因Survivin表達(dá),促進(jìn)細(xì)胞凋亡等。但其對(duì)腫瘤抑制作用的機(jī)制還不明確,其起始作用位點(diǎn)是什么、是否有其他路徑、作用靶點(diǎn)是什么等還需要進(jìn)一步研究。
參考文獻(xiàn)
[1] Lv Y, Li C, Li S, Hao Z. Sinomenine inhibits proliferation of SGC-7901 gastric adenocarcinoma cells via suppression of cyclooxygenase-2 expression[J]. Oncology letters. 2011;2(4):741-745.
[2] Liao F, Yang Z, Lu X, Guo X, Dong W. Sinomenine sensitizes gastric cancer cells to 5-fluorouracil in vitro and in vivo. Oncology letters[J]. 2013;6(6):1604-1610.
[3] Hong Y, Yang J, Shen X, Zhu H, Sun X, Wen X, et al. Sinomenine hydrochloride enhancement of the inhibitory effects of anti-transferrin receptor antibody-dependent on the COX-2 pathway in human hepatoma cells[J]. Cancer Immunology, Immunotherapy. 2013;62(3):447-454.
[4] 何晶晶. 青藤堿對(duì)人肝癌細(xì)胞HepG2侵襲和轉(zhuǎn)移能力的影響[D]. 蘭州大學(xué). 2012.
[5] 姜廷樞, 李勝岐等. 青藤堿對(duì)肺腺癌細(xì)胞系A(chǔ)549增殖和凋亡的影響[J]. 中國(guó)老年學(xué)雜志. 2010;(05):3-8.
[6] Zhou L, Luan H, Liu Q, Jiang T, Liang H, Dong X, et al. Activation of PI3K/Akt and ERK signaling pathways antagonized sinomenine-induced lung cancer cell apoptosis[J]. Molecular medicine reports. 2012;5(5):1256-1260.
[7] 施榮東等. 青藤堿聯(lián)合順鉑對(duì)人宮頸癌Hela細(xì)胞增殖作用的影響[J]. 中國(guó)藥物與臨床. 2010:3.
[8] 童向民, 姚航平. 青藤堿對(duì)K562和PC-3細(xì)胞COX-2和NF-kB表達(dá)的抑制作用. 浙江省醫(yī)學(xué)會(huì)心身醫(yī)學(xué)分會(huì)第七屆全國(guó)血液免疫學(xué)學(xué)術(shù)大會(huì)暨2008年浙江省血液病學(xué)術(shù)年會(huì)論文匯編. 2008:1.
[9]Liu Z, Duan Z-J, Chang J-Y, Zhang Z-f, Chu R, Li Y-L, et al. Sinomenine sensitizes multidrug-resistant colon cancer cells (Caco-2) to doxorubicin by downregulation of MDR-1 expression[J]. PloS one. 2014;9(6):e98560.
作者簡(jiǎn)介:陳丹娜(1983-),女,博士,副教授,研究方向:細(xì)胞增殖與凋亡。