高效液相色譜法在中藥真?zhèn)舞b別中的應(yīng)用

代 根

（眉山市食品藥品檢驗(yàn)檢測(cè)中心，四川 眉山 620000）

高效液相色譜法在中藥真?zhèn)舞b別中的應(yīng)用

代 根

（眉山市食品藥品檢驗(yàn)檢測(cè)中心，四川 眉山 620000）

目的 探討高效液相色譜在人參、黃芪、當(dāng)歸三種中藥鑒別真?zhèn)沃械淖饔?。方?選取我院2016年采購(gòu)的人參、黃芪和當(dāng)歸，隨機(jī)抽樣法收取60份樣本，按照鑒別方法分組為性狀鑒別組和高效液相色譜組，性狀鑒別組通過(guò)人參、黃芪、當(dāng)歸的性狀進(jìn)行鑒別，而高效液相色譜組則是更具《中國(guó)藥典》進(jìn)行高效液相色譜進(jìn)行鑒別，對(duì)兩組鑒別的偽品率進(jìn)行對(duì)比，并將偽品與常見(jiàn)偽品進(jìn)行高效液相色譜鑒定。結(jié)果 ①性狀鑒別組人參的偽品率為1.6%、黃芪的偽品率為3.3%、當(dāng)歸的偽品率為1.6%。高效液相色譜組的人參的偽品率為11.7%、黃芪的偽品率為15%、當(dāng)歸的偽品率為13.3%。兩組存在差異。②人參7個(gè)的偽品為三七，黃芪9個(gè)偽品為甘草，當(dāng)歸8個(gè)偽品為東當(dāng)歸。結(jié)論 高效液相色譜在鑒別人參、黃芪、當(dāng)歸的準(zhǔn)確性上要優(yōu)于性狀鑒別。

高效液相色譜法，中藥，鑒別

中藥對(duì)于中醫(yī)而是與疾病戰(zhàn)斗的武器，中藥的真?zhèn)螌?duì)對(duì)于治療而言是至關(guān)重要的，偽品若在治療中使用，則會(huì)延誤或?qū)е虏∏榈膼夯痆1]。由此可見(jiàn)對(duì)與中藥真?zhèn)蔚蔫b別是十分有意義的。對(duì)于中藥的鑒別目前使用的方法較多，每種方法都有其特點(diǎn)和操作方法，鑒別方法也有針對(duì)的中藥和范圍，在操作起來(lái)會(huì)顯得過(guò)程繁瑣。中藥指紋圖譜可以全面的反應(yīng)中藥中化學(xué)成分和特征[2]。而到中藥的真?zhèn)挝粗獣r(shí)可以通過(guò)中藥指紋圖譜進(jìn)行鑒別和區(qū)分。本研究采用高效液相色譜對(duì)人參、黃芪、當(dāng)歸三種中藥進(jìn)行鑒別，觀察高效液相色譜在鑒別中藥真?zhèn)沃械淖饔茫F(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 樣品選擇

樣品來(lái)源于2016年于中藥交易商采購(gòu)的人參、黃芪和當(dāng)歸的樣品，選擇10個(gè)藥商樣本，樣本的采用隨機(jī)抽樣的方法抽取樣本量，每次抽樣6份樣本量。運(yùn)用對(duì)照性研究的方法，分為性狀鑒別組和高效液相色譜組。樣本60份均在兩個(gè)組進(jìn)行鑒別。

1.2 樣品制備

根據(jù)《中國(guó)藥典》中人參、黃芪、當(dāng)歸相關(guān)制備方法進(jìn)行制備。本研究使用設(shè)備均為同一設(shè)備，在使用前均做污染物處理，試劑均為化學(xué)純。見(jiàn)表1。

1.3 高效液相色譜相關(guān)參數(shù)

本研究使用的高效液相色譜儀為安捷倫公司生產(chǎn)的。在使用前均采用三種中藥的標(biāo)準(zhǔn)液對(duì)儀器的準(zhǔn)確度進(jìn)行效正。高效液相色譜儀的參數(shù)。見(jiàn)表2。

表1 樣品制備表

表2 高效液相色譜相關(guān)參數(shù)

1.4 真?zhèn)舞b別標(biāo)準(zhǔn)

根據(jù)與標(biāo)準(zhǔn)品對(duì)照觀察樣品的特征吸收峰和保留時(shí)間來(lái)判定人參、黃芪、當(dāng)歸的真?zhèn)?。無(wú)相關(guān)特征吸收峰和保留時(shí)間大于±5%則為偽品。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS 19.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行分析，計(jì)數(shù)資料采用x2檢驗(yàn)；以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1 兩組偽品鑒別

通過(guò)人參、黃芪、當(dāng)歸每個(gè)中藥60樣本的測(cè)定，鑒別結(jié)果顯示。性狀鑒別組人參的偽品率1.6%、黃芪的偽品率3.3%、當(dāng)歸的偽品率1.6%。高效液相色譜組的詳見(jiàn)表三人參的偽品率11.7%、黃芪的偽品率15%、當(dāng)歸的偽品率為13.3%。通過(guò)卡方檢驗(yàn)兩組間存在差異。將高效液相色譜組在進(jìn)行高效液相色譜與常見(jiàn)偽品樣品進(jìn)行鑒定，顯示人參7個(gè)的偽品為三七，黃芪9個(gè)偽品為甘草，當(dāng)歸8個(gè)偽品為東當(dāng)歸。說(shuō)明高效液相色譜對(duì)于中藥的鑒別準(zhǔn)確性要優(yōu)于性狀鑒別法。差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。見(jiàn)表3。

表3 兩組偽品鑒別結(jié)果（n，%）

2.2 重復(fù)性檢驗(yàn)結(jié)果

上述研究結(jié)果均有兩位本科室工作年限長(zhǎng)熟悉相關(guān)工作的藥師分別完成。將兩位藥師換組進(jìn)行鑒別結(jié)果如下：高效液相色譜組鑒別結(jié)果與以上相同。性狀鑒別組的偽品率為人參的偽品率為3.3%、黃芪的偽品率為3.3%、當(dāng)歸的偽品率為1.6%，組內(nèi)統(tǒng)計(jì)卡方檢驗(yàn)為顯著性差異，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。但5個(gè)樣品得到真?zhèn)尾煌慕Y(jié)果。說(shuō)明高效液相色譜鑒別一致性好，性狀鑒別會(huì)因操作人員不一樣而存在不同結(jié)果。

3 討 論

中藥因?yàn)榉N類繁多，且同屬植物藥在性狀上的相似性高，導(dǎo)致不法商販在售賣的重要中參雜偽品。性別鑒別是最為傳統(tǒng)的鑒別中藥真?zhèn)蔚姆椒?，性別鑒別的準(zhǔn)確性往往因人而異，是一種不穩(wěn)定性高的個(gè)人經(jīng)驗(yàn)總結(jié)。但是不可忽略的是性狀鑒別在大量鑒別中其的方便性。在醫(yī)院接受治療的患者往往病情嚴(yán)重，接受偽品治療可能導(dǎo)致病情延誤，導(dǎo)致患者錯(cuò)過(guò)最佳的治療時(shí)間，甚至導(dǎo)致患者因偽品出現(xiàn)的病情加重。所以院內(nèi)需要一種更為準(zhǔn)確的科學(xué)的鑒別方法。本研究結(jié)果顯示高效液相色譜對(duì)于中藥的鑒別準(zhǔn)確性要優(yōu)于性狀鑒別法。評(píng)價(jià)鑒別方法的好壞不僅僅局限于研究的準(zhǔn)確性上，還需考慮操作的重復(fù)性，重復(fù)性的定義為不同的操作者或者在不同儀器上使用同樣的鑒別方案，結(jié)果的一致性高。研究結(jié)果顯示高效液相色譜鑒別一致性好，但是性狀鑒別會(huì)導(dǎo)致同一樣品真?zhèn)舞b別結(jié)果相反。

采用高效液相色譜人參、黃芪、當(dāng)歸顯示與評(píng)性狀鑒別存在差異，且高效液相色譜鑒別出來(lái)的偽品經(jīng)與常見(jiàn)偽品進(jìn)行對(duì)比，顯示準(zhǔn)確。高效液相色譜的應(yīng)用與中藥的指紋圖譜密不可分。中藥的指紋圖譜是不同中藥特有的。每種中藥都有其特征峰，因其的特異性，是高效液相色譜運(yùn)用到中藥真?zhèn)舞b別的基礎(chǔ)。本研究觀察到的結(jié)果為人參方面，偽品為三七，均為五加科植物。但是兩組中藥的療效不同，人參主要作用為補(bǔ)氣而三七為止血，參雜偽品對(duì)與患者而言是不利的，程道海，等研究顯示可將三七和人參通過(guò)高效液相色譜進(jìn)行鑒別。此外黃芪和甘草在有效成分黃芪皂苷的含量上是有差異的。以次充好無(wú)疑對(duì)治療效果有影響。兩藥物均屬蝶形花科，同科植物運(yùn)用性狀鑒別難度大，通過(guò)有效成分在指紋圖譜上的差異可以對(duì)兩種藥物進(jìn)行鑒別。普遍認(rèn)為東當(dāng)歸的質(zhì)量要低于當(dāng)歸，原因在與東當(dāng)歸中揮發(fā)油成分要明顯的低于當(dāng)歸。通過(guò)浸泡法對(duì)當(dāng)歸中的揮發(fā)油進(jìn)行提取保證了有效成分。王翰華等研究顯示，兩種中藥的相似程度高，阿魏酸的特征峰是鑒別兩種中藥的關(guān)鍵，因?yàn)楫?dāng)歸中阿魏酸的含量高，而東當(dāng)歸中的阿魏酸含量較低。

中藥真?zhèn)舞b別是保證患者療效的基石，為避免患者使用以次充好的中藥材，采用高效液相色譜的方法，可以提高中藥鑒別的準(zhǔn)確性。但是本研究不足的地方在于僅研究了三個(gè)常用中藥，并不能準(zhǔn)確的反應(yīng)高效液相色譜在總體中藥真?zhèn)舞b別中的作用，期待更多的研究出現(xiàn)。

[1] 于海杰.探討中藥枳實(shí)真?zhèn)蝺?yōu)劣的鑒定方法[J].中國(guó)醫(yī)藥指南, 2016(4):184-185.

[2] 滕會(huì)會(huì),杜守穎,白 潔,等.基于中藥指紋圖譜結(jié)合化學(xué)模式識(shí)別的清開靈軟/硬膠囊的成分分析[J].環(huán)球中醫(yī)藥,2016,9(6): 671-677.

本文編輯：趙小龍

R927

B

ISSN.2095-8242.2017.21.3975.02