羅俊霞，賈 冬，范 知，趙建波

（1.鄭州市農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量檢測流通中心，河南 鄭州 450006；2.鄭州市農(nóng)業(yè)信息中心，河南 鄭州 450006 ；3.鄭州市園藝工作站，河南 鄭州 450006）

隨著社會的發(fā)展和生活水平的提高，人們對食品安全品質(zhì)的要求越來越高。為此，國家在2002年啟動了無公害農(nóng)產(chǎn)品行動計劃，從中央到地方，各地紛紛成立了農(nóng)產(chǎn)品檢測機構，加強對農(nóng)產(chǎn)品的檢測監(jiān)管；同時，為了保障各檢測機構出具檢測結果的可靠性，各級農(nóng)業(yè)部門及認監(jiān)委都加大了對檢測機構的考核力度，對各機構的檢測能力進行檢測能力驗證。目前，蔬菜水果中農(nóng)藥殘留的檢測，多數(shù)檢測人員都沿用農(nóng)業(yè)部的方法[1]來進行處理，但是要想將檢測結果做到準確，順利通過各級的能力驗證，需要在檢測過程中把握幾個關鍵步驟，做好質(zhì)量控制。筆者長期從事農(nóng)產(chǎn)品中農(nóng)藥殘留的檢測工作，結合歷年來在農(nóng)業(yè)部、河南省的檢測能力驗證中遇到的問題，總結出幾點注意事項，以期對檢測工作者有所幫助。

1 造成檢測結果出現(xiàn)誤差的因素

1.1 人為造成的誤差

檢測人員的技術和素質(zhì)是影響檢測質(zhì)量的重要因素。檢測人員在檢測的過程中，出現(xiàn)操作誤差的情況是常有的。不同人員在前處理、上機或判斷上存在一定的差異。所以，如果操作人員未能嚴格按照相關的規(guī)范進行執(zhí)行的話，很容易導致檢測結果出現(xiàn)誤差。另外，在很大程度上還與工作人員的工作態(tài)度以及熟練度有關。

1.2 前處理過程中的誤差

檢測結果的可靠與否跟前處理的過程息息相關，譬如前處理過程中使用的器具如果沒有清洗干凈，會對所檢測的樣品造成污染，導致定量誤差或?qū)Χㄐ栽斐筛蓴_，而定性錯誤；如果前處理過程中所使用的量器不精密，則會造成測定結果出現(xiàn)較大的定量誤差，從而對測定結果造成較大的影響。

1.3 上機測定過程中的錯誤或者誤差

儀器和設備是影響測定結果的重要因素。儀器和設備的穩(wěn)定和規(guī)范是檢測結果質(zhì)量保證的關鍵，因此在農(nóng)藥殘留的測定過程中要重視儀器設備的維護和保養(yǎng)，保證儀器設備在檢測過程中處于最佳狀態(tài)，保證檢測結果的可靠性。

2 提高蔬菜農(nóng)藥殘留檢測過程中質(zhì)量控制的關鍵環(huán)節(jié)和應該采取的措施

2.1 加強檢測隊伍素質(zhì)建設，不斷提高檢測質(zhì)量

為了更好地確保實驗分析過程中的準確度，應該對檢測人員進行必要的培訓，同時應該明確檢測人員的職責，提升檢測人員的檢測能力。同時，檢測人員應嚴格要求自己，及時更新專業(yè)知識，提高檢測業(yè)務水平。做到人員精、素質(zhì)高、能力強，提高檢測人員的綜合能力。

2.2 做好前處理中質(zhì)量的控制，避免樣品被污染

2.2.1 玻璃器皿等前處理器具的清洗

前處理過程中使用的所有的玻璃器皿，包括均質(zhì)機的刀頭的清洗非常重要，其直接影響著檢測結果的準確與否，如果這些玻璃器皿清洗不干凈，則會導致檢測結果定性的錯誤和定量的不準確。而在生物學試驗中所使用的玻璃器皿或者塑料器皿清潔與否直接影響試驗結果的準確性，如果器皿被污染或者不干凈，會導致較大的試驗誤差，甚至會出現(xiàn)相反的試驗結果，導致試驗失敗[2-3]，所以在試驗之前必須保證玻璃器皿清洗干凈，根據(jù)不同的測定內(nèi)容選取不同的清洗方法，在進行蔬菜中農(nóng)藥殘留的測定時，最好在試驗之前用有機溶劑將所用的玻璃器皿進行清洗之后烘干或者晾干[4-5]。

2.2.2 玻璃器皿的選取與校正

實驗室使用的移液管、滴定管和容量瓶等精密量器，可以分為A級和B級，其中A級的準確度比B級高，表1是滴定管計量要求[6]。

由表1知，在前處理過程中使用A級的移液管、容量瓶等精密的量器，對最終的檢測結果造成的誤差最小。但是，玻璃器皿在使用時間較長之后，可能會造成其精密度下降，所以，在進行樣品前處理之前要對這些精密量器進行校正，選取準確度較高的量器進行定容和量取液體。

2.3 上機測定

2.3.1 樣品定性

有條件的單位如果有液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀和氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀，可以在對樣品進行提取之后對較小體積樣品用液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀或者氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀進行準確定性，否則可以購買DB-5（VF-5）系列弱極性的毛細色譜柱和DB-17（DB1701；VF-17）系列中等極性的毛細管色譜柱，用雙柱進行定性，以免造成定性錯誤。

在用電子捕獲檢測器（ECD）檢測菊酯類農(nóng)藥殘留時，氰戊菊酯和氟氨氰菊酯分別都是2個色譜峰，在VF-5色譜柱上，氟氨氰菊酯的第1個色譜峰在氰戊菊酯的2個色譜峰之間，第2個色譜峰和氰戊菊酯的第2個色譜峰幾乎是重疊的；而在VF-17色譜柱上，則這2種物質(zhì)的分離效果較好。2種物質(zhì)在VF-5和VF-17色譜柱上的色譜圖見圖1～2。

由圖1知，氰戊菊酯在VF-5的色譜柱上的保留時間分別為13.405 min和13.979 min，氟氨氰菊酯在VF-5色譜柱上的保留時間分別為13.763 min和13.986 min，氟氨氰菊酯的第1個色譜峰在氰戊菊酯的2個色譜峰之間，而氟氨氰菊酯的第2個色譜峰同氰戊菊酯的第2個色譜峰分不開，幾乎完全重疊；由圖2知，在VF17色譜柱上氰戊菊酯和氟氨氰菊酯的保留時間分別為13.316 min和13.830 min、12.119 min和12.304 min，2種物質(zhì)在VF-17色譜柱上可以完全分離，所以用VF-17色譜柱對這兩種物質(zhì)進行定量，可以避免氟氨氰菊酯和氰戊菊酯疊加造成的定量上的誤差。

電子捕獲檢測器是一個半通用型的檢測器[7]，很多有機磷類的物質(zhì)在電子捕獲檢測器上面都有響應，比如毒死蜱，在農(nóng)業(yè)行業(yè)標準[1]里毒死蜱是用火焰光度檢測器進行測定的，但毒死蜱在電子捕獲檢測器上也有響應，很多文獻都有用電子捕獲檢測器進行毒死蜱測定的報道[8-11]，而毒死蜱和三唑酮在VF-17上的色譜柱是分不開的，如果在電子捕獲檢測器上用中等極性的色譜柱（VF-17）對三唑酮進行定量，樣品里如果同時含有毒死蜱就會對三唑酮的定量造成誤差。毒死蜱和三唑酮在VF-17色譜柱、電子捕獲檢測器上的色譜圖見圖3。由圖3可知，毒死蜱、三唑酮在VF-17色譜柱上的保留時間分別是6.44 min、6.41 min，二者完全分不開。所以，如果用中等極性的色譜柱、電子捕獲檢測器檢出了三唑酮，一定要慎重對待。

表1 滴定管計量要求

圖1 氰戊菊酯和氟氨氰菊酯在VF-5的色譜柱、電子捕獲檢測器上的色譜

圖2 氰戊菊酯和氟氨氰菊酯在VF-17色譜柱、電子捕獲檢測器上的色譜

2.3.2 上機時進樣口襯管的選擇和處理

各個廠家的進樣口襯管都有很多種不同的型號，除了襯管的外形不同決定了襯管的型號不同之外，襯管是否經(jīng)惰性化處理是決定定量結果準確與否的重要因素，因為惰性化處理的襯管對農(nóng)藥不會有吸附作用，所以用這種襯管定量農(nóng)藥，誤差不會太大。而硅烷化處理的襯管在使用之后一般都要用各種水、丙酮、乙腈等溶劑進行逐步清洗，清洗的次數(shù)越多越干凈，則襯管里面的活性點位越多，對農(nóng)藥的吸附越大，造成通過色譜柱進入檢測器的農(nóng)藥的量相對減少，以至于對其定量造成較大誤差，誤差較大的農(nóng)藥主要有甲胺磷、氧化樂果等分子量較小的農(nóng)藥。

對于沒有經(jīng)硅烷化處理的襯管，在進行檢測時一般用比較干凈的樣品，也就是說用沒有檢出農(nóng)藥的樣品基質(zhì)來飽和襯管上的活性點位，以消除襯管對農(nóng)藥的吸附。一般用番茄、黃瓜、辣椒、西葫蘆等沒有檢出農(nóng)藥的樣品基質(zhì)，在儀器穩(wěn)定好之后，進10針左右的這樣的樣品。具體進針的次數(shù)根據(jù)自己的經(jīng)驗用氧化樂果或者甲胺磷的峰高來進行判斷，待氧化樂果、甲胺磷的峰高恢復正常再測定待檢樣品。

2.3.3 充分考慮基質(zhì)對農(nóng)藥殘留定量的影響

在基質(zhì)對有機磷農(nóng)藥殘留檢測結果的影響方面，黃寶勇等[12-20]做了大量的研究，不同的蔬菜基質(zhì)對同一種農(nóng)藥殘留定量的影響是不同的，在相同的蔬菜基質(zhì)中不同的農(nóng)藥的基質(zhì)效應也不一樣，同時，相同的農(nóng)藥，相同的基質(zhì)，其濃度的大小不同其基質(zhì)效應也有可能不同[13-15]，那么為了消除基質(zhì)對農(nóng)藥殘留定量的影響，在進行蔬菜中農(nóng)藥殘留的測定時，最好用對應的相對干凈的樣品基質(zhì)進行標準品的配置。2.3.4 制備相近濃度的陽性添加樣品，進行檢測結果校正

圖3 三唑酮和毒死蜱在VF-17色譜柱、電子捕獲檢測器上的色譜

質(zhì)量控制是對檢測定量結果進行控制的關鍵[21-25]，添加陽性樣品、計算添加回收率，由此對檢測結果進行校正是保證檢測結果準確可靠的一個關鍵步驟[26]，這也是每一位檢測工作者在日常的檢測工作中所應該注意的一個細節(jié)。尤其是在測定能力驗證的樣品時，先對樣品進行粗略的定量，根據(jù)這個量進行陽性樣品的制備，再根據(jù)陽性樣品的添加量和實際測定量計算出添加回收率，由此對樣品的測定值進行校正，保證了檢測結果的準確、可靠。

3 小結

在進行蔬菜農(nóng)藥殘留測定的過程中，要想得到準確可靠的檢測結果，檢測人員必須有嚴謹?shù)闹螌W態(tài)度和高度的思想覺悟，認識到檢測分析工作的重要性，同時還要熟練掌握質(zhì)量控制的各種方法，檢測過程中所應注意的關鍵環(huán)節(jié)也應該了然于胸，并在檢測工作中不斷分析和總結，做好質(zhì)量控制，把握關鍵步驟，提高檢測分析工作的質(zhì)量，使分析結果準確、有效。此外，由于實驗室內(nèi)部的操作條件對檢測結果也有一定的影響，因此實驗室內(nèi)一定要保持整潔、封閉，同時加強通風、防火，預防化學試劑爆炸等事故的發(fā)生。

[1]蔬菜和水果中有機磷、有機氯、擬除蟲菊酯和氨基甲酸酯類農(nóng)藥多殘留檢測方法,中華人民共和國農(nóng)業(yè)行業(yè)標準:NY/T 761-2008:2008[S/OL].[2017-02-06].http://www.csres.com/detail/191872.html.

[2]謝振華,蔡國平.生物實驗的玻璃和塑料器皿的綠色環(huán)保清洗方法[J].生物學雜志,2006,23(5):51.

[3]紀朋艷,朱辛為,孫艷美.實驗室玻璃器皿管理之淺見[J].衛(wèi)生職業(yè)教育,2008,26(6):119-120.

[4]劉珍.化驗員讀本(上冊)[M].北京:化學工業(yè)出版社,2003:12.

[5]王敏,魯魏,薛娜娜,等.玻璃器皿的洗滌[J].廣東化工,2013,40(20):108-109.

[6]滴定管計量要求一覽表[EB/OL]. (2009-05-08)[2017-02-06].http://www.docin.com/p-1036996871.html.

[7]劉虎威.氣相色譜方法及應用[M].北京:化學工業(yè)出版社,2000:10.

[8]劉騰飛,鄧金花,楊代鳳,等.氣相色譜法同時檢測青菜中毒死蜱和氯氰菊酯殘留量的方法研究[J].農(nóng)學學報,2013,3(11):5-9,29.

[9]沈燕,劉美娟,劉賢進,等.溶劑對毒死蜱、甲氰菊酯和溴氰菊酯在電子捕獲檢測器上響應的影響[J].江蘇農(nóng)業(yè)科學,2011,39(6):475-477,478.

[10]劉騰飛,顧俊榮,鄧金花,等.氣相色譜電子捕獲檢測器測定蘇州青中毒死蜱殘留[J].江蘇農(nóng)業(yè)科學,2014,42(2):243-245.

[11]李艷芳,羅華建,葉瑜霏,等.氣相色譜-電子捕獲檢測器檢測白菜中有機磷、苯基吡唑、煙堿類農(nóng)藥殘留[J].廣東農(nóng)業(yè)科學,2010,37(11):248-251.

[12]黃寶勇.果蔬中農(nóng)藥殘留的氣相色譜-質(zhì)譜法與基質(zhì)效應的研究[D].北京:中國農(nóng)業(yè)大學,2005.

[13]羅俊霞,符建偉,王毅紅,等.氣相色譜火焰光度檢測器測定蔬菜中多種有機磷農(nóng)藥殘留的基質(zhì)效應[J].河南農(nóng)業(yè)大學學報,2013,47(2):192-196,205.

[14]羅俊霞,符建偉,李德瑜,等.14種有機磷農(nóng)藥在9種蔬菜基質(zhì)中的基質(zhì)效應研究[J].湖北農(nóng)業(yè)科學,2013,52(23):5858-5862.

[15]羅俊霞,王毅紅,岳鳳麗.9種蔬菜基質(zhì)中14種有機磷農(nóng)藥殘留的基質(zhì)效應的比較[J].中國瓜菜,2013(1):17-22.

[16]楊旭,湯佳峰,巢文君.基質(zhì)效應對有機磷農(nóng)藥測定的影響及解決方法[J].分析測試學報,2009,28(12):1368-1372.

[17]劉莉,羅軍.基質(zhì)效應對氣相色譜分析有機磷農(nóng)藥殘留的影響和解決方法[J].江西農(nóng)業(yè)學報,2009,21(7):146-148.

[18]賀利民,劉祥國,曾振靈.氣相色譜分析農(nóng)藥殘留的基質(zhì)效應及解決方法[J].色譜,2008,26(1):98-104.

[19]金銓,丁華,欒麗娃,等.基質(zhì)對氣相色譜法檢測蔬菜中有機磷農(nóng)藥的影響[J].中國衛(wèi)生檢驗雜志,2008,18(4):637-638,694.

[20]歐菊芳.蔬菜中農(nóng)藥多殘留氣相色譜-質(zhì)譜法測定中的基質(zhì)效應研究[D].北京:中國農(nóng)業(yè)科學院研究生院,2008.

[21]黃勇.分析水質(zhì)化驗分析中的質(zhì)量控制措施[J].科技風,2015(24):89.

[22]楚江妹.探討我國水質(zhì)化驗分析中的質(zhì)量控制措施[J].山西化工,2016(2):104-106.

[23]張曉娟.水質(zhì)化驗分析中的質(zhì)量控制[J].山西化工,2016,36(2):77-79.

[24]孔玲.試論水質(zhì)分析中的質(zhì)量控制[J].河北建筑工程學院學報,2014,32(1):52-54.

[25]林黎.淺談如何提高土壤化驗分析結果準確度[J].福建農(nóng)業(yè),2013(9):10-11.

[26]張琰,金雅慧,周鋒杰.蔬菜農(nóng)藥殘留檢測過程的質(zhì)量控制探討[J].農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量與安全,2014(5):44-46.