“慢呼寧”口服液對雞安全性的試驗研究

王貴波 郭妮妮 謝家聲 趙小龍 羅超應 羅永江 鄭繼方 辛蕊華 李錦宇

摘要：為了在對“慢呼寧”口服液的安全性進行評價，為臨床用藥提供安全依據(jù)，選取120羽14日齡的三黃肉雞，適應性飼喂1周后，隨機分為治療劑量的1倍劑量組、3倍劑量組、5倍劑量組和對照組，每組30羽。試驗時分別按照每組試驗雞的平均體質(zhì)量給予不同劑量的藥物，連續(xù)給藥1周。在試驗前和試驗結束時，各組隨機選取10只進行稱質(zhì)量和采血，測定體質(zhì)量變化、血常規(guī)和肝腎功能指標，測定臟器指數(shù)，并對雞的心、肝、脾、肺和腎臟進行病理檢查。結果表明，用藥后各組雞的體質(zhì)量增加量及臟器指數(shù)組間差異不顯著（P>0.05）。血常規(guī)指標則在試驗前后組間差異亦不顯著（P>0.05）；血清ALT活性、白蛋白、肌酐和尿素含量組間差異不顯著（P>0.05）；在用藥后，各組雞的心、肝、脾、肺和腎臟組織變化均無顯著差異和異常。結果表明，“慢呼寧”口服液對雞生理生化指標的影響小，病理剖檢未見對心、肝、脾、肺和腎臟產(chǎn)生毒性作用，是一種低毒安全的中獸藥制劑。

關鍵詞：“慢呼寧”口服液；中獸藥；呼吸道疾??；雞；安全性評價

中圖分類號： S858.31文獻標志碼： A

文章編號：1002-1302（2017）11-0114-03[HS）][HT9.SS]

隨著雞群養(yǎng)殖集約化程度越來越高，雞的呼吸道疾病成為當前養(yǎng)雞業(yè)中具有嚴重危害的一類疾病，由此造成了巨大的經(jīng)濟損失，而且還影響了相關產(chǎn)品的品質(zhì)。目前，雞的呼吸道疾病在治療上多采用疫苗緊急免疫或西藥治療，而疫苗免疫具有免疫失敗的潛在危險性，西藥治療又極易產(chǎn)生細菌耐藥性，中藥防治為此提供了必要的補充，又符合當前人們對畜產(chǎn)品安全性的需求。“慢呼寧”口服液是由中國農(nóng)業(yè)科學院蘭州畜牧與獸藥研究所研發(fā)，針對雞慢性呼吸道病而開發(fā)的新型中獸藥制劑，具有調(diào)節(jié)雞體免疫力和抗菌消炎等功效。為對“慢呼寧”口服液的安全性進行評價，作為臨床用藥的安全依據(jù)，開展此項研究。

1材料與方法

1.1材料

1.1.1試驗用藥“慢呼寧”口服液（批號：2011062402），由中國農(nóng)業(yè)科學院中獸醫(yī)研究所藥廠生產(chǎn)，主要由金銀花、連翹等中藥組成，具有辛涼透邪、清熱解毒的功效，可用于治療雞的慢性呼吸道病。

1.1.2儀器及試劑邁瑞B(yǎng)S-420型全自動生化分析儀，由深圳邁瑞生物醫(yī)療電子股份有限公司生產(chǎn)；AUW120D電子天平，由日本島津公司生產(chǎn)；LEICA RM2025型組織切片機、LEICA TP1020型組織脫水機，由德國Leica公司生產(chǎn)；CK-2型倒置顯微鏡，由日本Olympus公司生產(chǎn)；CELL-DYN3200[HJ1.4mm]血細胞分析儀，由美國雅培公司生產(chǎn)；天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶試劑盒（批號：140212018）、丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶試劑盒（批號：140112022）、白蛋白試劑盒（批號：140912017）、肌酐試劑盒（批號：141012017）和尿素試劑盒（批號：141212020），均由深圳邁瑞生物醫(yī)療電子股份有限公司生產(chǎn)。

1.1.3試驗動物120羽[JP2]14日齡三黃肉雞，購于蘭州市西固區(qū)聯(lián)合養(yǎng)雞公司，由中國農(nóng)業(yè)科學院蘭州畜牧與獸藥研究所標準化實驗動物房飼養(yǎng)，適應性飼喂1周。將雞隨機分為4組（每組30羽）：1倍劑量組、3倍劑量組、5倍劑量組和對照組。[JP][HJ][LM]

1.2試驗方法

1.2.1給藥方案1倍劑量組、3倍劑量組和5倍劑量組分別按照推薦劑量（按原藥材計0.50 g/kg體質(zhì)量）的1、3、5倍量，將藥物進行飲水飼喂，連續(xù)飼喂1周。對照組不給予任何藥物，進行正常飼喂。

1.2.2相關指標的觀察測定觀察試驗期間每天各組雞的健康狀況，包括活動、采食、飲水、發(fā)病和死亡等。在試驗雞21日齡時，隨機選取10羽，進行稱質(zhì)量，然后心臟采血和剖檢。試驗結束時各組剩余雞再隨機選取10羽重復上述操作。觀察剖檢雞的實質(zhì)性臟器有無眼觀病理變化，對心、肝、脾、肺、腎稱質(zhì)量并計算臟器指數(shù)（臟器濕質(zhì)量/體質(zhì)量×100%）并進行病理取材，于4%甲醛固定48 h后，做病理組織切片，經(jīng)HE染色后，進行顯微鏡觀察。

1.2.3血常規(guī)及血清生化指標的測定用血細胞分析儀進行血常規(guī)分析，主要測定白細胞（WBC）數(shù)、淋巴細胞百分比、單核細胞百分比、中性粒細胞百分比、紅細胞（RBC）數(shù)、血紅蛋白（HGB）含量、血小板（PLT）數(shù)。用邁瑞B(yǎng)S-420型全自動生化分析儀測定血清中肌酐含量、尿素含量、白蛋白（albumin，ALB）含量、天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（aspartate aminotransterase，AST）和丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（alanine aminotransferase，ALT）活性。

1.2.4數(shù)據(jù)統(tǒng)計數(shù)據(jù)用SPSS 14.0軟件進行方差分析，P<0.05 時，表示差異顯著；P<0.01時，表示差異極顯著。

2結果與分析

2.1“慢呼寧”口服液對雞體質(zhì)量的影響

2.3“慢呼寧”口服液對雞血常規(guī)指標的影響

由表3可見，用藥前，1倍劑量組雞的單核細胞百分比顯著低于對照組（P<0.05）；1倍劑量組和3倍劑量組雞的中性粒細胞百分比顯著低于對照組（P<0.05）；而紅細胞數(shù)量、白細胞數(shù)量、血紅蛋白含量、血小板數(shù)量和淋巴細胞百分比組間差異不顯著（P>0.05）。

2.5雞臟器病理剖檢結果

[JP+1]在用藥前及用藥7 d后，除對照組1羽雞在試驗過程中因應激發(fā)生死亡外，其余各組雞的心、肺、脾和腎臟均未表現(xiàn)差異。心臟均為圓錐體，顏色粉紅，心包膜及心包液透明；有結構完整閏盤，心肌纖維致密和肌纖維束分布均勻；細胞核和胞漿均勻；眼觀無明顯異常。肺臟均扁平呈長四邊形海綿狀，顏色粉紅，有結構完整、分布均勻、大小不等的肺泡；眼觀無明顯異常。脾臟如球體，顏色棕紅，脾束、脾血竇和小靜脈結構明顯，淋巴細胞均勻分布，皮質(zhì)、髓質(zhì)結構完整；眼觀無明顯異常。腎臟為紅褐色，呈長條狀，質(zhì)軟，腎小體、近曲小管和遠曲小管結構完整，腎小管密集，細胞核大小一致，分布均勻；眼觀無明顯異常。肝臟呈紅褐色，肝組織以肝細胞及中央靜脈為中心，呈放射狀排列，肝細胞呈梁索狀；眼觀無明顯異常。[JP]

3小結與討論

3.1“慢呼寧”口服液的毒副作用

“慢呼寧”口服液以金銀花和連翹為主要有效成分。與連翹相關的藥理作用研究和報道中，涉及的化學成分以連翹酯苷、連翹苷、連翹酚和揮發(fā)油類居多，這些成分臨床應用廣泛且療效確切，毒副作用低[1，3]。

方中金銀花具有抗病原微生物、抗炎、免疫調(diào)節(jié)和中樞興奮等作用。研究表明，金銀花的水浸液灌服對家兔、犬等無明顯的毒性，對呼吸、血壓和尿量均無影響，小鼠皮下注射金銀花浸膏的LD50為53 g/kg體質(zhì)量。報道表明，溶血作用均為其生曬品，其致敏作用也可在口服過程中被消化道的酶類所破壞[4]。

3.2“慢呼寧”口服液對雞生理生化指標的影響

將“慢呼寧”口服液對試驗組雞進行飲水飼喂后，對雞的體質(zhì)量增長無明顯影響，且與對照組雞相比有體質(zhì)量增長加快的趨勢。同時，該藥對雞的臟器指數(shù)亦無顯著影響。各組雞在用藥前，單核粒細胞數(shù)和中性粒細胞數(shù)雖然組間出現(xiàn)了差異；但用藥7 d后，組間的差異性反而消除了；而其他血常規(guī)指標則在試驗前后組間差異不顯著；從一定意義上說明了此方對機體的免疫調(diào)節(jié)作用[5-6]。在血清生化指標方面，ALT活性、AST活性和白蛋白作為綜合衡量肝功能的重要指標，在用藥7 d后，僅3倍劑量組雞的AST活性顯著低于對照組（P<0.05），結合ALT活性和白蛋白組間差異不顯著（P>0.05）及3倍劑量組肝臟病理剖檢的結果，不能說明藥物對雞的肝功能造成了影響；在試驗前后，各組間雞的血清尿素含量和肌酐含量差異不顯著，說明藥物對腎功能未造成影響[7]。試驗前后，根據(jù)獸醫(yī)組織學相關資料[8-9]，各組雞經(jīng)病理剖檢未見明顯的眼觀病變，而顯微鏡檢也未發(fā)現(xiàn)異常。

綜上所述，“慢呼寧”口服液是一種低毒安全的中獸藥制劑。

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