程澤華+高鵬程+甄鵬晨
近年來,由高脂造成的多種疾病困擾很多人,人們開始尋求可以緩解高脂膳食。荷葉出現(xiàn)在很多具有減肥降脂功能的中藥單復(fù)方制劑中,藥食同源,那么荷葉能否降脂呢?
材料與方法
試驗(yàn)原料及處理。荷葉原料,粉碎機(jī)粉碎,過80目篩子。
實(shí)驗(yàn)方法。
(1)膽酸鹽標(biāo)準(zhǔn)曲線
配制0.3 mmol/L的膽酸鈉、?;悄懰徕c和甘氨膽酸鈉溶液,做母液備用,取上述各溶液 0、0.1、0.5、1.0、1.5 、2.0和2.5 mL 到 10 mL 的容量瓶中,加入磷酸緩沖溶液至2.5 mL,再加入60%的硫酸溶液至10 mL,在水浴鍋中水浴 20 min后冰浴 5 min,在 387 nm 處測(cè)定吸光度。以膽酸鹽的濃度為橫坐標(biāo),吸光度值為縱坐標(biāo),繪制膽酸鹽的標(biāo)準(zhǔn)曲線。
(2)荷葉中的黃酮、生物堿與膽酸鹽結(jié)合能力的比較
①體外模擬內(nèi)環(huán)境及與膽酸鹽的結(jié)合的方法
取一定量的樣品,加入1 mL 0.01 mol/L的鹽酸溶液,在培養(yǎng)箱中消化1h,用氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)pH到6.3,然后加入 4 mL 10 mg/mL的胰酶,在培養(yǎng)箱中消化 1h。在各個(gè)樣品中分別加入4 mL 膽酸鹽溶液,用培養(yǎng)箱振蕩1h。轉(zhuǎn)入離心管中,離心20 min。取上清液膽酸鹽進(jìn)行分析。
②PVPP去除荷葉黃酮后與膽酸鹽的結(jié)合能力
分別稱取0、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0 g的PVPP,加入20 mL 荷葉浸提液,培養(yǎng)箱中振蕩 30 min,轉(zhuǎn)入離心管中,離心 20 min。取上清液進(jìn)行體外內(nèi)環(huán)境模擬與膽酸鹽的結(jié)合。
③石油醚去除荷葉生物堿后與膽酸鹽的結(jié)合能力
在荷葉浸提液中加入等量的石油醚,萃取1 h,收集萃取后的荷葉浸提液,重復(fù)三次得到一次、兩次和三次處理液。取 1 mL上述處理液進(jìn)行模擬與膽酸鹽的結(jié)合。
結(jié)果與分析
三種膽酸鹽的標(biāo)準(zhǔn)曲線回歸方程
膽酸鈉:y=11.80x+0.004 R2=0.998
?;悄懰徕c:y=17.66x+0.007 R2=0.997
甘氨膽酸鈉:y=15.62x+0.012 R2=0.997
荷葉中黃酮及生物堿與膽酸鹽結(jié)合能力比較的結(jié)果與分析。
(1)荷葉粉末、荷葉水浸提液與膽酸鹽的結(jié)合能力比較
荷葉粉末和荷葉水浸提液均能結(jié)合三種膽酸鈉,但是荷葉水浸提液的結(jié)合能力強(qiáng),荷葉具有一定降脂作用。
(2)PPVP去除荷葉黃酮后與膽酸鹽結(jié)合能力的影響
荷葉浸提液中黃酮含量越高,其結(jié)合膽酸鹽的能力越強(qiáng),黃酮會(huì)影響膽酸鹽在體內(nèi)的代謝,從而起到降脂的作用。
(3)石油醚去除荷葉生物堿后與膽酸鹽的結(jié)合能力
荷葉堿對(duì)荷葉浸提液結(jié)合膽酸鹽的能力具有一定的良性影響,但是沒有黃酮顯著。
荷葉提取物對(duì)脂肪酸合酶抑制率的研究。
(1)脂肪酶活性的測(cè)定
加入荷葉提取物的樣品耗堿量明顯減少,這證明了荷葉提取物對(duì)于脂肪酸合酶的活性是具備抑制作用的。
(2)荷葉黃酮與荷葉堿對(duì)脂肪酸合酶活性的影響
①PPVP去除荷葉黃酮后對(duì)脂肪酸合酶活性的影響
氫氧化鈉的消耗量隨著荷葉黃酮的量減少而增加,荷葉黃酮抑制脂肪酸合酶的活性,荷葉黃酮的量越多,對(duì)脂肪酸合酶活性的抑制能力越強(qiáng)。
②石油醚去除荷葉堿后對(duì)脂肪酸合酶活性的影響
經(jīng)過石油醚萃取的樣品的耗堿量低,可得荷葉生物堿影響脂肪酸合酶的活性。
研究表明荷葉黃酮是荷葉提取物具備降脂作用的主要因素,其機(jī)理為加強(qiáng)人體結(jié)合膽酸鹽的能力和抑制FAS的活性,荷葉生物堿對(duì)荷葉提取物的降脂作用也具備影響,但影響并不顯著。