付龍龍+周剛+李躍華+陸全平+潘建林

摘要：中華絨螯蟹1齡蟹種性早熟問題始終是困擾河蟹產(chǎn)業(yè)的頑疾，概述了1齡蟹種性早熟的判別、形成原因、內(nèi)分泌調(diào)控及生理生化等方面的研究成果，提出今后的研究方向是對(duì)單一誘因和多誘因復(fù)合作用的深層發(fā)生機(jī)制研究及性早熟蟹種與正常發(fā)育蟹種分子生物學(xué)研究。

關(guān)鍵詞：中華絨螯蟹；1齡蟹種；性早熟；誘因；發(fā)生機(jī)制；內(nèi)分泌調(diào)控；生理生化；研究進(jìn)展

中圖分類號(hào)： S966.16文獻(xiàn)標(biāo)志碼： A文章編號(hào)：1002-1302（2017）12-0019-05

中華絨螯蟹（Eriocheir sinensis）屬節(jié)肢動(dòng)物門甲殼綱十足目方蟹科絨螯蟹屬，別稱河蟹、大閘蟹，在我國(guó)主要分布于長(zhǎng)江水系、遼河水系、甌江水系三大淡水水系中，是我國(guó)淡水漁業(yè)的重要經(jīng)濟(jì)養(yǎng)殖品種。經(jīng)過近40年的發(fā)展，我國(guó)中華絨螯蟹從蟹苗繁育、蟹種培育、成蟹養(yǎng)殖、成蟹加工再到出口創(chuàng)匯形成了穩(wěn)固的產(chǎn)業(yè)鏈，已成為各地農(nóng)業(yè)增收、農(nóng)（漁）民致富的主要途徑之一。然而在蟹種培育環(huán)節(jié)，1齡蟹種性早熟問題始終是困擾中華絨螯蟹產(chǎn)業(yè)的頑疾，最大程度地降低蟹種性早熟比例是確保產(chǎn)量效益的關(guān)鍵之一。蟹種性早熟是指當(dāng)年個(gè)體較大（通常20 g以上）、性腺已發(fā)育成熟的蟹種，別稱老頭蟹。長(zhǎng)江流域自然水體當(dāng)年蟹種性早熟率為5%～10%，人工培育條件下，受溫度、營(yíng)養(yǎng)、鹽度等條件的影響，當(dāng)年蟹種性早熟率可達(dá)18.2%～98.0%[1]。用性早熟蟹種養(yǎng)殖成蟹，死亡率可達(dá)60%～90%[2]，因此性早熟蟹種不具備養(yǎng)殖成蟹的價(jià)值，但作為成蟹銷售則規(guī)格偏小，價(jià)值較低。對(duì)1齡蟹種性早熟的相關(guān)研究一直是廣大學(xué)者關(guān)注和重視的熱點(diǎn)問題，本試驗(yàn)就對(duì)蟹種性早熟的判別、形成原因、內(nèi)分泌調(diào)控及生理生化等方面的研究作一綜述。

1性早熟蟹種的判別

根據(jù)徐興川等的“五看識(shí)別法”判別性早熟蟹種：一看腹部。正常蟹種，不論雌雄，腹部狹長(zhǎng)且略呈三角形，性早熟雌蟹腹部變圓且周圍密生城毛。二看交接器。正常蟹種，交接器為軟管狀，性早熟雄蟹的交接器為堅(jiān)硬的骨質(zhì)化管狀體。三看絨毛。正常蟹種螯及步足的絨毛短且稀疏，性早熟蟹種絨毛長(zhǎng)、稠密且顏色較深。四看性腺。正常蟹種只見橘黃色的肝胰腺，性早熟雌蟹肝胰腺有2個(gè)紫色長(zhǎng)條狀物，即為卵巢，肉眼可看到卵粒，性早熟雄蟹肝胰腺有兩白色塊狀，即為精巢。五看顏色和蟹紋。正常蟹種頭胸甲背部顏色較淺，為黃色或夾雜少量淡綠色，其顏色在蟹種個(gè)體越小時(shí)越淡，背部較平坦，起伏不明顯，性早熟蟹種背部顏色較深，為綠色或墨綠色，背部凸凹不平，起伏明顯[2]。

2導(dǎo)致蟹種性早熟的幾大主因

目前國(guó)內(nèi)外學(xué)者對(duì)蟹種性早熟的真正發(fā)生機(jī)制尚不十分明確，普遍認(rèn)為水體積溫過高和營(yíng)養(yǎng)過剩是導(dǎo)致中華絨螯蟹發(fā)生性早熟的主要原因[3]。

2.1水溫

水溫是影響水生動(dòng)物生存、生長(zhǎng)、生殖、發(fā)育等的重要環(huán)境因素。通常在一定范圍內(nèi)，水溫越高，水生動(dòng)物新陳代謝越旺盛，性腺發(fā)育也越快，反之亦然。黃顯清等通過不同溫度對(duì)大型溞（水生甲殼動(dòng)物）生長(zhǎng)、生殖的影響發(fā)現(xiàn)，隨溫度升高，大型溞性成熟、產(chǎn)卵提前，生殖率加快。對(duì)蟹種而言，一定范圍內(nèi)的水溫升高能夠促進(jìn)其攝食及對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的轉(zhuǎn)化， 而推遲其性腺發(fā)育所需要的水體有效積溫尚未見報(bào)道[4]。對(duì)比長(zhǎng)江流域自然水體，甌江流域自然水體當(dāng)年蟹種性早熟率則大幅提高[1]。周炳元等通過對(duì)甌江水系中華絨螯蟹洄游種群調(diào)查發(fā)現(xiàn)，1984年10月23日至11月30日經(jīng)漁獲物分析主要為2秋齡種群，共 1 481 只，平均規(guī)格為93.1 g/只，此后主要為當(dāng)齡蟹種群，共2 182只，平均規(guī)格為55.1 g/只，其中當(dāng)齡蟹的生物量比例占46.6%，個(gè)體數(shù)占比59.6%，證明溫度能顯著促進(jìn)蟹種性早熟率上升[5]。王勇軍研究發(fā)現(xiàn)，幼蟹在6 ℃溫幅范圍內(nèi)每增加3 ℃，與對(duì)照組相比性早熟比率提高42%，但當(dāng)溫度每增加3 ℃，性早熟率就提高0.8%，基本保持穩(wěn)定[6]。徐如衛(wèi)等研究發(fā)現(xiàn)，在缺少水草的池塘中培育蟹種，會(huì)使水體溫度提高，以致積溫過高導(dǎo)致中華絨螯蟹性早熟[7]。杜曉燕等應(yīng)用正交試驗(yàn)法研究了積溫、營(yíng)養(yǎng)、品系3個(gè)因素對(duì)中華絨螯蟹性早熟的影響，證明積溫是導(dǎo)致蟹種性早熟的次要原因[8]。

2.2營(yíng)養(yǎng)

充足的營(yíng)養(yǎng)是中華絨螯蟹維持自身生存、生長(zhǎng)的首要因素，蛋白質(zhì)、脂類、碳水化合物、維生素及礦物質(zhì)等營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)是供給性腺發(fā)育的必要條件。生產(chǎn)實(shí)踐發(fā)現(xiàn)，人工培育下的蟹種性早熟比例通常比自然水體中高，這可能與人工投喂飼料營(yíng)養(yǎng)過精過剩有關(guān)。成永旭等認(rèn)為，飼料中過多的脂類可導(dǎo)致肝胰腺脂肪儲(chǔ)存含量升高，而肝胰腺脂肪儲(chǔ)存含量升高正是中華絨螯蟹蛻殼的前提保證，繼而導(dǎo)致蛻殼提前而性早熟；同時(shí)飼料中缺乏磷脂會(huì)顯著影響中華絨螯蟹體內(nèi)的脂肪轉(zhuǎn)運(yùn)及利用，導(dǎo)致中性脂在肝胰腺中大量堆積，導(dǎo)致蛻殼提前；另外缺乏磷脂還會(huì)導(dǎo)致蛋白質(zhì)利用率降低，導(dǎo)致過多蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)化為脂肪在肝胰腺中堆積，由此可見飼料中缺乏磷脂可能也是導(dǎo)致中華絨螯蟹性早熟的原因之一[3]。張列士等研究發(fā)現(xiàn)，在精養(yǎng)或半精養(yǎng)條件下，極易促使蟹種性早熟，半精養(yǎng)也能使蟹種長(zhǎng)成70～90 g/只的商品蟹，還能使蟹種從 18.2%～22%的常規(guī)性早熟率上升到67%～98%[1]。朱雅珠等研究發(fā)現(xiàn)，蟹種培育階段不宜投喂動(dòng)物蛋白含量過高的飼料，否則不僅會(huì)抑制其生長(zhǎng)，還會(huì)導(dǎo)致性早熟比例顯著升高[9]。何正侃等研究表明，對(duì)蟹種單純投喂植物性餌料性早熟比率為0，以此培育的蟹種規(guī)格?。?10 d平均體質(zhì)量 0.7 g/只）、體質(zhì)弱、活力差、成活率（83%）低，單純投喂動(dòng)物性餌料性早熟比率為16%，以此培育的蟹種規(guī)格大（110 d平均體質(zhì)量3.9 g/只）、體質(zhì)強(qiáng)、活力旺盛、成活率（93%）高；在一定范圍內(nèi)蟹種性早熟的比率會(huì)隨著大眼幼體放養(yǎng)密度的遞增而略有下降，但組間差異不顯著，這可能是因?yàn)樵谙嗤瑮l件下大眼幼體放養(yǎng)密度越低相對(duì)越能獲得更多的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，以使一部分蟹種營(yíng)養(yǎng)過剩導(dǎo)致性腺提前發(fā)育[10]。顧景齡等認(rèn)為，蟹種性早熟主要是由幼蟹增質(zhì)量過快、營(yíng)養(yǎng)配比不當(dāng)、蛻皮過頻造成的[11]。劉家駒通過人工培育幼蟹試驗(yàn)證明，餌料中缺少維生素C的添加會(huì)導(dǎo)致14%左右的雌性個(gè)體性早熟出現(xiàn)，研究發(fā)現(xiàn)正常幼蟹的肝胰臟、肌肉的維生素C含量高于早熟幼蟹1～2倍，蟹種性早熟現(xiàn)象與其體內(nèi)維生素C的含量不足存在正相關(guān)[12]。endprint

2.3水體鹽度

中華絨螯蟹是在海水中繁殖、淡水中生長(zhǎng)的廣鹽性高滲透調(diào)節(jié)的甲殼動(dòng)物的典型代表[13]。生產(chǎn)實(shí)踐發(fā)現(xiàn)，沿海地區(qū)培育的蟹種性早熟率要比在內(nèi)陸水域高。張列士等研究發(fā)現(xiàn)，在半精養(yǎng)條件下，鹽度為0.01%～0.03%的池塘蟹種性早熟率為18.2%，鹽度為0.3%～0.7%的池塘蟹種性早熟率高升為78.0%[1]。顧曉英等研究表明，鹽度是沿海地區(qū)中華絨螯蟹養(yǎng)殖中導(dǎo)致性早熟的最主要因素，隨著鹽度升高，早熟率明顯上升，當(dāng)鹽度達(dá)到1% 以上時(shí)，早熟率超過60%，鹽度和早熟率呈指數(shù)相關(guān)關(guān)系，決定系數(shù)r2=0.991 8[14]。魏薇等研究發(fā)現(xiàn)，水體鹽度升高引起的1齡雌蟹血淋巴中雌二醇水平和Ca2+含量上升，是導(dǎo)致1齡雌性中華絨螯蟹性早熟的內(nèi)在生理原因，水環(huán)境中的鹽度有利于蟹體對(duì)水中Ca2+的吸收，提供性腺發(fā)育時(shí)所需要的卵黃蛋白源的結(jié)合物質(zhì)鈣，導(dǎo)致1齡雌蟹性早熟的發(fā)生[15]。

2.4水體Ca2+濃度

Ca2+是甲殼類動(dòng)物甲殼的重要無機(jī)成分，在蛻皮周期中有著復(fù)雜的吸收和分泌機(jī)制[16]。Onken等的研究證明，中華絨螯蟹的鰓部具有Na+/K+ ATP活力，主要用于轉(zhuǎn)運(yùn)各種無機(jī)離子，水體中的Ca2+很可能通過滲透作用進(jìn)入蟹體內(nèi)，經(jīng)由血淋巴液的循環(huán)，輸送到靶器官，從而影響扣蟹的生長(zhǎng)發(fā)育[17]。王順昌等對(duì)中華絨螯蟹的研究表明，蛻皮后48～96 h機(jī)體開始從環(huán)境中直接吸收Ca2+，中華絨螯蟹通過直接吸收Ca2+不斷蛻殼求得機(jī)體的生長(zhǎng)和體質(zhì)量的增加[18]。吳嘉敏等研究發(fā)現(xiàn)，中華絨螯蟹性腺發(fā)育與血淋巴Ca2+濃度相關(guān)，1齡性早熟雌蟹血淋巴Ca2+濃度為（21.25±11.89） mmol/L，顯著高于正常發(fā)育蟹種的（13.70±1.17）mmol/L，而性早熟雄蟹血淋巴Ca2+濃度為（16.33±1.38） mmol/L，低于正常發(fā)育蟹種的（20.13±2.37） mmol/L[19]。魏薇等研究發(fā)現(xiàn)，當(dāng)水環(huán)境中的Ca2+濃度低于161.6 mg/L時(shí)，蟹種平均性早熟率與Ca2+濃度呈線性正相關(guān)關(guān)系，決定系數(shù)r2=0.94，當(dāng)水環(huán)境中Ca2+濃度超過161.6 mg/L時(shí)反而下降[20]。陳立僑等研究表明，在同一餌料組內(nèi)，加大水中的Ca2+濃度可明顯提高蟹的體寬和體質(zhì)量的特定生長(zhǎng)率[21]。

2.5品系

長(zhǎng)江水系、遼河水系、甌江水系三大水系中華絨螯蟹雖屬同一物種，但彼此在遺傳特性上略有差異。周開亞等研究發(fā)現(xiàn)，用200個(gè)隨機(jī)引物對(duì)遼河水系、長(zhǎng)江水系和甌江水系中華絨螯蟹進(jìn)行RAPD遺傳標(biāo)記鑒別研究，其中引物HX01擴(kuò)增的400 bp片段和HX02擴(kuò)增的700 bp片段檢測(cè)到為遼河水系和甌江水系共有，而長(zhǎng)江水系缺少上述2個(gè)片段，因而可作為長(zhǎng)江水系中華絨螯蟹的鑒別標(biāo)記，但未發(fā)現(xiàn)可以區(qū)分遼河水系與甌江水系的標(biāo)記[22]。李海燕等利用RAPD技術(shù)分析發(fā)現(xiàn)，遼河種群中華絨螯蟹野生、養(yǎng)殖及性早熟的個(gè)體存在基因座位組成上的差異，根據(jù)遺傳相似系數(shù)和遺傳距離發(fā)現(xiàn)性早熟個(gè)體較養(yǎng)殖個(gè)體有較大的變異，說明性早熟個(gè)體存在一定程度的種質(zhì)退化[23]。王成輝等研究發(fā)現(xiàn)，池塘養(yǎng)殖遼河種群中華絨螯蟹性早熟略早于長(zhǎng)江種群，而遼河種群中華絨螯蟹體質(zhì)量顯著低于長(zhǎng)江種群 （P<001）[24]。杜曉燕等應(yīng)用正交試驗(yàn)法研究積溫、營(yíng)養(yǎng)、品系3個(gè)因素對(duì)中華絨螯蟹性早熟的影響，證明品系是導(dǎo)致蟹種性早熟的首要原因[8]。

3性早熟蟹種的內(nèi)分泌調(diào)控、生理生化研究

3.1內(nèi)分泌調(diào)控

通常情況下，大多生物的生長(zhǎng)發(fā)育離不開內(nèi)分泌系統(tǒng)的調(diào)控，內(nèi)分泌系統(tǒng)分泌各種激素作用于靶細(xì)胞、靶組織或靶器官，繼而發(fā)揮興奮或抑制作用。

3.1.1X器官-竇腺復(fù)合體（XO-SG）甲殼動(dòng)物眼柄上有X器官和竇腺2種內(nèi)分泌組織，竇腺神經(jīng)分泌細(xì)胞的軸突終端的神經(jīng)細(xì)胞體位于X器官，竇腺通過纖維又與腦相連，遂通稱為X器官-竇腺復(fù)合體，而竇腺本身不產(chǎn)生激素，只起儲(chǔ)藏和釋放激素的功能[25]。影響中華絨螯蟹性腺發(fā)育的組織被普遍認(rèn)為是眼柄的X器官-竇腺復(fù)合體（XO-SG），這是甲殼動(dòng)物神經(jīng)內(nèi)分泌的主要調(diào)控中心[26]。XO-SG主要分泌性腺抑制激素（GIH）、蛻皮抑制激素（MIH）、大顎器抑制激素（MOIH）、高血糖激素（CHH）、紅色素集聚激素（RPCH）、色素分散激素（PDH）[27]。羅榮生等研究發(fā)現(xiàn)，摘除中華絨螯蟹雙側(cè)眼柄可導(dǎo)致血淋巴中20-羥基蛻皮酮升高，進(jìn)而促進(jìn)蛻殼及卵巢發(fā)育成熟[28]。顧志敏等在研究發(fā)現(xiàn)，摘除中華絨螯蟹單側(cè)眼柄也會(huì)促進(jìn)蛻殼，對(duì)卵子成熟無顯著誘導(dǎo)作用[29]?？惮F(xiàn)江等在研究摘除眼柄對(duì)中華絨螯蟹精巢發(fā)育及其氨基酸含量的影響時(shí)發(fā)現(xiàn)，摘除眼柄試驗(yàn)組精巢內(nèi)生殖細(xì)胞種類少，只有精子期細(xì)胞，而對(duì)照組精巢內(nèi)生殖細(xì)胞種類多，各期的生殖細(xì)胞都有，說明摘除眼柄可促進(jìn)精巢發(fā)育，加快精子的形成，并使精巢發(fā)育同步化[30]。這些研究表明摘除眼柄即解除了GIH、MIH的抑制作用，促進(jìn)精巢或卵巢發(fā)育。孫金生等研究發(fā)現(xiàn)，1齡蟹種、早熟蟹種和2齡成蟹竇腺的形態(tài)、結(jié)構(gòu)無明顯差異，均具有6種不同類型神經(jīng)分泌末梢，但神經(jīng)分泌物質(zhì)的釋放發(fā)生了明顯改變，其中V型神經(jīng)末梢在早熟中華絨螯蟹竇腺中未觀察到分泌現(xiàn)象[31]。

3.1.2大顎器（MO）大顎器（MO）位于大顎正后方大顎腱基部，主要分泌甲基法尼酯 （MF），對(duì)中華絨螯蟹繁殖、生長(zhǎng)和發(fā)育有重要的調(diào)節(jié)作用。XO-SG分泌的MOIH對(duì)MO具有抑制作用[32]，而摘除眼柄可導(dǎo)致大顎器肥大，其合成甲基法尼酯能力及血淋巴中甲基法尼酯濃度顯著升高[33]，同樣其內(nèi)部超微結(jié)構(gòu)也發(fā)生較大變化，細(xì)胞團(tuán)細(xì)胞質(zhì)內(nèi)無顆粒內(nèi)質(zhì)網(wǎng)數(shù)量減少，線粒體膨大，空泡數(shù)量增多[34]。趙維信等運(yùn)用放射化學(xué)方法跟蹤測(cè)定中華絨螯蟹早熟個(gè)體和正常發(fā)育個(gè)體的大顎器合成和分泌的激素——甲基法尼酯（MF），發(fā)現(xiàn)早熟雌、雄蟹當(dāng)年9月的MF合成速率約為正常蟹的2倍，早熟蟹的MF在當(dāng)年秋季（10月或11月）均達(dá)到峰值，之后MF合成速率顯著降低，而成熟系數(shù)繼續(xù)升高[35]。正常發(fā)育的雌、雄幼蟹，當(dāng)年至翌年4月的MF合成速率始終維持較低水平，翌年6月開始，MF合成速率迅速增大，至翌年10月的MF合成速率已超過早熟蟹的峰值，11月的MF合成速率明顯降低，性腺發(fā)育至Ⅳ期末研究結(jié)果表明，早熟蟹大顎器的提早發(fā)育、大量合成和分泌促性腺激素MF、刺激卵巢或精巢發(fā)育成熟是導(dǎo)致性早熟的內(nèi)分泌因素。endprint

3.1.3促雄腺（AG）促雄腺（AG）只存在于雄蟹中，為甲殼動(dòng)物所特有，位于陰莖基部射精管的表面，分泌促雄腺激素（AGH），參與雄蟹生殖及性分化[36]。XO-SG分泌的GIH對(duì)AG同樣具有抑制作用[37]，吳萍等對(duì)中華絨螯蟹精子發(fā)生過程及促雄腺結(jié)構(gòu)變化的光鏡與電鏡觀察表明，中華絨螯蟹的精巢發(fā)育、精子發(fā)生與促雄腺的結(jié)構(gòu)變化密切相關(guān)，促雄腺處于發(fā)育起始階段時(shí)，精巢內(nèi)尚未有精細(xì)胞形成，生精小管內(nèi)以初級(jí)精母細(xì)胞與次級(jí)精母細(xì)胞占優(yōu)勢(shì)；當(dāng)促雄腺處于分泌期時(shí)，精巢內(nèi)精子形成并成熟釋放；中華絨螯蟹繁殖后，促雄腺處于退化狀態(tài)[38]。邱高峰等研究發(fā)現(xiàn)，中華絨螯蟹促雄腺腺體結(jié)構(gòu)與個(gè)體精巢發(fā)育周期密切相關(guān)，可明顯分為增殖期、合成期和分泌期3個(gè)發(fā)育時(shí)期；腺細(xì)胞以全漿方式分泌激素，具有促進(jìn)精子發(fā)生與排放及抑制卵母細(xì)胞成熟的功能[39]。

3.1.4Y器官（YO）YO是甲殼動(dòng)物重要的內(nèi)分泌器官，分泌蛻皮激素（ecdysone）和XO-SG分泌的MIH共同調(diào)控甲殼動(dòng)物的蛻皮。羅榮生等研究發(fā)現(xiàn)，摘除中華絨螯蟹雙側(cè)眼柄可導(dǎo)致血淋巴中20-羥基蛻皮酮含量升高，表明MIH的消失解除了對(duì)YO的抑制，促進(jìn)蛻皮激素的分泌，進(jìn)而促進(jìn)蛻殼及生殖腺發(fā)育成熟[28]。姜仁良等研究發(fā)現(xiàn)，中華絨螯蟹在蛻殼前血淋巴中20-羥基蛻皮酮（20-HE）含量達(dá)到最高峰[（116.16±3296） ng/mL]，蛻殼時(shí)降入低谷[（7.09±1.39） ng/mL]，蛻殼后仍然很低；雌蟹血淋巴中20-BE 含量在5、8月各出現(xiàn)1個(gè)峰值，分別為（18.15±6.99）、（15.80±7.40） ng/mL，雄蟹則在6、9月各出現(xiàn)1個(gè)峰值，分別為（2026±13.58）、（1400±9.48） ng/mL；雌、雄蟹同在2月為全年最低值，分別為（3.75±3.38）、（3.68±1.78） ng/mL；試驗(yàn)結(jié)果闡明了雌、雄蟹5、6月血淋巴中20-HE 出現(xiàn)的峰值與生長(zhǎng)有關(guān)，8、9月出現(xiàn)的峰值與青春蛻殼、早期性腺發(fā)育相聯(lián)系[40]。有關(guān)中華絨螯蟹YO是否參與生殖腺發(fā)育的調(diào)控，目前尚無文獻(xiàn)報(bào)道，而劉智俊等通過對(duì)三疣梭子蟹YO在卵巢發(fā)育期間組織學(xué)變化研究發(fā)現(xiàn)，YO呈退化的非分泌狀態(tài)，初步判定YO可能沒有參與卵巢發(fā)育的內(nèi)分泌調(diào)控[41]。

3.1.5生殖腺17β-雌二醇（17β-E2）和睪酮（T）是由中華絨螯蟹卵巢與精巢分泌的類固醇激素。姜仁良等研究發(fā)現(xiàn)，雌蟹在9月卵母細(xì)胞進(jìn)入大生長(zhǎng)期后血淋巴中17β-E2出現(xiàn)峰值[（3.62±1.11）ng/mL]，促進(jìn)卵母細(xì)胞的卵黃積累，后開始下降，至翌年4月一直處于低水平，同時(shí)卵巢成熟系數(shù)（GSI）從9月開始逐步上升，至翌年2月達(dá)到峰值（786%），17β-E2與卵巢GSI呈顯著負(fù)相關(guān)[40]；17β-E2在卵巢初始發(fā)育階段為峰值，逐步降低能夠解除對(duì)蛻皮激素的抑制，促進(jìn)蛻皮逐漸成熟；雄蟹10月血淋巴中T含量開始上升，至12月達(dá)到（2.15±0.28） ng/mL，精巢從9月開始發(fā)育，至翌年1月精巢GSI達(dá)到峰值（5.58%）。吳嘉敏等研究發(fā)現(xiàn)，隨著蟹種的生長(zhǎng)發(fā)育，雌蟹血淋巴中17β-E2濃度逐步提高，正常發(fā)育蟹種為（0.15±0.05） pg/mL，性早熟蟹種為（0.59±0.15） pg/mL，2秋齡成蟹為（2.31±1.08） pg/mL[19]。魏薇等研究發(fā)現(xiàn)，1齡未成熟雌蟹血淋巴中17β-E2含量極顯著低于1齡性早熟雌蟹和2齡成熟雌蟹，由此推斷中華絨螯蟹性腺的發(fā)育和成熟與17β-E2含量密切相關(guān)，1齡蟹種 17β-E2含量分泌水平達(dá)到2齡蟹是導(dǎo)致性早熟的原因之一；1齡未成熟雄蟹血淋巴中的17β-E2極顯著低于1齡早熟和2齡成熟蟹，這與雌蟹中17β-E2含量變化的情況類似，因此17β-E2對(duì)雄性中華絨螯蟹的性腺發(fā)育可能也有一定的調(diào)控作用[42]。沈蓓杰等通過對(duì)即將啟動(dòng)的性早熟蟹種注射外源雌激素 17α-羥基孕酮、17β-E2，證明外源給予類固醇雌激素能顯著促進(jìn)性早熟蟹種卵巢的早期發(fā)育，卵巢指數(shù)和卵母細(xì)胞長(zhǎng)徑均比對(duì)照組顯著增高（P<0.05）[43-44]?？惮F(xiàn)江等用17α-甲基睪丸酮注射雄蟹，證實(shí)睪酮可顯著促進(jìn)蟹種精巢發(fā)育，精巢GSI升高，而注射17β-E2對(duì)精巢發(fā)育具有抑制作用[45]。汪桂玲等通過對(duì)雄蟹幼蟹注射不同濃度的外源 17β-E2，發(fā)現(xiàn)隨濃度增加對(duì)促雄腺的發(fā)育及分泌抑制作用逾明顯[46]。

3.2生理生化研究

對(duì)比性早熟蟹種與正常發(fā)育蟹種各方面的生理生化指標(biāo)可以發(fā)現(xiàn)，導(dǎo)致蟹種性早熟的有關(guān)線索。吳嘉敏等研究發(fā)現(xiàn)，蟹種性腺發(fā)育與肝胰腺、血淋巴的蛋白質(zhì)濃度相關(guān)，性早熟前后雌雄蟹種肝胰腺總蛋白濃度分別由（121.17±44.50）、（89.43±21.86） mg/g下降至（81.08±5.84）、（70.58±990） mg/g，雌性蟹種的肝胰腺占體質(zhì)量的比值也由8.18%降至3.90%；血淋巴總蛋白濃度正常發(fā)育的雌性蟹種為（9955±12.06） mg/mL，顯著高于性早熟雌性蟹種的（72.26±17.87） mg/mL，而雄性蟹種性早熟前后的血淋巴總蛋白濃度無顯著差異；2秋齡雌蟹肝胰腺總蛋白濃度高于性早熟雌性蟹種，但它們之間的血淋巴總蛋白濃度沒有顯著差異，2秋齡雄蟹的血淋巴和肝胰腺總蛋白濃度與性早熟雄性蟹種相當(dāng)，差異不顯著[47]。陳再忠等研究發(fā)現(xiàn)，血淋巴中高密度脂蛋白濃度呈現(xiàn)早熟雄蟹>未成熟雄蟹>未成熟雌蟹>早熟雌蟹的規(guī)律，但差異不顯著（P>0.05），高密度脂蛋白在總蛋白中的比例雖然在4組蟹中有1個(gè)從未成熟雄蟹到未成熟雌蟹、早熟雌蟹和早熟雄蟹的下降趨勢(shì)，差異均不顯著（P>005）[48]。他們又測(cè)定了未成熟、早熟和正常成熟中華絨螯蟹肝胰腺與性腺中的酸性磷酸酶（ACP）和堿性磷酸酶（ALP）的活力，結(jié)果表明，各組蟹肝胰腺ACP和ALP活力均顯著高于性腺；早熟蟹肝胰腺中ACP活力顯著高于未成熟蟹而低于正常成熟蟹，在各發(fā)育階段沒有性別差異，但早熟雌蟹和正常成熟雌蟹卵巢中ACP活力都較早熟雄蟹和正常雄蟹精巢低，早熟與正常成熟個(gè)體沒有差異；早熟雌蟹肝胰腺ALP活力顯著高于未成熟和正常成熟雌蟹，而與3組雄蟹處于同一水平，但早熟和正常成熟雌雄蟹的性腺中ALP活力沒有顯著差異；性腺發(fā)育所需營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的動(dòng)員或合成主要與肝胰腺ACP有關(guān)，性早熟的發(fā)生與肝胰腺中ACP和ALP活力的顯著升高有關(guān)[49]。他們通過測(cè)定性早熟前后中華絨螯蟹的肝胰腺指數(shù)（HI）、肝脂含量（LC）和肝胰腺脂肪酸組成發(fā)現(xiàn)雌雄蟹的HI和LC在早熟前后的變化趨勢(shì)一致，早熟個(gè)體低于未成熟個(gè)體；性早熟前，雌雄蟹的肝胰腺脂肪酸組成基本一致，只是雌蟹中C20：5n-3較高（P<0.05）；早熟雌蟹中C16： n-7、C16：0、C18：0高于未成熟雌蟹（P<0.01），而C20：5n-3、C20：4n-6、C22：6n-3則低于后者（P<0. 01）；早熟雄蟹中C18：1高于未成熟雄蟹，C14：0、C16：n-7、C20：5n-3皆低于后者；結(jié)果表明，雌雄蟹在性早熟前后存在肝胰腺脂肪酸組成變化的差異，且C20：5n-3可能主要參與成熟蛻殼和膜的構(gòu)建，而C22：6n-3可能主要參與卵巢發(fā)育和卵黃的發(fā)生[50]。常國(guó)亮等研究了早熟與正常中華絨螯蟹雄蟹性腺指數(shù)、性腺生化成分及脂肪酸組成發(fā)現(xiàn)，正常雄蟹性腺指數(shù)（3.09±0.67）顯著低于早熟雄蟹性腺指數(shù)（4.42±0.96，P<0.05）；早熟蟹性腺的水分含量為70.26%，顯著低于正常蟹，而總脂含量為3.96%，顯著高于正常蟹（P<0.05），蛋白、碳水化合物、甘油三酯、膽固醇和磷脂含量在兩者中均未見顯著差異（P>0.05）；飽和脂肪酸（SFA）含量最多的均為16：0，二者含量無顯著差異（P>0.05）；單不飽和脂肪酸（MUFA）含量最高的均為18：n-9，二者含量無顯著差異（P>0.05）；早熟性腺的18：n-7、20：n-9和MUFA含量均顯著高于正常蟹（P<0.05）；多不飽和脂肪酸組成中，2種蟹性腺的18：2n-6含量接近，雖然正常雄蟹性腺的20：4n-6（ARA）、20：5n-3（EPA）、22：6n-3（DHA）、PUFA、n-3（PUFA）、n-6（PUFA）和HUFA含量均高于早熟蟹，但僅有后二者存在顯著差異（P<0.05）[51]。劉強(qiáng)等研究發(fā)現(xiàn)，早熟雄蟹精巢生精小管主要管型為精母細(xì)胞型，而正常雄蟹以精原細(xì)胞加精母細(xì)胞型為主；早熟雄蟹性腺發(fā)育速度明顯快于正常雄蟹；正常雄蟹的生精小管和精莢橫截面積分別為（0041±0.007）、（0.080±0.010） mm2，而早熟雄蟹則分別下降為（0.026±0.005）、（0.044±0.005）mm2，2組間存在極顯著差異（P<0.01）；早熟雄蟹與正常雄蟹各期精細(xì)胞大小差異較大，表現(xiàn)為正常蟹精原細(xì)胞、精母細(xì)胞和精子均大于早熟蟹，即早熟蟹的精子成活率僅為（73.6±3.5）%，而正常蟹則為（84.7±2.1）%；早熟蟹精子頂體酶活力為（62.8±550）pIU，正常蟹為（79.6±9.80）pIU，兩者差異顯著（P<005）；早熟蟹精巢內(nèi)超氧化物歧化酶活力、總抗氧化能力均顯著低于正常蟹（P<0.05），而2組蟹精巢內(nèi)丙二醛（MDA）含量無顯著差異（P>0.05），雖早熟蟹性腺發(fā)育速度快于正常蟹，但其各期精子形態(tài)、精子密度與成活率、頂體酶活力和抗氧化能力等指標(biāo)均遠(yuǎn)不及正常蟹[52]。劉歡等測(cè)定了正常和早熟中華絨螯蟹精巢以及副性腺中透明質(zhì)酸酶的活力，同時(shí)考察不同孵育溫度對(duì)酶活力的影響，結(jié)果顯示，正常性成熟個(gè)體的精巢和副性腺中的透明質(zhì)酸酶活力遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于早熟個(gè)體的酶活力，差異顯著（P<001）；孵育溫度對(duì)透明質(zhì)酸酶活力基本上沒有影響；正常性成熟個(gè)體副性腺中透明質(zhì)酸酶活力高于精巢酶活力，性早熟個(gè)體副性腺中的透明質(zhì)酸酶活力極低，甚至無法檢出[53]。endprint

4展望

綜上所述，1齡蟹種性早熟是由蟹種自身因子與環(huán)境因子共同決定的，是多因素復(fù)合作用的結(jié)果。近些年來，國(guó)內(nèi)外學(xué)者對(duì)蟹種性早熟的研究大多局限于誘因分析、早熟與正常蟹種各類表層指標(biāo)的對(duì)比等，對(duì)單因子或多因子復(fù)合作用的深層發(fā)生機(jī)制及分子生物學(xué)方向的研究還不夠透徹，這可能成為以后對(duì)蟹種性早熟研究的方向。

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