余 璐
(東南大學(xué)成賢學(xué)院,江蘇南京 210088)
固體丙氨酸變溫過(guò)程的二維相關(guān)紅外分析
余 璐
(東南大學(xué)成賢學(xué)院,江蘇南京 210088)
針對(duì)固體丙氨酸變溫過(guò)程的二維相關(guān)紅外分析,利用FTIR和二維相關(guān)紅外分析技術(shù),深入研究了固體丙氨酸變溫過(guò)程。研究結(jié)果表明,固體丙氨酸隨著溫度的升高,紅外譜峰位置和相對(duì)強(qiáng)度的變化并不明顯。通過(guò)二維相關(guān)紅外分析技術(shù),在1 560~1 650cm-1,固體丙氨酸出現(xiàn)了1 625和1 589cm-1兩個(gè)自動(dòng)峰,其中在1 625cm-1位置的自動(dòng)峰比較強(qiáng),熱敏程度也比較大。并進(jìn)一步研究了固體丙氨酸的結(jié)構(gòu)變化情況,希望對(duì)固體丙氨酸脫氫氧化機(jī)理的研究提供一定的參考。
固體丙氨酸;變溫過(guò)程;FTIR;二維相關(guān)
Abstract:The solid alanine temperature change process was studied by FTIR and two-dimensional correlation infrared spectroscopy(FTIR)for two-dimensional correlation infrared analysis of solid alanine temperature change process.The results show that the change of infrared peak position and relative intensity is not obvious with the increase of temperature.In the range of 1560~1650cm-1,two automatic peaks of 1625 and 1589cm-1appeared in solid alanine by two-dimensional correlation infrared analysis.The automatic peak at 1625cm-1was stronger and the thermal degree was also Big.And further studies the structural changes of solid alanine,and hope to provide some reference for the study of the mechanism of solid alanine dehydrogenation.
Key words:solid alanine;temperature change process;FTIR;two-dimensional correlation
丙氨酸是組成蛋白質(zhì)的主要組成部分,是一種非極性R基氨基酸,研究表明,丙氨酸是人體血液中含量最高的一種氨基酸,其主要作用是促進(jìn)人體合成蛋白質(zhì),并調(diào)節(jié)人力生理機(jī)能。因此,丙氨酸的功能性作用機(jī)理研究長(zhǎng)期以來(lái)一直都是生物學(xué)領(lǐng)域研究的主要課題。本文利用二維相關(guān)紅外光譜,對(duì)固體丙氨酸變溫過(guò)程的動(dòng)態(tài)規(guī)律變化做了如下研究。
紅外光譜儀為thermo fisher 的尼高力380、附件也是thermo fisher,用DTGS檢測(cè)器對(duì)測(cè)量結(jié)果進(jìn)行檢測(cè)。光譜分辨率為4cm-1,可測(cè)范圍為4 000~400cm-1,共掃描信號(hào)累加32次,固體丙氨酸由Sigma公司提供。
固定丙氨酸通過(guò)溴化鉀壓片進(jìn)行變溫紅外測(cè)定,控制溫度在20~150℃,實(shí)驗(yàn)變溫間隔為10℃,共進(jìn)行32次掃描累加,變溫動(dòng)態(tài)圖譜在采用上海復(fù)旦大學(xué)自行設(shè)計(jì)的二維相關(guān)分析軟件進(jìn)行處理和分析。
固體丙氨酸在20℃恒定不變的前提下,當(dāng)波數(shù)為4 000cm-1時(shí),吸光度0;當(dāng)波數(shù)為3 416cm-1時(shí),吸光度為0.16;當(dāng)波數(shù)為3 083cm-1時(shí),吸光度為0.58;當(dāng)波數(shù)為2 114cm-1時(shí),吸光度為0.14;當(dāng)波數(shù)為1 621cm-1時(shí),吸光度為0.96;從這幾組數(shù)據(jù)中可以看出,在外界溫度不變的情況,隨著波數(shù)的變化,吸光度隨著變化,在1 621cm-1時(shí),吸光度達(dá)到最大為0.96[1]。
隨著溫度從20℃上升到150℃時(shí),紅外譜峰的位置和譜峰的相對(duì)強(qiáng)度變化情況如表1所示:
左移為正,右移為負(fù)。
從表1中可以清楚看出,紅外譜峰的位置和譜峰的相對(duì)強(qiáng)度變化范圍非常小,也只有CNN對(duì)稱伸縮振動(dòng)實(shí)右移了5個(gè)波數(shù),其他譜峰僅僅位移了1個(gè)或者兩個(gè)波數(shù),也就是可以說(shuō)明,在20~150℃,僅能引起丙氨酸中各官能團(tuán)偶極躍遷矩的微小變化。
表1 紅外譜峰的位置和譜峰的相對(duì)強(qiáng)度變化表
二維相關(guān)紅外光譜表達(dá)的是不同吸收峰之間的相關(guān)性,包括兩個(gè)方面:其一,同步相關(guān)性來(lái)表示波數(shù)不同的兩個(gè)信號(hào)之間的協(xié)同性;其二,異步相關(guān)性用來(lái)表示不同波數(shù)的兩個(gè)信號(hào)之間的獨(dú)立性。為確保研究具有代表性和權(quán)威性,分別對(duì)1 280~1 430cm-1和1 570~1 650cm-1兩個(gè)區(qū)域進(jìn)行二維相關(guān)紅外分析。
(1)1 570~1 650cm-1區(qū)域
在1 570~1 650cm-1區(qū)域中,同步相關(guān)圖和異步相關(guān)圖共同存在。同步相關(guān)圖譜峰對(duì)角線是對(duì)稱的,在主對(duì)角線上的峰,稱之為自動(dòng)峰,其主要作用是顯示吸收峰對(duì)所加維繞的敏感程度,因此其數(shù)值始終為正值。在1 625~1 589cm-1的位置出現(xiàn)了自動(dòng)峰,在1 625cm-1處的自動(dòng)峰最強(qiáng)。但是二者的吸光度基本相同,也就可以說(shuō)明。固體丙氨酸中NH+3隨時(shí)溫度升高而發(fā)生變化,具有很強(qiáng)的熱敏感系數(shù)。在1 589cm-1處的自動(dòng)峰最弱,說(shuō)明COO-隨著溫度升其變化系數(shù)比較小。
(2)1 280~1 430cm-1區(qū)域
根據(jù)1 280~1 430cm-1區(qū)域,在20~150℃升溫變化過(guò)程中發(fā)生的變化順序可看出,CH3和COO-的相干峰,CH3和NH+3的相干峰,CH和NH+3的相干峰,也就可以說(shuō)明CH3和COO-、CH3和NH+3、CH和NH+3的變化方向相同。而COO-和NH+3的負(fù)相干峰,也就是說(shuō)二者的變化方向相反。
通過(guò)上述實(shí)驗(yàn)分析可以看出,固體丙氨酸從20℃,上升到150℃時(shí)NH+3發(fā)生變化,然后CH和CH3發(fā)生變化,COO-最后發(fā)生變化,這結(jié)論和丙氨酸脫氫氧的機(jī)理基本相同,可以得出,丙氨酸的動(dòng)態(tài)變溫實(shí)驗(yàn)恰恰能提出丙氨酸氧化過(guò)程的更細(xì)微結(jié)構(gòu)變化的過(guò)程與機(jī)理結(jié)論。
綜上所述,通過(guò)FTIR光譜法并結(jié)合二維相關(guān)紅外光譜分析可以獲得固體丙氨酸變溫過(guò)程中其結(jié)構(gòu)發(fā)生變化規(guī)律,本文通過(guò)相關(guān)實(shí)驗(yàn),深入分析研究了固體丙氨酸在20℃~150℃變溫中其結(jié)構(gòu)變化微觀信息,希望對(duì)相關(guān)部門研究丙氨酸氧化機(jī)理,提供理論依據(jù)。
[1] 宋修鵬,黃杏,莫鳳連,等.甘蔗苯丙氨酸解氨酶基因(PAL)的克隆和表達(dá)分析[J].中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué),2013,14:2856-2868.
Two-dimensional Correlation Infrared Analysis of Solid Alanine Temperature Change Process
Yu Lu
O657.33
A
1003–6490(2017)09–0140–02
2017–07–04
余璐(1989—),女,江蘇南京人,主要方向?yàn)閮x器分析。