王瑞/河南信陽農(nóng)林學院

規(guī)?；i場暴發(fā)豬丹毒病的診治

王瑞/河南信陽農(nóng)林學院

豬丹毒絲菌俗稱豬丹毒桿菌或丹毒絲菌，屬丹毒絲菌屬（Erysipelothrix），是一種兼性，無芽孢形成的，非抗酸性，革蘭氏陽性小桿菌。豬丹毒絲菌可以導致豬丹毒，是一種可以廣泛流行的、能夠造成重大經(jīng)濟損失的疾病。近幾年來，國內(nèi)豬場陸續(xù)發(fā)生豬丹毒疫情，而且有的還表現(xiàn)為較高的死亡率，給養(yǎng)殖戶造成嚴重的經(jīng)濟損失。2017年7～8月份河南駐馬店某規(guī)?；i場因爆發(fā)豬丹毒，造成近10頭母豬和120余頭保育豬傷亡，現(xiàn)將診治情況通報如下。

（一）發(fā)病情況

圖1 母豬體表出現(xiàn)疹塊

2017年7～8月份，駐馬店某存欄960頭母豬場，突然有部分母豬和保育豬發(fā)病。病豬表現(xiàn)為采食量下降、體溫在42℃，高燒不退、呼吸困難、后肢無力、走路搖擺、臥地不起。部分病豬下頜部、腹部以及全身皮膚出現(xiàn)充血、淤血。 部分豬只發(fā)病1～2 d后，體表頸下、胸前腹側(cè)、四肢內(nèi)側(cè)等皮膚發(fā)生疹塊。

圖2 保育豬體表淤血，伴發(fā)疹塊

（二）病理剖檢

全身淋巴結(jié)腫大，呈紫紅色；切面隆起，濕潤多汁。脾臟淤血腫大，呈櫻桃紅色，切面隆突，呈鮮紅色；胃、腸普遍呈急性卡他性或出血性炎癥。肺臟淤血、水腫，伴發(fā)點狀出血。肝臟腫大、充血、呈暗紅色。

（三）實驗室診斷

1.主要培養(yǎng)基及試劑材料。胰蛋白胨大豆瓊脂（TSA），胰蛋白大豆肉湯（TSB）購自青島海博生物技術有限公司；胎牛血清購自杭州四季青生物工程材料有限公司；微量生化鑒定試劑和藥敏紙片均購自杭州天和微生物試劑有限公司；

2.細菌分離培養(yǎng)。無菌采取病死豬腦組織、肺臟和脾臟，接種于含5%胎牛血清的TSA平板，37℃燭缸培養(yǎng)24 h；挑取平板上灰白色、透明、表面光滑、圓形、針尖大?。ㄖ睆叫∮? mm）單個菌落進行革蘭氏染色。革蘭氏染色陽性、纖細桿狀細菌為可疑菌落，再分別挑取可疑單個菌落接種于含5%胎牛血清的TSA平板，37℃燭缸進行純培養(yǎng)。

3.生化反應。挑取分離菌的純培養(yǎng)物按常規(guī)生化試驗方法進行糖、醇類等發(fā)酵試驗。分離菌的鑒定參考伯杰氏細菌鑒定手冊和豬丹毒行業(yè)標準 NYT566-2002進行。

4.分離菌株血清型鑒定。首先制備豬丹毒臨床分離株抗原。將豬丹毒分離菌株接種含1%裂解血球全血馬丁肉湯，37℃培養(yǎng)24 h后，劃線接種于含8%健康動物血清、1%裂解血細胞全血馬丁瓊脂平板，37℃培養(yǎng)48 h。挑單菌落接種含1%裂解血細胞全血馬丁湯10 ml，37℃培養(yǎng)24 h。取2 ml接種于100 ml含1%乳糖、10%血清馬丁肉湯中，37℃搖床振蕩培養(yǎng)24 h。隨后加0.5%甲醛，37℃滅活24 h，3000 rpm離心30 min，棄上清，用含0.5%甲醛PBS清洗2次后，將沉淀物用3 ml蒸餾水懸浮后于121℃高壓1 h，冷卻至室溫后3000 rpm離心15 min，加0.01%硫柳汞后置2℃～8℃保存?zhèn)溆谩?/p>

稱取瓊脂粉1.2 g，加入90 ml生理鹽水，加熱融化后加入10 ml 1%硫柳汞，鋪板，打梅花孔，封底。中央孔分別加入豬丹毒26種標準血清，周圍孔分別加入豬丹毒臨床分離株制備的抗原，將平板置濕盒中37℃反應24 h，觀察瓊擴反應結(jié)果。

（四）實驗室診斷結(jié)果

1.細菌的分離培養(yǎng)及形態(tài)學特性。分離菌株在鮮血瓊脂平板形成針尖大小、半透明、表面光滑、邊緣整齊的小菌落。培養(yǎng) 48 h后涂片染色鏡檢見明顯的單個、成對、成簇存在的革蘭氏陽性纖細桿菌（圖3）。

圖3 革蘭氏陽性纖細桿菌

2.分離菌株生理生化特性鑒定。分離菌株的生理生化鑒定結(jié)果與常規(guī)豬丹毒絲菌的生理生化指標一致。（表1）

表1 分離菌生化反應結(jié)果

3.血清型結(jié)果。將獲得的豬丹毒臨床分離菌株進行血清型鑒定，結(jié)果所有的分離菌株均僅與1a型標準血清發(fā)生凝集反應，與其余25種標準血清不發(fā)生反應，因此可以判定本實驗室分離的豬丹毒絲菌血清型均為1a型。

（五）防治情況

發(fā)病初期養(yǎng)殖場根據(jù)疹塊型現(xiàn)象，自行判定為豬丹毒。使用青霉素、阿莫西林進行治療。用藥期間病情能夠得到一定控制，但因為群體發(fā)病數(shù)量較大，考慮后續(xù)有可能出現(xiàn)更多的新發(fā)動物，因此豬場又對尚未發(fā)病的豬只進行豬丹毒弱毒疫苗的接種。接種期間，抗生素停止使用。該場從2017年7月份出現(xiàn)病豬開始一直持續(xù)發(fā)生到9月份，病情總是時好時壞。

（六）討論與分析

通過臨床癥狀、病理剖檢及實驗室診斷工作，確定此次該場生豬大批發(fā)病死亡的原因是由1a型豬丹毒絲菌感染導致的急性敗血型和疹塊型豬丹毒。雖然臨床上已經(jīng)采取了針對豬丹毒的各項措施，但豬場依然損失巨大，其主要誘因有四點：

1.豬場內(nèi)圈舍間距小，舍間地面大部分未硬化。據(jù)了解該豬場已生產(chǎn)超過15年，房舍均已老化，場內(nèi)40%的地面并未硬化。豬舍間距僅有4米，且豬舍之間皆為土地，豬舍外種植有樹木、有蔬菜和青草。而多種野生哺乳動物和鳥類也可帶菌，構(gòu)成廣泛疫源。土壤則為豬丹毒絲菌的傳播提供媒介的角色。該場內(nèi)環(huán)境不排除有丹毒絲菌存在。

2.存欄密度過高。感染急性豬丹毒的豬隨糞、尿、唾液、鼻分泌物可排出大量的豬丹毒桿菌。該發(fā)病場存欄母豬近800頭，而育肥豬舍并沒有擴建，導致在發(fā)病期間圈舍存欄量超出正常水平20%。這也直接造成豬場發(fā)病連綿不絕。該場后期通過減欄，淘汰弱豬的方式，明顯降低豬丹毒的發(fā)病率。

3.疫苗選擇的問題。該發(fā)病場在弱毒疫苗免疫期間停止了抗生素使用，結(jié)果在免疫空白期內(nèi)新的病例不斷出現(xiàn)。故該場在控制后期重新選擇使用豬丹毒滅活疫苗，疫情得到了一定控制，但損失已經(jīng)巨大。疫苗免疫可以有效地預防豬丹毒疾病的發(fā)生，但是傳統(tǒng)的滅活苗、弱毒苗或多聯(lián)苗都存在著一定的缺陷，如病豬、弱豬不能使用，弱毒株可能恢復毒力或者激發(fā)隱性感染，暴發(fā)豬丹毒等；豬丹毒疫苗最嚴重的缺陷是免疫接種不能對慢性豬丹毒產(chǎn)生堅強的保護力。

4.藥物耐藥性問題。青霉素對豬丹毒有一定效果，但是長期使用藥物使得豬丹毒桿菌產(chǎn)生耐藥性。該場自建場以來，分別在1999年發(fā)生過一次豬丹毒疫情。后來考慮到疫苗程序比較密集且多年又未發(fā)生疫情，2006年該場將丹毒疫苗停止使用。結(jié)果未料到2017年發(fā)生如此嚴重的豬丹毒疫情，如此可見忽視豬丹毒的防范，豬場要承擔很大的風險。

（六）防控建議

1.豬場的日常管理要落實到實處。豬場密度要適當，切記不可隨意混群。豬舍進行及時的清理，保證豬舍的干燥整潔，每天至少要對豬舍進行2次打掃，及時將豬的糞便清理出去，還可以將豬的糞便進行堆積發(fā)酵處理。對豬舍周圍的環(huán)境以及豬舍內(nèi)進行消毒，一周要進行一次消毒工作，豬舍內(nèi)部要2～3 d消毒一次。

2.減少應急因素對豬群的影響。2017年7、8月份，發(fā)病場所在地區(qū)氣溫最高值分別達到35℃、37℃，而該場圈舍老化，缺乏有效降溫設備，可以推斷豬舍內(nèi)氣溫分別可達到37℃、39℃，這也是豬丹毒爆發(fā)的一大誘因。因此通過降低密度、配套降溫設備，可以起到一定的降低應激的效果。

3.預防工作需到位。處于發(fā)病初期或是暴發(fā)期的豬場應進行及時的隔離病豬，對其他豬進行預防接種。對體重10 kg以上的斷奶豬，每頭豬應注射豬丹毒滅活疫苗進行預防。

4.觀念上重視豬丹毒。2012年以來，豬丹毒發(fā)病率逐年上升，其主要原因還是豬場管理人員在日常防控工作上有所松懈。有部分人員認為豬丹毒發(fā)病率不高、用藥物可以治療，不必要進行疫苗預防，結(jié)果由于國內(nèi)養(yǎng)殖環(huán)境的惡化、帶菌種豬的流動以及部分區(qū)域氣候的反常，有利于豬丹毒的流行。豬場應根據(jù)本地區(qū)豬丹毒流行現(xiàn)狀，選擇是否進行疫苗預防，并能夠細致的觀察，及時發(fā)現(xiàn)存在異常的豬只，及時進行治療，使豬丹毒病得到有效地控制，減少經(jīng)濟損失。

（略）