雷 萍，吳亞召，張文雋，杜雙田，杜 芳

（1.陜西省微生物研究所，陜西 西安 710043；2.西北農(nóng)林科技大學，陜西 楊凌 712100）

繡球菌工廠化栽培優(yōu)良菌株的篩選研究*

雷 萍1，吳亞召1，張文雋1，杜雙田2，杜 芳1

（1.陜西省微生物研究所，陜西 西安 710043；2.西北農(nóng)林科技大學，陜西 楊凌 712100）

觀察不同繡球菌菌絲培養(yǎng)特性和出菇情況，篩選獲得優(yōu)良的栽培菌株。比較不同繡球菌菌株菌絲生長情況、子實體農(nóng)藝性狀和產(chǎn)量情況，其中繡12菌絲生長勢最佳，生長速度快，生長周期短，子實體農(nóng)藝性狀佳，產(chǎn)量高，平均單產(chǎn)量為198.4 g。試驗結(jié)果表明繡球菌菌株繡12為優(yōu)良栽培菌株。

繡球菌；優(yōu)良菌株；篩選

繡球菌Sparassia crispa(Wulf.)Fr.，又名繡球蕈、繡球菇，屬擔子菌亞門（Basidiomycotina） 異隔擔子菌綱（Heterobasidiomycetes） 非褶孔菌目（A－phyllophorales） 繡球菌科（Sparassidaceae） 繡球菌屬（Sparassia）[1]。在日本、韓國、美國、加拿大、澳大利亞等國和我國河北、吉林、黑龍江、陜西、云南、福建等地自然分布。夏秋季于云杉、冷杉或松林及混交林中分散生長。子實體中等至大形，肉質(zhì)，菌柄基部似根狀并與樹根相連[2]。由1個粗壯的柄上生出許多分枝，枝端形成無數(shù)曲折的瓣片，形似巨大的繡球而得名。繡球菌資源蘊藏量比較稀少，被譽為“萬菇之王”，是珍稀名貴藥食兩用菌。

繡球菌子實體肉質(zhì)潔白細嫩，營養(yǎng)豐富。據(jù)分析每100克干品中含有多糖2.6 g、還原糖1.46 g、粗蛋白質(zhì)12.9 g、粗脂肪1.5 g、粗纖維13.7 g[3]。繡球菌含有大量β-葡聚糖，具有提高人體免疫力和機體造血功能，抗癌、防癌的特殊功效[4-6]。子實體中含有的抗氧化物質(zhì)、維生素C、維生素E等，作為美容產(chǎn)品有效成分，對祛除黑色素沉淀等肌膚問題具有良好的功效。因其具有超高的激活免疫能力，在日本有“夢幻神奇菇”之稱。普通蘑菇生長在陰面，而繡球菇每天需要10 h以上的光照，是世界上唯一的“陽光蘑菇”。在歐美、日本極為暢銷，價格昂貴。為了適應工廠化栽培技術(shù)發(fā)展，選育優(yōu)良繡球菌品種，對提高其產(chǎn)量和品質(zhì)具有重要意義。筆者通過對本研究室分離和引進的3個繡球菌菌株進行篩選，以期獲得高產(chǎn)、穩(wěn)產(chǎn)、商品性狀優(yōu)良的菌株。

1 材料與方法

1.1 試驗材料

1.1.1 供試菌株

試驗用繡球菌菌株來自陜西省微生物研究所和東北食藥用菌研究所等，其中繡12來自陜西微生物研究所微生物菌種資源中心第三研究室，繡396來源于東北食藥用菌研究所，繡HB來源于河北。

1.1.2 培養(yǎng)基

（1） 母種培養(yǎng)基

綜合PDA馬鈴薯200 g（煮汁）、葡萄糖20 g、蛋白胨5 g、酵母膏2 g、硫酸鎂1 g、磷酸二氫鉀0.5 g、瓊脂20 g，定容至1 000 mL。

（2） 原種培養(yǎng)基

木屑81%、麥麩10%、KH2PO40.5%、石膏0.5%、白糖1%、黃豆粉5%，含水量62%。

（3） 栽培配方

木屑78%、麩皮20%、蔗糖1%、石膏1%、石灰0.5%，含水量62%～65%。

1.2 方法

1.2.1 母種培養(yǎng)特性試驗

為了保證試驗中各菌株菌齡和接種量一致，將供試菌株在母種培養(yǎng)基上進行活化。然后取0.5 cm2大小菌種塊，接種到綜合PDA培養(yǎng)基平板中央，（25±1）℃恒溫培養(yǎng)。試驗設(shè)3個重復，培養(yǎng)過程中記錄菌絲每天生長速度、長勢、菌落邊緣特征等。當生長速度最快的菌株即將長滿平板時取出，測定菌落直徑，對菌絲生長速度進行差異顯著性分析。

1.2.2 原種培養(yǎng)特性試驗

按原種培養(yǎng)基配制，采用規(guī)格15 cm×28 cm×0.05 cm的聚乙烯菌袋，每袋裝干料320 g，高壓滅菌。冷卻至室溫后，接入繡球菌菌種，每個品種接種15袋，于（25±1） ℃恒溫箱中進行培養(yǎng)，待菌絲定植后，觀察菌絲長勢、密度等，并記錄滿袋時間，進行差異顯著性分析。每個品種重復3次。

1.2.3 優(yōu)良品種篩選試驗

按栽培培養(yǎng)基配制，采用17 cm×33 cm×0.045 cm的聚乙烯菌袋裝料，每袋裝干料350 g，高壓滅菌。冷卻至室溫后，接入繡球菌菌種，每個品種接種50袋，于（25±1） ℃恒溫箱中進行培養(yǎng)，待菌絲長滿后繼續(xù)培養(yǎng)10 d～15 d后進行出菇管理。出菇溫度控制在16℃～20℃，空氣相對濕度90%～95%，待子實體成熟時即可采收。試驗期間記錄菌絲長勢、滿袋時間、現(xiàn)蕾時間、子實體性狀、產(chǎn)量等。

1.3 統(tǒng)計學處理

采用Excel進行統(tǒng)計分析，多組比較，新復極差檢驗法檢驗。

2 結(jié)果與分析

2.1 不同繡球菌母種培養(yǎng)特性分析

3株繡球菌菌株在母種培養(yǎng)基上的生長情況見表1。

表1 3株繡球菌菌株在母種培養(yǎng)基上生長情況Tab.1 Growth situation of three Sparassis crispa strains in mother culture medium

從表1可以看出，繡12在母種培養(yǎng)基上菌絲生長粗壯、旺盛，顏色潔白，接種后萌發(fā)快，菌絲邊緣生長整齊，菌絲日均生長速度最快1.38 mm·d-1；其次是繡396，菌絲日均生長速度為1.32 mm·d-1，菌絲生長較旺盛，邊緣整齊、濃密、潔白；最差的是繡HB，菌絲生長勢較弱，邊緣較整齊，菌絲日均生長速度1.26 mm·d-1。3株菌菌絲生長速度差異顯著，平板培養(yǎng)過程中繡396菌株有1皿污染外，其余菌株未發(fā)生污染現(xiàn)象。

2.2 不同繡球菌原種培養(yǎng)特性分析

3株繡球菌菌株在原種培養(yǎng)基上的生長情況見表2。

表2 3株繡球菌菌株在原種培養(yǎng)基上生長情況Tab.2 Growth situation of three Sparassis crispa strains in original culture medium

不同繡球菌菌株在原種培養(yǎng)基上的長勢差異不明顯，除繡HB菌絲生長勢一般、生長速度稍慢，71 d長滿袋；其余2株菌繡12、繡396生長差異不明顯，菌絲長勢均很好，生長速度較快，分別62 d、64 d菌絲即可長滿袋。原種培養(yǎng)過程中均未出現(xiàn)污染現(xiàn)象。

2.3 繡球菌栽培優(yōu)良菌株篩選試驗

3株繡球菌菌株子實體農(nóng)藝性狀以及產(chǎn)量的分析見表3。

表3 3株繡球菌菌株子實體農(nóng)藝性狀和產(chǎn)量分析Tab.3 Analysis on agronomic traits and yield of three Sparassis crispa

從表3中可以看出，繡球菌品種繡12和繡396在栽培培養(yǎng)基中菌絲生長勢均很好，滿袋天數(shù)分別為74 d、76 d，繡12繼續(xù)培養(yǎng)46 d后長出子實體原基，子實體乳白色，至成熟時子實體直徑平均17.3 cm，單產(chǎn)量最高為198.4 g；繡396培養(yǎng)48 d后出現(xiàn)子實體原基，子實體黃白色，成熟時子實體直徑平均16.5 cm，單產(chǎn)量次之，為179.2 g；繡HB菌絲生長一般，86 d菌絲長滿菌袋，需繼續(xù)培養(yǎng)56 d菌袋出現(xiàn)子實體原基，子實體顏色乳白色，成熟時子實體直徑平均14.9 cm，單產(chǎn)量最差為139.3 g。菌絲培養(yǎng)和出菇培養(yǎng)過程中均未出現(xiàn)污染現(xiàn)象。

3 結(jié)論

菌種是影響食用菌生產(chǎn)的重要因素，只有優(yōu)良的菌種才能在不增加原料投入的情況下增加菇農(nóng)經(jīng)濟效益，獲得優(yōu)質(zhì)高產(chǎn)的產(chǎn)品，降低栽培風險，因此篩選優(yōu)良栽培菌種是食用菌栽培方面極其重要的環(huán)節(jié)。

本試驗通過對3株不同繡球菌菌株的菌絲生長情況、栽培特性、子實體農(nóng)藝性狀和產(chǎn)量等進行比較，篩選出優(yōu)良栽培菌株繡12。菌絲生長勢好、旺盛濃密，培養(yǎng)期間無污染現(xiàn)象，原種滿袋時間為62 d，栽培袋滿袋時間為74 d，繼續(xù)培養(yǎng)46 d現(xiàn)蕾；子實體乳白色，直徑17.3 cm，平均單產(chǎn)量198.3 g。

[1]黃年來.中國大型真菌原色圖鑒[M].北京：中國農(nóng)業(yè)出版社，1998.

[2]卯曉嵐.中國大型真菌[M].鄭州：河南科學技術(shù)出版社，2000：410.

[3]黃建成，李開本，林應椿，等.繡球菌子實體營養(yǎng)成分分析[J].營養(yǎng)學報，2007，29（5）：514-515.

[4]Tada R,Harada T,Nagi-miura N,et al.NMR characterization of the structure of a β-(1→3)-D-glucan isolate from cultured fruit bodies of Sparassis crispa[J].Carbohydr Res,2007,342(17):2611-2618.

[5]Nameda S,Harada T,Miura NN,et al.Enhanced cytokine synthesis of leukocytes by a beta-glucan preparation,SCG,extracted from a medicinal mushroom,Sparassis crispa[J].Immunopharmacol Immunotoxicol,2003,Vol.25(3):321-335.

[6]Harada T,MiuraI NN,AdachiI Y.IFN-gamm induction by SCG,1,3-beta-Dglucan from Sparassis crispa,in DBA/2 mice in vitro[J].Interferon Cytokine Res,2002,22(12):1227-1239.

Study on Screening of Sparassis crispa Strains Suitable for Cultivation

LEI Ping1,WU Ya-zhao1,ZHANG Wen-jun1,DU Shuang-tian2,DU Fang1
(1.Shaanxi Microbioogy Rereach Institute,Xi’an 710043,China;2.North West Agriculture and Forestry University,Yangling 712100,China)

To obtain Sparassis crispa strains suitable for cultivation,the mycelial growing states,fruiting body morphology and yields of several S.crispa strains were compared.The results showed that Xiu12 presented the best cultivation properties,such as good growing state of mycelium,faster growth rate,shorter growth cycle,good agronomic trait for fruiting body,high yield and average yield for single cultivated bag being 198.4 g.Therefore,Xiu12 was a fine strain.

Sparassis crispa;fine strain;screening

S646.9

A

1003-8310（2017）00-0024-03

10.13629/j.cnki.53-1054.2017.05.006

陜西省科技統(tǒng)籌創(chuàng)新工程計劃項目（2015KTTSNY03-09）。

雷萍（1966-），女，?？?，副研究員，長期從事食（藥）用菌研究方面的工作。E-mail:wuleiping2529@126.com

2017-07-18