龍牙肝泰膠囊對(duì)肝損傷模型小鼠的藥效學(xué)影響*

張玉昆 馮月男 卞敬琦 遲文成 隋雨桐 姜廣坤 牛雯穎 姜慶輝 李陸軍*

（黑龍江中醫(yī)藥大學(xué)·哈爾濱 150040）

龍牙肝泰膠囊對(duì)肝損傷模型小鼠的藥效學(xué)影響*

張玉昆 馮月男 卞敬琦 遲文成**隋雨桐 姜廣坤 牛雯穎 姜慶輝 李陸軍***

（黑龍江中醫(yī)藥大學(xué)·哈爾濱 150040）

目的：通過CCl4所致肝損傷小鼠模型探討龍牙肝泰膠囊對(duì)急性肝損傷的保護(hù)作用。方法：連續(xù)灌胃給藥7天，末次給藥后2h后腹腔注射CCl4的橄欖油溶液，造成急性肝損傷模型，24h后取血，測(cè)定血清中AST、ALT水平。結(jié)果：龍牙肝泰膠囊高、中、低劑量組均能降低肝損傷小鼠血清中AST、ALT水平，與模型組比較有極顯著性差異（P0.01）結(jié)論：龍牙肝泰膠囊對(duì)CCl4所致肝損傷小鼠有治療和保護(hù)作用。

龍牙肝泰膠囊 四氯化碳 肝損傷

龍牙楤木：為五加科科植物龍牙楤木Aralia elata(Miq.)Seem.的干燥根皮及莖皮。龍牙肝泰膠囊是黑龍江久久藥業(yè)有限責(zé)任公司自主研發(fā)，用于肝炎、肝硬化的治療的有效臨床獨(dú)家產(chǎn)品。其主要成分是龍牙楤木醇提物。龍牙肝泰膠囊作為臨床常用產(chǎn)品，治療肝炎、肝硬化療效顯著。本實(shí)驗(yàn)通過觀察龍牙肝泰膠囊對(duì)四氯化碳所致肝損傷小鼠轉(zhuǎn)氨酶的影響探討龍牙肝泰膠囊的藥效學(xué)作用。

1 材料與儀器

1.1 藥品與試劑

對(duì)照藥物：黑龍江葵花藥業(yè)股份有限公司，護(hù)肝片，批號(hào)：201409044

受試藥物：黑龍江久久藥業(yè)有限責(zé)任公司，龍牙肝泰膠囊，批號(hào)：20160301

四氯化碳（CCl4）分析純：沈陽化學(xué)試劑廠

谷草轉(zhuǎn)氨酶(AST)試劑盒：南京建成生物工程研究所

谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)試劑盒：南京建成生物工程研究所

1.2 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物

昆明小鼠，雌性等比，體重在20-24g之間，由藥物安全評(píng)價(jià)中心（黑龍江中醫(yī)藥大學(xué)）提供，合格證編號(hào)：SCXK（黑）2008-04-001。

1.3 實(shí)驗(yàn)儀器

分析天平(梅特勒)；美國(guó)MD全自動(dòng)生化分析儀。

2 實(shí)驗(yàn)方法

取小鼠60只，按體重隨機(jī)分為空白對(duì)照組，模型對(duì)照組，護(hù)肝片（陽對(duì)藥）對(duì)照組，龍牙肝泰膠囊高、中、低劑量組，共6組，每組10只動(dòng)物。

連續(xù)灌胃給藥7天，1次/天。各組劑量分別為：龍牙肝泰膠囊低劑量組42mg/kg，龍牙肝泰膠囊中劑量組84mg/kg，龍牙肝泰膠囊高劑量組168mg/kg，護(hù)肝片（陽對(duì)藥）組545mg/kg。模型對(duì)照組與空白對(duì)照組動(dòng)物按10ml/kg體重給予生理鹽水。于第六天晚上十二點(diǎn)后禁食,不禁水,于第七天早六點(diǎn)灌胃給藥,2小時(shí)后開始造模。腹腔注射CCl4的橄欖油溶液，造成急性肝損傷模型，造模劑量為10ml/kg，濃度為0.12%。繼續(xù)禁食不禁水，24小時(shí)后，摘眼球取血測(cè)定AST、ALT水平。

2.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

采用SPSS軟件16.0對(duì)各組數(shù)據(jù)結(jié)果進(jìn)行t檢驗(yàn)，結(jié)果用均值加減標(biāo)準(zhǔn)差的形式表示。

3 結(jié)果

3.1 龍牙肝泰膠囊對(duì)急性肝損傷小鼠血清中AST水平的影響

研究結(jié)果表明，模型組與空白組相比，血清中AST水平顯著性升高（P0.01）；龍牙肝泰高、中、低劑量組、陽對(duì)組與模型組相比，血清中AST水平明顯降低（P0.01）。結(jié)果見表1。

表1 龍牙肝泰膠囊對(duì)急性肝損傷小鼠血清中AST水平的影響

表1 龍牙肝泰膠囊對(duì)急性肝損傷小鼠血清中AST水平的影響

注：與模型組比較，P0.01；與空白組比較，P0.01。

組 別n劑量（mg/kg）AST（U/L）空 白 組10-99.82±16.5模 型 組10-204.14±28.6陽 對(duì) 組9545104.53±9.5高劑量組1042102.18±12.3中劑量組984132.94±18.9低劑量組10166137.20±18.0

3.2 龍牙肝泰膠囊對(duì)急性肝損傷小鼠血清中ALT水平的影響

研究結(jié)果表明，模型組與空白組相比，血清中ALT水平顯著性升高（P0.01）；龍牙肝泰高、中、低劑量組、陽對(duì)組與模型組相比，血清中ALT水平明顯降低（P0.01）。結(jié)果見表2。

表2 龍牙肝泰膠囊對(duì)急性肝損傷小鼠血清中ALT水平的影響

表2 龍牙肝泰膠囊對(duì)急性肝損傷小鼠血清中ALT水平的影響

注：與模型組比較，P0.01；與空白組比較，P0.01。

組 別n劑量（mg/kg）ALT（U/L）空 白 組10-31.94±10.53模 型 組10-62.39±15.58陽 對(duì) 組954538.86±4.55高劑量組104228.92±3.42中劑量組98435.92±5.30低劑量組1016638.13±4.39

4 討論

過氧化反應(yīng)引起的繼發(fā)性脂肪變性、壞死、水腫、細(xì)胞器損傷以及轉(zhuǎn)氨酶升高是四氯化碳所致肝損傷模型的主要原因，這與臨床多種肝病發(fā)病機(jī)制類似[1-3]。所以，此法多用于保肝、護(hù)肝藥物的篩選與評(píng)價(jià)。通過本實(shí)驗(yàn)，我們可以看出龍牙肝泰膠囊作為獨(dú)家中藥提取制劑能夠有效降低CCl4所致肝損傷引起的轉(zhuǎn)氨酶升高，保護(hù)肝細(xì)胞[4]。

[1] 黃晶.美洲大蠊抗CCl4肝損傷藥效學(xué)研究及水提物制劑研究[D].成都中醫(yī)藥大學(xué),2014.

[2] 王曉源.復(fù)方胡黃連膠囊治療肝損傷的藥效學(xué)研究[D].黑龍江中醫(yī)藥大學(xué),2010.

[3] 崔紅花,于治成,沈志濱等.狗肝菜不同相對(duì)分子質(zhì)量多糖對(duì)四氯化碳所致大鼠急性肝損傷的保護(hù)作用[J].中國(guó)實(shí)驗(yàn)方劑學(xué)雜志.2013,19,(09): 185-190.

[4] 耿放,張寧,方衡,等.逍遙散對(duì)急性肝損傷大鼠模型保護(hù)作用的代謝組學(xué)研究[J].中藥材,2014,32,(02):275-279.

黑龍江省科技廳“黑龍江省應(yīng)用技術(shù)研究與開發(fā)計(jì)劃”（GC12C104）；全國(guó)中藥特色技術(shù)傳承人才培訓(xùn)項(xiàng)目；黑龍江中醫(yī)藥大學(xué)?；稹懊嫔享?xiàng)目”（201739）。

** 黑龍江中醫(yī)藥大學(xué)附屬第一醫(yī)院·150040

*** 通訊作者