李桂云　黃忠寶　卞伯偉　胡麗

【摘要】 目的：探討血必凈聯(lián)合鹽酸氨溴索對百草枯中毒的大鼠急性肺損傷氧化應(yīng)激的調(diào)節(jié)作用。方法：選擇50只健康成年SD大鼠為研究對象，將其隨機分為五組，空白對照組（A組）、單純百草枯中毒組（B組）、血必凈治療組（C組）、鹽酸氨溴索治療組（D組）、聯(lián)合治療組（E組），每組10只，A組腹腔注射生理鹽水25 mg/kg，其余四組采用腹腔注射20%百草枯溶液25 mg/kg誘導(dǎo)大鼠急性百草枯中毒模型，并給予C組、D組、E組大鼠相應(yīng)治療；檢測比較各組大鼠肺組織中丙二醛（MDA）、谷胱甘肽（GSH）含量及超氧化物歧化酶（SOD）活性變化。結(jié)果：W/D比值、SOD活性及MDA、GSH水平組間比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。兩兩比較后發(fā)現(xiàn)C組、D組、E組W/D比值較B組明顯下降，與A組相比差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05），E組W/D比C組、D組低，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）；C組、D組、E組SOD活性較A組明顯低，顯著高于B組（P<0.05），E組SOD活性比D組高（P<0.05），與C組比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）；C組、D組、E組MDA水平均比B組低，GSH水平均高于B組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05），與A組相比差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05），C組、D組、E組間兩兩比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）。結(jié)論：血必凈與鹽酸氨溴索均能降低百草枯中毒導(dǎo)致急性肺損傷大鼠體內(nèi)的氧化應(yīng)激反應(yīng)，聯(lián)合使用具有明確的療效，可能存在協(xié)同作用，能為臨床治療提供一定參考。

【關(guān)鍵詞】 血必凈； 鹽酸氨溴索； 百草枯； 急性肺損傷； 氧化應(yīng)激

doi：10.14033/j.cnki.cfmr.2017.20.079 文獻標識碼 B 文章編號 1674-6805（2017）20-0155-02

百草枯是一種有機雜環(huán)類接觸性除草劑，具有極強的毒性，可通過多種途徑侵入機體引起中毒，對人體組織造成損傷，導(dǎo)致肺纖維化、肝壞死、心腎衰竭等，死亡率極高[1-2]，是除了有機磷中毒外最常見的農(nóng)藥中毒類型。目前關(guān)于百草枯中毒機制不明確，可能包括自由基損傷、炎癥介質(zhì)作用等方面。血必凈是主要成分為紅花黃色素A的中成藥，具有清除氧自由基、降低內(nèi)毒素、調(diào)節(jié)免疫的作用[3]；近期研究發(fā)現(xiàn)，鹽酸氨溴索對百草枯中毒大鼠肺損傷具有保護作用，而兩種藥物聯(lián)合應(yīng)用對百草枯中毒大鼠急性肺損傷是否有協(xié)同保護作用的研究在國內(nèi)尚屬空白[4-5]。為此，本次研究通過建立大鼠百草枯中毒肺損傷模型，比較相關(guān)指標變化，初步探討了血必凈聯(lián)合氨溴索對百草枯中毒所致大鼠急性肺損傷的作用，現(xiàn)報道如下。

1 材料與方法

1.1 材料

實驗動物：50只健康成年的SPF級雄性SD大鼠。

藥品：百草枯溶液（20%），生產(chǎn)公司：山東三元工貿(mào)有限公司；血必凈，生產(chǎn)公司：天津紅日藥業(yè)股份有限公司，批準文號：國藥準字Z20040033；AH，生產(chǎn)公司：浙江康恩貝制藥股份有限公司，批準文號：國藥準字H20123225。

儀器與試劑：臺式高速離心機；超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）、谷胱甘肽（GSH）測定試劑盒；紫外可見分光光度計等。

1.2 實驗方法

將選取的50只大鼠隨機分為五組：空白對照組（A組）、單純百草枯中毒組（B組）、血必凈治療組（C組）、鹽酸氨溴索治療組（D組），聯(lián)合治療組（E組），每組10只。A組大鼠腹腔注射生理鹽水25 mg/kg，其余四組采用一次性腹腔注射20%百草枯溶液25 mg/kg，誘導(dǎo)大鼠急性百草枯中毒模型。造模后，B組大鼠僅腹腔注射生理鹽水10 ml/kg；C組大鼠腹腔注射血必凈注射液10 ml/kg；D組大鼠腹腔注射鹽酸氨溴索注射液10 ml/kg；

E組大鼠腹腔注射鹽酸氨溴索注射液10 ml/kg和血必凈注射液10 ml/kg。五組大鼠于相同環(huán)境下，以相同飼料喂養(yǎng)，連續(xù)給藥培養(yǎng)7 d后行各項檢查。

1.3 檢測方法

取大鼠右肺上葉，置于子天平上稱重，記為濕重，再移至70 ℃電熱恒溫干燥箱中干燥至恒重，后再次置于子天平上稱重，記為干重，肺組織濕重/干重比（W/D）值=濕重/干重。

取大鼠左肺，組織研磨成勻漿后，置于離心機內(nèi)，以3000 r/min轉(zhuǎn)速離心10 min后，取上清液，測定SOD、MDA和GSH水平，嚴格按照試劑盒規(guī)定比色測定吸光度，計算MDA、GSH濃度及SOD活性。

1.4 統(tǒng)計學(xué)處理

本次研究均由SPSS 17.0軟件包處理分析數(shù)據(jù)資料，計量資料用均數(shù)±標準差（x±s）表示，采用方差分析和SNK-q檢驗，P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

五組大鼠W/D比值、SOD活性及MDA、GSH水平組間比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。兩兩比較后發(fā)現(xiàn)C組、D組、E組W/D比值較B組明顯低，與A組相比差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05），E組W/D比C組、D組低，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）；C組、D組、E組SOD活性較A組明顯低，顯著高于B組（P<0.05），E組SOD活性比D組高（P<0.05），與C組比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）；C組、D組、E組MDA水平均比B組低，GSH水平均高于B組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05），與A組相比差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05），C組、D組、E組間兩兩比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）

3 討論

百草枯中毒累及多個臟器，嚴重時可導(dǎo)致多器官功能不全，其中肺是主要靶器官，早期表現(xiàn)為急性肺損傷，其中毒機制目前尚未完全明確，可能與自由基氧化損傷、炎癥反應(yīng)及誘導(dǎo)細胞凋亡有關(guān)[6-7]。由于百草枯中毒發(fā)病機制不清，導(dǎo)致其臨床治療難度較大，尚無特效治療方案，洗胃、催吐等基礎(chǔ)治療及血液凈化是目前提高救治成功率的有效措施[8]，但臨床效果并不理想，患者死亡率依然居高不下。endprint

急性肺損傷的出現(xiàn)使患者呼吸系統(tǒng)出現(xiàn)障礙，同時可能促進其他器官的損傷，導(dǎo)致患者最終死于臟器功能衰竭或呼吸衰竭。因此，及時有效地改善百草枯中毒患者早期急性肺損傷癥狀對提高患者生存率及搶救成功后的生存質(zhì)量均具有重要意義。本次研究以百草枯誘導(dǎo)引發(fā)急性肺損傷的大鼠模型為研究對象，對血必凈與鹽酸氨溴索的作用展開觀察。

本次研究結(jié)果顯示，分別給予百草枯中毒大鼠血必凈與鹽酸氨溴索單藥或聯(lián)合治療，統(tǒng)計分析后發(fā)現(xiàn)五組大鼠W/D比值、SOD活性及MDA、GSH水平組間差異幼統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。兩兩比較后可得出C組、D組、E組W/D比值較B組明顯低，與A組相比差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05），E組W/D比C組、D組低，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05），這說明血必凈與鹽酸氨溴索單藥或聯(lián)合治療對于改善W/D均有良好效果，能促進肺間質(zhì)及肺泡血管通透性改變，但是聯(lián)合用藥比單獨用藥療效更為理想；C組、D組、E組SOD活性較A組明顯低，顯著高于B組（P<0.05），E組SOD活性比D組高（P<0.05），與C組比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05），這體現(xiàn)了血必凈與鹽酸氨溴索單藥或聯(lián)合治療均能提高SOD活性，間接幫助機體清除多余自由基，降低氧化應(yīng)激損害；結(jié)果表明，單獨應(yīng)用鹽酸氨溴索效果比單獨應(yīng)用血必凈理想，但是兩藥聯(lián)合作用療效最佳；C組、D組、E組MDA水平均比B組低，GSH水平均高于B組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05），與A組相比差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05），C組、D組、E組間兩兩比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05），這說明血必凈與鹽酸氨溴索單藥或聯(lián)合治療對于改善患者體內(nèi)脂質(zhì)過氧化反應(yīng)有一定效果，但三種治療方法的改善效果差異不顯著。

綜上所述，血必凈與鹽酸氨溴索均能降低百草枯中毒導(dǎo)致急性肺損傷大鼠體內(nèi)的氧化應(yīng)激反應(yīng)，聯(lián)合使用具有明確的療效，可能存在協(xié)同作用，能為臨床治療提供一定參考；但目前缺乏對人體作用的臨床研究，投入使用仍待進行深入、大樣本量的研究。

參考文獻

[1] Dinis-Oliveira R J，Duarte J A，Sanchez-Navarro A，et al.Paraquat poisonings：mechanisms of lung toxicity， clinical features， and treatment[J].Critical Reviews in Toxicology，2008，38（1）：13-71.

[2] Lee Y，Lee J H， Seong A J，et al.Arterial lactate as a predictor of mortality in emergency department patients with paraquat intoxication[J].Clinical Toxicology，2012，50（1）：52-56.

[3]王光權(quán)，王龍.血必凈注射液對大鼠急性肺損傷的作用[J].現(xiàn)代預(yù)防醫(yī)學(xué)，2011，38（5）：996-998.

[4]馬玉騰，杜月菊，張軍立，等.鹽酸氨溴索對百草枯中毒大鼠肺SP-D表達及肺損傷的保護作用[J].中華急診醫(yī)學(xué)雜志，2013，22（7）：737-740.

[5]郭雪松.氨溴索對慢阻肺急性發(fā)作患者血清與痰液炎性介質(zhì)的影響[J].海南醫(yī)學(xué)院學(xué)報，2014，20（11）：1506-1508.

[6] Zhi Q M， Yang L T， Sun H C.Protective effect of ambroxol against parauat-induced pulmonary fibrosis in rats[J].Internal Medicine （Tokyo，Japan），2010，50（18）：1879-1887.

[7]葛玉霞.急性百草枯中毒肺損傷機制與保護研究的進展[J].中國急救醫(yī)學(xué)，2012，32（6）：550-553.

[8]韋海濤，姜軍，黃棟，等.血液凈化治療兒童急性中毒6例報告[J].貴州醫(yī)藥，2012，36（4）：329-330.

（收稿日期：2017-03-16）endprint