梁艷君 譚喜梅 黃燕瓊 秦華珍#

1 浙江中醫(yī)藥大學(xué)附屬第三醫(yī)院 浙江 杭州 310005

2 廣西中醫(yī)藥大學(xué) 廣西 南寧 530001

3 廣西中醫(yī)藥大學(xué)附屬瑞康醫(yī)院 廣西 南寧 530011

紅豆蔻等3味山姜屬中藥的提取工藝研究*

梁艷君1譚喜梅2黃燕瓊3秦華珍2#

1 浙江中醫(yī)藥大學(xué)附屬第三醫(yī)院 浙江 杭州 310005

2 廣西中醫(yī)藥大學(xué) 廣西 南寧 530001

3 廣西中醫(yī)藥大學(xué)附屬瑞康醫(yī)院 廣西 南寧 530011

目的：研究紅豆蔻、草豆蔻、益智3味中藥的最佳提取工藝。方法：運(yùn)用L9（34）正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)法優(yōu)選工藝，采用提取溶劑、溶劑倍量、提取時(shí)間、提取次數(shù)為因素的正交設(shè)計(jì)，以干膏率作為篩選指標(biāo)。結(jié)果：最佳提取工藝為：采用60%乙醇，溶劑倍量為30倍，提取時(shí)間為4h，提取次數(shù)2次。結(jié)論：所得結(jié)果的提取方法簡單、效率高。

紅豆蔻 草豆蔻 益智 正交試驗(yàn) 提取工藝

紅豆蔻、草豆蔻、益智均為姜科山姜屬（Alpinia L.）中藥，本實(shí)驗(yàn)采用L9（34）正交試驗(yàn)優(yōu)選提取條件，以藥材干膏率為考察指標(biāo)，確定3味中藥的最佳提取工藝條件，從而較完全地提取出有效成分，為后期進(jìn)行中藥親緣關(guān)系物質(zhì)基礎(chǔ)與藥性、效用相關(guān)研究奠定基礎(chǔ)。

表1 提取方法對藥材提取率的影響

1 材料

試驗(yàn)用紅豆蔻、草豆蔻、益智藥材經(jīng)廣西中醫(yī)藥大學(xué)中藥鑒定學(xué)教研室田慧教授鑒定均為姜科山姜屬（Alpinia L.）藥物。

2 方法與結(jié)果

2.1 單因素考察[1]：分別對提取方法[2]、乙醇體積分?jǐn)?shù)、乙醇用量及提取時(shí)間進(jìn)行單因素考察。每個(gè)試驗(yàn)組[3]均稱取藥材粗粉10g，分別加入相應(yīng)的溶劑，提取，過濾，得濾液。所得濾液均減壓回收溶劑，置于干燥的蒸發(fā)皿中水浴揮干溶劑，減壓干燥至恒重，稱重，計(jì)算干膏率，具體方法如下，結(jié)果見表1～5。由表1可知，紅豆蔻、草豆蔻和益智采用加熱回流提取方法提取率較高，所以選擇加熱回流提取法。由表2可知，3味山姜屬中藥采用甲醇提取率較高，但因甲醇毒性較大，所以選擇乙醇作為提取溶劑。由表3可知，采用60%乙醇回流提取所得干膏率最高，75%及80%乙醇回流提取所得干膏率也較高，但差別不大。由表4可知，隨著料液比的增加，藥材的提取率也隨之增加，但乙醇用量對提取得到的干膏率影響不大。由表5可知，采用加熱回流提取方法，隨著提取時(shí)間的延長藥材提取率相應(yīng)增加，但提取時(shí)間到4h和5h時(shí)提取率增加不明顯。

表2 提取溶劑對藥材提取率的影響

表3 乙醇濃度對藥材提取率的影響

表4 乙醇用量對藥材提取率的影響

表5 提取時(shí)間對藥材提取率的影響

2.2 正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)與結(jié)果：根據(jù)單因素試驗(yàn)結(jié)果，采用L9（34）正交設(shè)計(jì)[4]對乙醇濃度（%）、提取時(shí)間（h）、乙醇用量（倍）、空白對照進(jìn)行正交試驗(yàn)[5]，每個(gè)因素設(shè)3個(gè)水平[6]，詳見表6。

表6 正交試驗(yàn)因素水平安排表

繼以干膏率為考察指標(biāo)，進(jìn)行提取工藝優(yōu)選，試驗(yàn)結(jié)果見表7～12。由表7可知，影響紅豆蔻藥材干膏提取率的因素大小順序是A＞B＞C，最佳因素排列為A2B2C3，即加入30倍量的60%乙醇回流提取2次，每次4小時(shí)，提取得到的干膏量最多。

由表8可知，影響草豆蔻藥材干膏提取率的因素大小順序是A＞B＞C，最佳因素排列為A2B2C3，即加入30倍量的60%乙醇回流提取2次，每次4小時(shí)，提取得到的干膏量最多。

由表9可知，影響益智藥材干膏提取率的因素大小順序是A＞B＞C，最佳因素排列為A2B3C3，即加入30倍量的60%乙醇回流提取2次，每次5小時(shí)，提取得到的干膏量最多。

表7 紅豆蔻正交試驗(yàn)表與結(jié)果

表8 草豆蔻正交試驗(yàn)表與結(jié)果

表9 益智正交試驗(yàn)表與結(jié)果

表10 紅豆蔻方差分析結(jié)果

表11 草豆蔻方差分析結(jié)果

表12 益智方差分析結(jié)果

另由表10～12的方差分析結(jié)果可知，乙醇濃度、提取時(shí)間和乙醇用量對3味藥材的干膏提取率影響均有顯著性差異。

根據(jù)上述實(shí)驗(yàn)結(jié)果發(fā)現(xiàn)，影響紅豆蔻、草豆蔻和益智3味山姜屬中藥干膏提取率的因素存在一定的差異性，為了能夠更好地比較其化學(xué)成分的差異，應(yīng)選擇一致的提取工藝條件。綜合考慮這3味中藥的化學(xué)成分性質(zhì)和上述實(shí)驗(yàn)結(jié)果，可以得出結(jié)論，采用60%乙醇提取得到的浸膏量最多，所以確定這3味中藥提取工藝為：采用60%乙醇，溶劑倍量為30倍，提取時(shí)間為4h，提取次數(shù)2次。

2.3 最佳工藝驗(yàn)證：按照已優(yōu)選的最佳提取工藝對3批樣品進(jìn)行提取、制備、按前述方法對干膏率進(jìn)行測定，結(jié)果見表13。

表13 工藝驗(yàn)證結(jié)果

3 討論

由于山姜屬中藥化學(xué)成分復(fù)雜多樣，而浸膏得率在一定程度上可反映出中藥材中多種有效成分的提取率。本研究選擇浸膏得率作為考察指標(biāo)，采用單因素考察和正交設(shè)計(jì)方法優(yōu)選出的紅豆蔻、草豆蔻和益智3味山姜屬中藥的提取工藝為采用60%乙醇，溶劑倍量為30倍，提取時(shí)間為4h，提取次數(shù)2次。該方法穩(wěn)定、可行，重復(fù)性好，為中藥提取、化學(xué)成分分析及其藥理作用研究奠定了基礎(chǔ)。

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2017-05-16