王亞瓊 張華鋒 周 堅 顧炳仁
(蘇州市藥品檢驗檢測研究中心,江蘇蘇州215104)
冷背藥材,是指那些不常用或用量較小的藥材品種。在我國,植物、動物、礦石等來源藥材已達(dá)萬余個品種,而常用的藥材品種僅有數(shù)百個。冷背藥材品種繁多,采購困難,大部分需要自己采集。近幾年來,隨著人們保健意識的增強以及信息化產(chǎn)業(yè)的高速發(fā)展,越來越多的冷背藥材逐步得到開發(fā)利用,逐漸從冷背的后臺走向市場。本研究所選擇的藥材是在修訂《江蘇省中藥飲片炮制規(guī)范》的過程中發(fā)現(xiàn)并加以研究的一些冷僻品種,觀察了它們的顯微特征,現(xiàn)報道如下。
1.1 儀器 DFY-300粉碎機(溫嶺市林大機械有限公司);標(biāo)準(zhǔn)藥篩(遼寧省遼陽金屬制品廠);電熱恒溫水浴鍋(上海躍進(jìn)醫(yī)療器械有限公司);冰凍切片機CM1860(Leica,Genmany);顯微鏡BX43(OLYMPUS,Japan)。
1.2 試劑 甘油、水合氯醛、乙醇均為分析純,購自國藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司。
1.3 藥材 木槿皮、川桐皮、草大戟、香樟木、接骨木每個品種收集至少3批,主要為江蘇省內(nèi)飲片廠家提供,并自采原藥材1~2批為輔助參考,由蘇州市藥品檢驗檢測研究中心中藥室主任張華鋒鑒定。各檢測藥材樣品來源與批號見表1。
2.1 橫切片樣品制備及觀察 將樣品泡水軟化后,切成小塊,用冷凍膠固定,置冰凍切機切片。將切好的片純水沖洗,滴加水合氯醛試液3~5滴,加熱透化后置顯微鏡下,由低倍到高倍進(jìn)行觀察,并拍照記錄。
2.2 粉末樣品制備及觀察 取樣品粉末適量,滴加水合氯醛試液3~5滴,加熱透化后置顯微鏡下,由低倍到高倍進(jìn)行觀察,并拍照記錄。
表1 5種江蘇省冷背藥材檢測樣品來源
3.1 木槿皮 為錦葵科植物木槿Hibiscus syriacus L.的干燥樹皮。春、夏二季剝?nèi)?,曬干?/p>
3.1.1 性狀 多呈槽狀或單筒狀,長短不一,厚約1mm。外表面青灰白色或灰褐色,有彎曲的縱皺紋及點狀小突起(皮孔);內(nèi)表面淡黃白色,光滑,有細(xì)縱紋。質(zhì)韌,斷面強纖維性。氣微,味淡。
3.1.2 顯微鑒別 橫切面:木栓層由數(shù)十列不規(guī)則長方形細(xì)胞構(gòu)成,栓內(nèi)層窄。韌皮部占大部分,中柱鞘纖維呈束狀,在韌皮部外層斷續(xù)排列呈橫帶狀。初生射線向外呈喇叭狀,或瓶嘴狀,射線中散有眾多草酸鈣簇晶。
粉末灰白色。纖維成束,紋孔細(xì)小,圓形或斜縫狀,直徑5~31μm。草酸鈣簇晶眾多,直徑16~65μm,棱角鈍尖。木栓細(xì)胞淡黃棕色或近無色,表面觀呈類方形、類長方形或類多角形,壁稍厚,微彎曲。見圖1。
圖1 木槿皮顯微特征
3.2 川桐皮(刺楸) 為五加科植物刺楸Kalopanax septemlobus(Thumb.)Koidz.的干燥樹皮。初夏剝?nèi)∮嗅敶痰臉淦?,曬干?/p>
3.2.1 性狀 呈絲或塊狀。外表面黑褐色或灰褐色,有的可見破碎的釘刺,內(nèi)表面淡黃棕色至黃棕色。質(zhì)脆,斷面纖維性,略呈層片狀。氣微,味微辛,略有麻舌感。
3.2.2 顯微鑒別 橫切面:木栓層由數(shù)十列細(xì)胞組成,細(xì)胞類長方形,壁略增厚。較老的樹皮外側(cè)為落皮層,由木栓細(xì)胞環(huán)帶組成。釘刺部位基部為徑向延長的木化細(xì)胞,邊緣及尖部有纖維束。皮層較窄,有石細(xì)胞、簇晶散在。韌皮部較寬,纖維束環(huán)帶可達(dá)十?dāng)?shù)列,射線寬1~3列細(xì)胞,韌皮薄壁細(xì)胞也含有眾多草酸鈣結(jié)晶。
粉末灰棕色。草酸鈣簇晶眾多,直徑14~163μm,以50μm以上的多見,有的棱角寬大或帶方形,也有簇晶和方晶合生。草酸鈣方晶大小不一,直徑12~85μm。韌皮纖維較多,成束或單個散在,末端鈍圓,壁厚,木化,孔溝明顯,胞腔狹細(xì)。直徑16~77μm。釘刺中纖維壁厚,木化,孔溝一般不明顯,直徑18~57μm。石細(xì)胞呈類長圓形、類長方形或紡錘形,直徑35~55μm。分泌道多破碎,含細(xì)小油滴。木栓細(xì)胞無色或淡棕色,表面觀類長方形或類多角形。見圖2。
3.3 草大戟 為豆科植物美麗胡枝子Lespedeza formosa(Vog.)Koehne的干燥根皮。夏、秋兩季挖取根部,剝?nèi)「?,洗凈,曬干?/p>
3.3.1 性狀 呈卷筒狀或半卷筒段狀,厚0.1~0.5cm。外表皮灰棕色至棕褐色,粗糙,栓皮較疏松,易脫落。內(nèi)表皮紅棕色至暗棕色,具細(xì)縱紋。質(zhì)韌,不易折斷,斷面纖維性。氣微,味淡、微澀。
3.3.2 顯微鑒別 橫切面:木栓層為數(shù)列細(xì)胞,含紅棕色物,栓內(nèi)層窄,皮層和韌皮部散在大量晶纖維群和紅棕色分泌物,射線寬1~5列細(xì)胞。
粉末棕紅色。纖維成束或離散,細(xì)長,直徑10~20μm。纖維周圍薄壁細(xì)胞含草酸鈣方晶,形成晶纖維;草酸鈣方晶多見,呈菱形、方形或多面體,存在于薄壁細(xì)胞中。木栓細(xì)胞類長方形,內(nèi)含紅棕色物。見圖3。
圖3 草大戟顯微特征
3.4 香樟木 為樟科植物樟Cinnamomum camphora(L.)Presl.的干燥木材。鋸下樹干,砍、劈成小塊曬干。市場上多以帶皮藥材砍伐,混有皮部,而皮部的顯微特征最為特別。
3.4.1 性狀 為形狀、大小不一的木塊,表面紅棕色或暗棕色,橫斷面可見年輪,縱斷面有縱直走向的條紋。質(zhì)堅體輕。有特異的樟腦香氣,味微苦而辛涼。
3.4.2 顯微鑒別 橫切面:木栓層由數(shù)十列細(xì)胞組成,細(xì)胞類長方形,壁略增厚,有石細(xì)胞散在,在靠近皮層內(nèi)側(cè)有石細(xì)胞環(huán)帶。皮層較窄,有纖維和石細(xì)胞散在。韌皮部纖維極多,斷續(xù)數(shù)十列,石細(xì)胞群散在。韌皮部射線1~2列細(xì)胞。韌皮薄壁細(xì)胞和射線細(xì)胞中含棕色物。木質(zhì)部寬廣,木射線寬1~2列細(xì)胞。導(dǎo)管類圓形或圓多角形,有的含棕色樹脂。木纖維類圓形,壁稍厚,木化。
粉末黃棕色,韌皮纖維多數(shù),胞腔狹小,孔溝不明顯,壁略波狀彎曲,直徑17.8~48.5μm,長123.7~722.6μm。石細(xì)胞單個或成群,類方形,類長方形,類三角形,不規(guī)則長條狀,直徑21~59.8μm,長至184.5μm。淀粉粒類圓形,臍點點狀、星狀、人字狀,3復(fù)粒偶見,直徑4.0~22.1μm。木纖維成束,無色,木化,胞腔線形,直徑7.8~23μm。導(dǎo)管主要為具緣紋孔導(dǎo)管,直徑74~195μm。分泌物黃棕色。見圖4。
圖4 香樟木顯微特征
3.5 接骨木 為忍冬科植物接骨木Sambucus williamsii Hance的干燥莖枝。全年可采收,干燥。
3.5.1 性狀 莖呈圓柱形,長15~35cm,直徑1~5cm。表面黃棕色、灰褐色或綠褐色,有縱裂紋及多數(shù)圓點狀皮孔。質(zhì)堅硬,不易折斷,斷面不平坦,皮部薄,木部黃白色至黃色,髓部疏松,呈棕黃色海綿狀。氣微,味淡。
3.5.2 顯微鑒別 莖橫切面:木栓層由10余列細(xì)胞組成。皮層由數(shù)層橢圓形薄壁細(xì)胞組成,內(nèi)側(cè)散在有纖維束,有的斷續(xù)呈環(huán),韌皮部薄壁細(xì)胞含草酸鈣砂晶,形成層明顯,木質(zhì)部寬廣。髓部細(xì)胞含紅棕色分泌物。
粉末淡黃色。分泌道紅棕色,直徑32.4~77.1μm。砂晶散在薄壁細(xì)胞中。木栓細(xì)胞類長方形,木化。皮層纖維長條形,平直,腔體寬大,直徑16.2~38.9μm。木纖維長條形,直徑10.2~25.8μm,夾有射線細(xì)胞。導(dǎo)管多為具緣紋孔導(dǎo)管,直徑15.5~30.7μm。見圖5。
圖5 接骨木顯微特征
隨著數(shù)碼成像技術(shù)的發(fā)展,各種組織、粉末的顯微特征不再以墨線圖的形式出現(xiàn),而是以彩色圖片的形式更加形象、真實地呈現(xiàn)。同時隨著各種智能化儀器和新技術(shù)的使用,也為顯微鑒別工作打開了新的局面[1-2]。本研究采用冰凍切機切片,直接水合氯醛透化觀察橫切面的特征,為細(xì)胞后含物的保存提供了保證,避免了傳統(tǒng)石蠟切片工藝復(fù)雜,細(xì)胞形態(tài)改變和后含物易丟失的缺點。
木槿皮、川桐皮、草大戟、香樟木、接骨木5種藥材飲片,在不同省份有的有著不同的來源,有的有著不同的藥用部位。本研究主要以《江蘇省中藥飲片炮制規(guī)范》[3-4]記載來源為準(zhǔn),收集藥材,進(jìn)行顯微鑒別研究。
木槿皮雖然為樹皮,但在飲片外觀上卻與杜仲、肉桂、厚樸等樹皮類藥材相差甚遠(yuǎn),更易與土荊皮、五加皮、香加皮混淆。從顯微特征上看,木槿皮的初生射線形狀特殊,并含有大量草酸鈣簇晶是鑒別要點,而土荊皮可見大量的黏液細(xì)胞,可見石細(xì)胞和樹脂細(xì)胞,五加皮的顯微特征為大量的樹脂道和草酸鈣簇晶,香加皮則含有乳汁管和草酸鈣方晶[5-7]。川桐皮在飲片外觀上,大型的釘刺很容易辨別,但飲片切制大小不一,釘刺也易脫落。川桐皮的顯微特征鑒別點在于韌皮部十?dāng)?shù)列的纖維束環(huán)帶,以及大型的簇晶和方晶合生草酸鈣結(jié)晶。草大戟在飲片外觀上和地骨皮較為類似,但地骨皮的顯微特征為大量的砂晶,草大戟為大量的晶纖維和紅棕色的分泌物。京大戟含草酸鈣簇晶,紅大戟含草酸高針晶,紫丹參無結(jié)晶類后含物[8]。香樟木在多省市的地方標(biāo)準(zhǔn)中多為去皮的木材[4-9],但實際飲片市場上以帶皮多見,且皮部和近皮處的樹脂量較心材處多。香樟木的鑒別點主要在于樹皮部位,木栓層內(nèi)側(cè)有石細(xì)胞環(huán)帶,韌皮部有斷續(xù)數(shù)十列纖維群及石細(xì)胞群。接骨木的鑒別點與《中華本草》資料有所差別,《中華本草》記載其皮層有網(wǎng)狀增厚的細(xì)胞群,韌皮部有紅棕色物質(zhì)[10],但在收集的3批飲片以及江蘇地區(qū)采集的3批原藥材中均未發(fā)現(xiàn)網(wǎng)狀增厚的細(xì)胞群,韌皮部也未發(fā)現(xiàn)紅棕色物質(zhì),卻在髓部發(fā)現(xiàn)紅棕色分泌道。推測接骨木的莖枝結(jié)構(gòu)可能存在地區(qū)差異,或者不同生長階段有著不同的特征,還需要進(jìn)一步研究加以確證。
冷背藥材由于使用量少,關(guān)注度低,文獻(xiàn)資料偏少,甚至沒有?,F(xiàn)在隨著冷背藥材逐漸走向市場,易出現(xiàn)混偽品,因此對冷背藥材進(jìn)行生藥學(xué)鑒別的研究迫在眉睫。本研究對江蘇省內(nèi)5種冷背藥材進(jìn)行了顯微特征研究,找到各自的顯微特征點,為今后的生藥學(xué)鑒別和混偽品的區(qū)分提供參考。
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