鄧奇風(fēng) 劉志強(qiáng) 范覺(jué)鑫 張 穎 肖淑華
(湖南九鼎動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)研究院,湖南長(zhǎng)沙 410003)
抗生素濫用在養(yǎng)殖業(yè)中問(wèn)題突出,一直備受人們關(guān)注。在養(yǎng)殖業(yè)不斷追求高生產(chǎn)效率的同時(shí),抗生素替代成為一項(xiàng)熱門(mén)研究。牛至油是世界范圍內(nèi)認(rèn)可的天然飼料添加劑,它能較好地促進(jìn)動(dòng)物生長(zhǎng)、提高動(dòng)物機(jī)體免疫力,無(wú)毒副作用,是一種天然、環(huán)保、安全的理想抗生素替代品。我國(guó)農(nóng)業(yè)部已經(jīng)批準(zhǔn)牛至油作為一種藥物飼料添加劑可長(zhǎng)期在飼料中添加。因其提取工藝較為簡(jiǎn)單,生產(chǎn)成本較抗生素低并隨工藝的改進(jìn)逐步下降,在現(xiàn)代畜禽生產(chǎn)中具有廣闊的發(fā)展和應(yīng)用前景。
牛至油的主要成分為單萜類和雙環(huán)倍半萜類。GC-MS(氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀)常用來(lái)鑒別混合物質(zhì)中有機(jī)物成分分析?;魟?wù)貞等[6]采用GC-MS方法分析牛至油,檢測(cè)結(jié)果為單萜類占出峰面積的69.31%,雙環(huán)倍半萜類占20.25%。鄧雪華等[7]也利用GC-MS方法分析采自湖北植物牛至提取的精油,發(fā)現(xiàn)了69種成分,占總油量的98.28%,并指出主要成分為香芹酚,占比37.80%。牛至油的化學(xué)成分因不同種屬、產(chǎn)地、收割時(shí)間和加工工藝變化很大。趙海伊[8]對(duì)牛至油不同加工工藝研究對(duì)比,水蒸氣蒸餾法共鑒定出79個(gè)峰,相對(duì)面積94.97%;SDE法(同時(shí)蒸餾萃取法,是將有機(jī)溶劑和裝有提取物的蒸餾水同時(shí)加熱蒸餾的方法)共鑒定出71個(gè)峰,相對(duì)總面積97.38%;微波輔助水蒸氣法共鑒定出40個(gè)峰,相對(duì)總面積96.84%。三種方法制備精油中含量較多的是醇類和烯烴類。鄭國(guó)華等[9]研究指出,7月份提取的牛至油含量為5.53 mL/kg,其中百里香酚含量為0.177 g/mL,明顯高于其他月份。
牛至油呈淡黃色至紅棕色透明油狀液體,約占全草1%~10%(mL/100固體重),具有百里香油似的辛辣氣味,溶于乙醇和大多數(shù)非揮發(fā)性油,不溶于甘油和水。牛至油在4℃和20℃貯存24個(gè)月,其有效成分無(wú)損失[10];飼料、制劑和產(chǎn)品中牛至油具有較為穩(wěn)定的理化性質(zhì),在80℃以上,有效成分損失量約0.79%;當(dāng)溫度達(dá)到105℃時(shí),有效成分損失約2.01%。
牛至油中多酚類和萜類物質(zhì)是其抗菌作用的有效成分,其中多酚類物質(zhì)是牛至油抗菌、殺菌作用的主要成分。多酚類物質(zhì)抗菌機(jī)制是:作用于細(xì)菌細(xì)胞膜,使膜蛋白變性,一是通過(guò)減少三磷酸腺苷(ATP)合成和增加ATP消耗,抑制細(xì)菌生長(zhǎng);二是通過(guò)改變K+和H+的滲透性,導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi)滲透壓失衡,促使細(xì)菌死亡[11]。萜類物質(zhì)抗菌機(jī)制是:阻礙細(xì)菌DNA的自我復(fù)制,抑制細(xì)菌的繁殖和生長(zhǎng)過(guò)程[12]。
牛至油抗菌譜廣,使用后無(wú)抗藥性、無(wú)殘留等,其對(duì)大量的革蘭氏陽(yáng)性菌和革蘭氏陰性菌均有抗菌作用,對(duì)多種真菌也有抑制或殺滅的功效。Sivropoulou等[13]研究表明,牛至油對(duì)8種革蘭氏陽(yáng)性菌和革蘭氏陰性菌具有強(qiáng)烈的抑制作用,將其稀釋4 000~5 000倍,仍具有殺菌活性,并在試驗(yàn)過(guò)程中發(fā)現(xiàn)其還具有抗瘧原蟲(chóng)活性。林清華等[14]研究報(bào)道,牛至油對(duì)31株腸炎常見(jiàn)菌均有不同程度的殺菌和抑菌作用,其中金黃色葡萄球菌最為敏感,對(duì)綠膿桿菌的影響最弱,并指出抑菌濃度和殺菌濃度之間無(wú)一定的線性關(guān)系。Marino等[15]用牛至油作用于多種單一的革蘭氏陽(yáng)性菌和革蘭氏陰性菌,結(jié)果發(fā)現(xiàn),革蘭氏陰性菌中以大腸桿菌O157∶H7最敏感,革蘭氏陽(yáng)性菌中以李斯特桿菌最敏感。Abdelrhafour等[16]研究發(fā)現(xiàn),墨西哥地區(qū)的牛至油對(duì)真菌不同生長(zhǎng)階段都有抑制作用,過(guò)程抑制強(qiáng)度排序?yàn)榫z生長(zhǎng)>孢子萌發(fā)>芽孢生成。由此看來(lái),牛至油的抗真菌特性可用于飼料防霉保存,減少因飼料霉變引起的經(jīng)濟(jì)損失。此外,廖芳等[17]研究認(rèn)為牛至油是一種有效的抗痢疾桿菌藥物。
酚酸類和萜類物質(zhì)是牛至油抗氧化作用的有效成分。酚酸類化合物在其苯環(huán)上的酚羥基是抗氧化活性基團(tuán),其發(fā)揮抗氧化作用的機(jī)理與酚類一致,通過(guò)脫氫反應(yīng)清除烷氧自由基[18]。萜類發(fā)揮抗氧化作用的機(jī)理是:其含有大量的烯鍵,參與氧化還原反應(yīng),防止細(xì)胞膜和線粒體膜中不飽和脂肪酸被氧化,進(jìn)而維持細(xì)胞的正常功能。此外,牛至油能激活機(jī)體的內(nèi)源性抗氧化劑,調(diào)節(jié)抗氧化防御酶系活性,提高血清中超氧化物歧化酶(SOD)活性,增強(qiáng)機(jī)體清除氧自由基的能力,防止機(jī)體受脂質(zhì)過(guò)氧化損傷[19]。
Mejia等[20]對(duì)比多種天然藥物抗氧化活性,發(fā)現(xiàn)牛至精油具有很高的抗氧化活性。Ding等[21]在牛至油中分離出迷迭香酸酯,它具有較強(qiáng)的抗氧化和抗黑色素生成的作用。牛至油在食品保鮮方面表現(xiàn)出很好的抗氧化性能,Kintzios等[22]將牛至油添加于食用香油中可防止油脂被氧化,說(shuō)明牛至油具有較好的抗氧化作用。Skandamis等[23]將牛至油添加于肉糜中可有效抑制微生物的生長(zhǎng),防止食物腐敗。Vichi等[24]報(bào)道牛至油可延長(zhǎng)食物的貨架壽命。此外,牛至油能改善肉類感官品質(zhì)及肉質(zhì)風(fēng)味,肉類色澤是評(píng)價(jià)肉類品質(zhì)好壞的重要指標(biāo)之一。有研究表明,牛至油在一定程度上遏制了肌紅蛋白的氧化,使得肉品色澤不易惡化[25]。此外還有研究報(bào)道添加牛至油對(duì)肉質(zhì)也有一定改善作用[26]。
牛至油促進(jìn)動(dòng)物生長(zhǎng)作用主要表現(xiàn)在兩個(gè)方面:一是牛至油中乙酸檜萜烯酯含量相對(duì)較高,具有濃郁的芳香味,具有一定的誘食性。二是牛至油中的百里香酚和香芹酚能夠增強(qiáng)腸道的屏障功能,抑制有害微生物增殖,維持腸道菌落平衡,提高動(dòng)物對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的吸收能力。咼于明[27]在雞飼料中添加牛至油和維吉尼霉素對(duì)比研究發(fā)現(xiàn),添加牛至油組小腸蛋白酶的活性比添加維吉尼霉素組高50%,牛至油組飼料轉(zhuǎn)化率優(yōu)于維吉尼霉素組。牛至油在提高動(dòng)物采食量方面以肉牛最為明顯,張善芝[28]研究牛至油對(duì)夏季肉牛生長(zhǎng)性能的影響,按精料的0.045%添加牛至油10%效果表明,采食量顯著高于對(duì)照組(<0.05),且腹瀉指數(shù)顯著低于對(duì)照組(<0.05)。
牛至油增強(qiáng)動(dòng)物機(jī)體免疫力的方式是通過(guò)提高巨噬細(xì)胞的吞噬能力,增加吞噬細(xì)胞數(shù)目,促進(jìn)機(jī)體免疫器官的生長(zhǎng)發(fā)育,提高臟器指數(shù)等發(fā)揮免疫調(diào)節(jié)作用。牛至油高劑量與低劑量添加對(duì)機(jī)體免疫力產(chǎn)生不同效應(yīng)。林清華等[29]研究指出,高劑量牛至油不利于小鼠免疫,甚至起阻礙作用;而低劑量的牛至油可提高小鼠的體液免疫效應(yīng)。馮志華等[30]對(duì)比牛至油和喹乙醇在獺兔飼糧中的效果,發(fā)現(xiàn)牛至油組脾質(zhì)量、胸腺質(zhì)量及胸腺指數(shù)等升高趨勢(shì)較喹乙醇組更顯著。陳會(huì)良等[31]在羅曼蛋雞日糧中添加牛至油,一個(gè)月后發(fā)現(xiàn),牛至油組高于對(duì)照組血清新城疫抗體效價(jià)。王秋梅[32]在42日齡肉仔雞中添加100 mg/kg牛至油,發(fā)現(xiàn)肉雞T淋巴細(xì)胞的酸性α-醋酸萘酯酶的活性和T淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化率顯著高于對(duì)照組(<0.05)。國(guó)外研究者也得出相似結(jié)論,Malayoglu等[33]在肉雞日糧中添加500 mg/kg牛至油,發(fā)現(xiàn)肉雞血液中IgG含量較對(duì)照組有很大提升,且新城疫抗體滴度顯著增加(<0.05)。Hashemipour等[34]研究指出,長(zhǎng)期添加牛至油的主要成分香芹酚和百里香酚能夠增強(qiáng)肉雞的細(xì)胞和體液免疫。此外,有研究表明,香芹酚和百里香酚能加速腸絨毛表面成熟腔上皮細(xì)胞更新,從而減少病原體對(duì)腔上皮細(xì)胞的感染,提高營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的吸收力[35]。
牛至油在仔豬生產(chǎn)中的應(yīng)用研究較多,主要集中在預(yù)防和控制仔豬斷奶應(yīng)激、提高日增重、提高飼料轉(zhuǎn)化率、減少仔豬腹瀉。王萌[36]在斷奶仔豬日糧中添加牛至油(1 g/kg),能顯著提高平均日增重(<0.05),極顯著降低腹瀉率(<0.01)。姚佳等[37]在日糧中添加適量的牛至油能改善斷奶仔豬生產(chǎn)性能,顯著提高日采食量,降低料肉比,并提高血清中的總抗氧化水平(T-AOC),提高谷胱甘肽過(guò)氧化酶(GSH-PX)、SOD活性,降低脂質(zhì)過(guò)氧化產(chǎn)物丙二醛(MDA)含量,增強(qiáng)機(jī)體的抗氧化性能。在牛至油和抗生素添加于斷奶仔豬日糧對(duì)比研究中,汪莉等[38]在斷奶仔豬日糧中添加20 mg/kg牛至油,結(jié)果表明,牛至油能提高飼料中蛋白質(zhì)和干物質(zhì)的消化率、提高日增重、降低仔豬腹瀉率,還有緩解應(yīng)激的作用。黃國(guó)清等[39]研究指出,牛至油、金霉素和“金霉素+黃霉素”添加于仔豬日糧中,在日增重、料肉比、收益等方面的表現(xiàn)為“金霉素+黃霉素”>牛至油>金霉素。韓慶功等[40]對(duì)比研究牛至油與抗生素(硫酸黏桿菌素+恩拉霉素)在仔豬生產(chǎn)中的應(yīng)用效果,牛至油組較對(duì)照組和抗生素組日增質(zhì)量分別顯著提高18.03%(<0.05)、14.89% (<0.05),同時(shí)添加牛至油組仔豬糞便中大腸桿菌數(shù)量比對(duì)照組、抗生素組少,而乳酸桿菌、雙歧桿菌數(shù)量均比對(duì)照組、抗生素組多。此外,牛至油預(yù)防和治療仔豬大腸桿菌感染效果較好,肖希龍等[41]在試驗(yàn)仔豬經(jīng)人工接種大腸桿菌第5天后,添加5%牛至油預(yù)混劑后仔豬腹瀉癥狀基本消失,病死率為10%,而基礎(chǔ)日糧組發(fā)病率達(dá)70%,病死率高達(dá)60%。整體來(lái)說(shuō),牛至油在仔豬生產(chǎn)中的應(yīng)用效果顯著,適宜濃度牛至油可以替代抗生素使用。
牛至油在生長(zhǎng)育肥豬中的應(yīng)用主要集中在提高生產(chǎn)性能、增強(qiáng)機(jī)體免疫和替代抗生素等方面。牛至油提高育肥豬生產(chǎn)性能表現(xiàn)在提高其日增重和提高飼料利用率,劉應(yīng)林等[42]在育肥豬的基礎(chǔ)日糧中添加牛至草粉(含牛至油有效成分),能顯著提高育肥豬日增重、顯著提高飼料轉(zhuǎn)化率、大幅度降低腹瀉率并能改善試驗(yàn)豬毛色。周曉容等[43]在生長(zhǎng)豬日糧中添加100 g/噸的牛至油發(fā)現(xiàn),牛至油具有改善豬生產(chǎn)性能、提高養(yǎng)分表觀消化率的趨勢(shì)。在添加量的研究中,于向春等[44]飼喂198頭三元雜育肥豬,設(shè)兩個(gè)梯度200 mg/kg、500 mg/kg牛至油添加在基礎(chǔ)日糧中,添加500 mg/kg組可降低豬腹瀉率、發(fā)病率和死亡率分別為0.6%、0.59%和1.45%,提高日采食量,促進(jìn)生長(zhǎng),平均日增重為762.48 g,料肉比為2.37:1;200 mg/kg添加量對(duì)豬只健康狀況雖有一定程度的改善,但不明顯。在替代抗生素研究中,武晶等[45]對(duì)比金霉素(50 mg/kg)、牛至油(20 mg/kg)、益生素(1.5 g/kg)、營(yíng)養(yǎng)調(diào)控(提高日糧維生素E、維生素B、微量元素Zn、Mn和I水平)、牛至油+營(yíng)養(yǎng)調(diào)控、益生素+營(yíng)養(yǎng)調(diào)控的研究,結(jié)果表明,營(yíng)養(yǎng)調(diào)控同時(shí)添加牛至油完全可以替代抗生素。此外,在牛至油對(duì)比小肽的功效研究中,肖正中等[46]認(rèn)為20~40 kg小豬階段添加小肽+牛至油組效果最優(yōu)(生產(chǎn)性能和抗病效果),40~60 kg中豬階段添加小肽效果最優(yōu),60~90 kg大豬階段添加牛至油效果最好。在上述試驗(yàn)中牛至油添加量引起的效果反差可能與牛至油的百分含量不同有關(guān)。
牛至油在母豬生產(chǎn)中的應(yīng)用效果主要表現(xiàn)為:提高繁殖性能、改善泌乳性能和減少母豬便秘。國(guó)內(nèi)對(duì)牛至油在母豬生產(chǎn)中的應(yīng)用研究從2014年開(kāi)始,譚成全等[47]在妊娠和泌乳母豬基礎(chǔ)日糧中添加300 mg/kg止痢草油(牛至油),發(fā)現(xiàn)止痢草油組顯著提高母豬在泌乳期第3周采食量;并相應(yīng)地提高了仔豬第3周的平均日增重及第3周仔豬窩增重。敖江濤[48]在日糧中添加15 g/噸的止痢草油,研究結(jié)果與上述一致,試驗(yàn)結(jié)果還表明,添加止痢草油在一定程度上提高了體內(nèi)抗氧化酶的活力,降低了脂質(zhì)過(guò)氧化程度,減少了活性氧對(duì)DNA的攻擊,緩解了母豬產(chǎn)后的氧化應(yīng)激。在國(guó)外,研究牛至油對(duì)母豬生產(chǎn)的應(yīng)用較早,結(jié)論與國(guó)內(nèi)大體一致。Peter等[49]對(duì)3 710頭母豬(試驗(yàn)組母豬1 801頭,其中初產(chǎn)母豬601頭,經(jīng)產(chǎn)母豬1 200頭;對(duì)照組母豬1 809頭,其中初產(chǎn)母豬705頭,經(jīng)產(chǎn)母豬1 104頭)進(jìn)行產(chǎn)前和哺乳期間的飼養(yǎng)試驗(yàn),試驗(yàn)組母豬飼喂含1 000 mg/kg牛至(干燥的牛至葉和花,牛至油含量500 g/kg)日糧,對(duì)照組飼喂基礎(chǔ)日糧。結(jié)果表明,牛至組母豬年死亡率(4.02%)極顯著低于基礎(chǔ)日糧組(6.92%)(<0.01);牛至組母豬哺乳期的淘汰率(8.01%)顯著低于基礎(chǔ)日糧組(14.02%)(<0.05)。此外,牛至組母豬在產(chǎn)仔率、窩產(chǎn)活仔數(shù)、死胎率等方面都有顯著改善,另外通過(guò)飼喂試驗(yàn)發(fā)現(xiàn),牛至組經(jīng)產(chǎn)母豬日采食量顯著高于基礎(chǔ)日糧組的經(jīng)產(chǎn)母豬(<0.05)。Khajarern 等[50]指出牛至油中的香芹酚和麝香草酚對(duì)促進(jìn)和加速母豬小腸絨毛成熟更新起直接作用,有利于母豬維持在健康的狀態(tài)。綜上所述,可以看出母豬日糧中的牛至油能替代抗生素的使用效果,對(duì)母豬的生長(zhǎng)性能、繁殖性能、泌乳性能等都起到了一定的改善作用。
牛至油在育肥豬運(yùn)輸應(yīng)激上也有應(yīng)用研究,張挺[51]在育肥豬日糧中添加500 g/噸的牛至油產(chǎn)品,可提高宰前30天育肥豬的生長(zhǎng)性能。還能緩解高密度(252 kg/m2)、長(zhǎng)時(shí)間(5小時(shí))運(yùn)輸?shù)葢?yīng)激反應(yīng),從而有效緩解運(yùn)輸應(yīng)激所帶來(lái)的負(fù)效應(yīng)。牛至油對(duì)肉質(zhì)的改善效果優(yōu)于維生素E,牛至油可以減少肌肉滴水損失,改善肉色等指標(biāo)。在糞便除臭上,黃燦等[52]研究表明,牛至油的添加減少了豬糞尿中糞大腸桿菌和總厭氧菌的數(shù)量,并對(duì)揮發(fā)性脂肪酸的產(chǎn)生具有抑制作用。此外,牛至油和其他植物精油一樣,還有改善公豬精液品質(zhì)[53]和改善育肥豬肉質(zhì)[54]的作用。
牛至油是一種安全、高效、綠色、無(wú)配伍禁忌的天然藥物添加劑,其在豬生產(chǎn)應(yīng)用范圍廣,大小豬、公母豬均適宜,且效果均較好,在仔豬和育肥豬的應(yīng)用上,可在一定程度上替代抗生素使用,在未來(lái)豬生產(chǎn)中具有極其良好的應(yīng)用前景。但由于市場(chǎng)上牛至油產(chǎn)品參差不齊,所含有效成分比例不同,使用效果也不一致,所以牛至油在豬生產(chǎn)中的適宜添加量還有待研究。綜上所述,牛至油的開(kāi)發(fā)利用具有重要的現(xiàn)實(shí)意義。
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