HPLC快速檢測藥品的研究思路及其在降糖類藥品中的應(yīng)用分析

張 哲

（遼寧盤錦市檢驗檢測中心，遼寧 盤錦 124010）

隨著經(jīng)濟的發(fā)展，臨床對于藥品檢測工作的要求也越來越高，近年來近紅外線藥物快速檢測技術(shù)的運用很普遍，但是其應(yīng)用只能針對藥品的初步篩選，還會存在篩選死角將不能做進一步的確認[1]。目前臨床提出高效液色譜法針對藥品快速檢測，其具備高效性、檢測徹底、靈活度好、可重復(fù)使用、應(yīng)用廣泛等特點，為藥品的進一步檢測提供可靠依據(jù)[2]。

1 HPLC快速檢測藥品的研究思路建立

針對藥品的功能和其成分結(jié)構(gòu)分類不同，在參照現(xiàn)有藥品成分標準和相關(guān)文獻以及藥品成分介紹，建立HPLC快速檢測藥品的方法。

1.1 研究特點：針對高效液相色譜法的研究，在臨床操作來看相對簡單，不需要大量的臨床檢驗樣品，且根據(jù)色譜柱采用C8或者C18色譜柱，其流動相色一般不要用離子試劑，能夠?qū)⑵淇焖龠_到平衡，特有的色譜柱既能將區(qū)分結(jié)構(gòu)類似的藥品，要求最晚出峰時間不低于20 min[3]。新建立的色譜方式，著重于方法的重復(fù)性，對于藥品色譜的專屬相色區(qū)分與中國藥典方法相比，不對有關(guān)物質(zhì)強行要求實現(xiàn)完全分離。并且此類方法采用樣品的最小劑量，不浪費檢驗藥品的同時根據(jù)原法定方法的含量限度和裝量差異限度確定實際樣品的限度方式更加有效與經(jīng)濟。

1.2 方法思路：先將藥品功能和結(jié)構(gòu)進行分組，對于同一組藥品采用相同色譜系統(tǒng)檢測，實現(xiàn)采用盡可能少的色譜對多種藥品的分離分析，流動相色爭取少切換或不切換，從而實現(xiàn)快速檢測的目的。對相對保留時間和紫外光譜相似度雙指標進行藥品定性，增強其定性能力；在不同組別中各選擇一種藥品作為參照，建立標準相色，其余藥品根據(jù)標準相色來確定色譜分化，以達到少用或不用對照品就能達到藥品的定性和定量的目的。

1.3 考查內(nèi)容和方法驗證：針對不同藥品的考察研究，其內(nèi)容包括：①不同色譜條件的建立；②光譜庫的形成；③優(yōu)化光譜處理方法；④確定公用對照物質(zhì)；⑤規(guī)劃相對保留時間。再通過實驗室間驗證和不同方法的結(jié)果對比來驗證其方法的準確性。

2 降糖藥物驗證研究

2.1 基本資料：對二甲雙胍、苯乙雙胍、格列吡嗪、甲苯磺丁脲、格列波脲、格列齊特、格列本脲、格列美脲、格列喹酮、伏格列波糖、那格列奈、羅格列酮等12種降糖藥物由藥店、生產(chǎn)廠家、醫(yī)院等不同渠道獲取，采用津島雙泵液相色譜儀器進行藥品檢測分析，使用甲醇為色譜純，其余試劑為分析純，公用對照物質(zhì)采用羅格利酮緩釋片（5批次）。2.2 方法：將對照品和供試品分別配置成溶液，采用Inertsil ODS-SP色譜柱，流動相色為0.02 mol/L磷酸二氫鉀（磷酸調(diào)pH 3.5）-甲醇（30∶70），流速取1.0 mL/min，柱溫30 ℃，檢測波長選擇每個藥品都有紫外吸收的任意波長點。根據(jù)上述提供參照以及檢驗條件下針對12種不同藥品之間原始光譜相似度和一階導(dǎo)數(shù)光譜相似度進行確認，并擴大其藥品之間的差異，以便提高定性的準確性。在12種藥品中選擇一種作為對照物質(zhì)，確定其他藥品的校正因子。在對照物質(zhì)的選擇應(yīng)當(dāng)與被分析藥品在采用的色譜體系中完全分離，由于各色譜柱的性能差異選擇5根色譜柱，將其具有一致性的相對保留時間作為定性依據(jù)。將對照物和其他藥品相對色相根據(jù)色譜柱不同體現(xiàn)分別作出區(qū)分，確定其不同藥品之間的區(qū)別性。

3 討 論

高效液相色譜法是當(dāng)前臨床上較為常見的一類檢驗方式，又被稱為高壓液相色譜、高分離度液相色譜和近代柱色譜等，是色譜法檢驗中的重要類型。高效液相色譜法的本質(zhì)即是使用液體來作為流動相，并且使用高壓輸液系統(tǒng)，將兩種有著不同極性的單一溶劑或是不同比例的緩沖液以及混合溶劑等流動相裝入到有著固定相的色譜柱中。并且在色譜柱中各種成分被分離完全后，將其放入檢測器中檢測的一類方法。由于高效液相色譜法檢驗方法簡單、結(jié)果準確、花費時間較少等特點，當(dāng)前在化學(xué)檢驗、工業(yè)檢驗、醫(yī)學(xué)檢驗和法醫(yī)學(xué)檢驗等很多學(xué)科中均有著比較高的應(yīng)用概率。同時在諸多的研究中也顯示，使用高效液相色譜法的方法能夠起到較好的檢驗效果，因此分析高效液相色譜法的應(yīng)用非常重要。

本文針對高效液相色譜法對于藥品檢測分析的原理、思路以及方法進行研究探討；其相對傳統(tǒng)近紅外快速藥品檢測方式操作簡單，且能夠?qū)⑺幤烽g差異高效區(qū)分，可被大量運用于藥品的快速分析檢測[4]。在高效液相色譜法快速檢測藥品的過程中，區(qū)別不同藥品差異的主要因素在于對照物質(zhì)的確定，光譜建立以及其差異區(qū)分，在不同色譜領(lǐng)域做到盡量減少流動相色等操作，增加操作的可行性與準確性。

經(jīng)本研究對12種降糖藥的分析，確定不同藥品之間的相對差異，明確其對于疾病用藥藥理作用和差異效果，對于臨床選擇用藥起到很好的參照性作用。

經(jīng)本文研究可知，針對藥品使用高效液相色快速分析檢測方式，能有效區(qū)別藥品之間細微差異，幫助臨床用藥做具體選擇。

綜上所述，HPLC快速檢測藥品的研究思路操作過程簡單，也并不需要大量樣品，在藥物的快速分析方面效果較好，值得推廣使用。