單聯(lián)學(xué)
(大連市旅順口區(qū)人民醫(yī)院檢驗科,遼寧 大連 116041)
尿潛血是尿檢中的重要項目,常用的檢驗方法有尿液分析儀潛血反應(yīng)和尿液顯微鏡檢查紅細胞(鏡檢紅細胞)兩種。由于顯微鏡檢查對鑒別腎小球性與非腎小球血尿有重要的臨床價值,故有學(xué)者提出顯微鏡檢查是尿液紅細胞檢驗的“金標準”,是尿液分析儀無法替代的[1]。但是,近年來隨著尿液分析儀的迅速普及,測定參數(shù)向著快速、簡便準確的方向發(fā)展,為臨床提供了更好的診斷依據(jù)。顯微鏡檢查耗時費力,在一些醫(yī)院尿液顯微鏡檢查有逐漸被尿液分析儀替代的趨勢。為此,筆者對300例門診患者的隨機尿樣,用尿液分析儀潛血反應(yīng)和尿液顯微鏡鏡檢紅細胞兩種方法進行檢驗,并對兩種方法的符合程度進行比較。
1.1 尿液分析儀使用的是干化學(xué)試紙法,是根據(jù)多聯(lián)試帶上各模塊與尿液成分發(fā)生化學(xué)反應(yīng)后顏色變化的深淺來檢測尿液中的某化學(xué)物質(zhì),如直接檢測紅細胞、白細胞的胞質(zhì)內(nèi)涵物,間接推斷細胞的有無。尿液分析儀潛血反應(yīng)原理是:血紅蛋白(Hb)中亞鐵血紅素的過氧化物酶樣活性可使過氧化物分解釋放出新生態(tài),后者氧化底物鄰甲苯胺變成鄰聯(lián)甲苯胺發(fā)生由黃色→草綠色→深藍色的顏色變化。尿液顯微鏡檢查則是通過顯微鏡的放大作用直接將細胞等有形成分直觀真實的呈現(xiàn)在鏡下,是對底物的真實反映。
1.2 方法[2]
1.2.1 尿液分析儀檢查尿潛血,將10 mL新鮮尿液放入自動進樣器上,儀器進行測定,結(jié)果自動傳輸。報告形式分別為(-、+/-、+、++、+++、++++)使用迪瑞尿液分析儀及其配套的尿分析試紙條。
1.2.2 鏡檢取尿液10 mL于試管中以1500 r/min 離心5 min,棄去上清液,留沉淀0.2 mL。充分混勻后,取出約20 μL于載玻片上,加蓋玻片(2.0 cm×2.0 cm),然后用軟弱的光線以低倍鏡觀察全貌,以免漏掉量少而有意義的物體,再用高倍鏡辨認細胞。結(jié)果報告為×個/高倍視野(HP)。
300 例門診患者的隨機尿樣用兩種方法同時檢查。尿液分析儀潛血陽性,鏡檢有紅細胞的96例,鏡檢無紅細胞的34例。尿液分析儀潛血反應(yīng)陰性鏡檢無紅細胞的有161例,有紅細胞的有9例。兩種方法出現(xiàn)差異。
由于兩種方法的原理不同,影響因素也不同,因而兩種檢驗方法的結(jié)果存在一定的差異。
3.1 假陽性即尿液分析儀潛血反應(yīng)陽性,鏡檢陰性,其常見原因有:①血紅蛋白(Hb)尿液分析儀潛血反應(yīng)既能與完整的紅細胞發(fā)生陽性反應(yīng),也可與紅細胞溶解釋放的Hb發(fā)生陽性反應(yīng),而顯微鏡只能檢出尿中未溶解的紅細胞。健康人尿中Hb含量極微,定性為陰性。疾病時,尿中Hb有兩個來源:一是發(fā)生血管內(nèi)溶血,血漿Hb超過了結(jié)合珠蛋白的結(jié)合能力,游離Hb從尿中排出。另一個是尿路(尤其是上尿路)出血,紅細胞在高滲或(和)低滲時破壞Hb蛋白溢出。此時,尿液分析儀潛血反應(yīng)陽性,但尿沉渣鏡檢不見紅細胞或僅見紅細胞碎片。②肌紅蛋白(Mb)分子中也有血紅素基團,具有過氧化物酶活性。Mb主要存在于心肌和骨骼肌組織中,正常人尿中含量甚微,不能檢出。當(dāng)心肌與骨骼肌發(fā)生嚴重損傷時,血漿Mb增高,經(jīng)腎臟排泄,使尿中Mb含量增高,故潛血反應(yīng)呈陽性,鏡檢紅細胞為陰性。③某些患者尿中含有對熱不穩(wěn)定酶,也可使試劑塊發(fā)生顏色改變,出現(xiàn)潛血反應(yīng)陽性,鏡檢為陰性。④某些氧化性污染物,如次氯酸鹽會導(dǎo)致潛血反應(yīng)假陽性。⑤菌尿尿液是細菌良好的培養(yǎng)基,菌尿時有些細菌會產(chǎn)生氧化性物質(zhì),使得試劑塊發(fā)生顏色變化,導(dǎo)致潛血反應(yīng)陽性,鏡檢紅細胞為陰性[3]。此外,微生物過氧化物酶的侵入也可引起假陽性。⑥長時間存放及高溫實驗證明,標本不新鮮,存放時間長或高溫存放,使?jié)撗磻?yīng)的陽性率相對增高,而紅細胞鏡檢相對減少,測試結(jié)果有可能出現(xiàn)假陽性;因此,建議尿液標本存放時間不宜超過兩小時[3]。⑦尿試紙條的超期使用或被污染以及不妥善保存或操作方法的不正確,均可造成結(jié)果的假陽性⑧尿液分析儀靈敏度過高[0.2 mg/dL出現(xiàn)(++)],“級差”范圍太大0.8~50 mg/dL級為(+++)常會遇到儀器測試為(++),而鏡檢測試紅細胞為陰性,臨床上又找不到任何導(dǎo)致血紅蛋白尿原因的情況。再是尿中圓形的草酸鈣結(jié)晶的大小和形態(tài)和紅細胞非常相似,可導(dǎo)致尿液分析儀對紅細胞的錯誤判斷
3.2 假陰性即鏡檢陽性,尿液分析儀潛血反應(yīng)陰性,其常見原因有:①食物和藥物的應(yīng)影響由于飲食或藥物使尿液呈堿性時紅細胞溶解破裂,形成褐色顆粒,潛血反應(yīng)呈陽性,而鏡檢呈陰性;②維生素C尿液中大量存在時,能競爭性奪取反應(yīng)產(chǎn)生的氧,引起假陰性反應(yīng);③高比重、高蛋白尿影響結(jié)果。
兩種不同的方法檢測目的,可以區(qū)分尿潛血陽性患者的血尿原因,特別是顯微鏡鏡檢紅細胞形態(tài)可以區(qū)分紅細胞的來源,尿液分析儀的敏感快捷與顯微鏡的良好結(jié)合,缺一不可,結(jié)合臨床全面分析。
[1] 叢玉隆.尿液沉渣的標準化建議[J].中華醫(yī)學(xué)檢驗雜志,2002,25(4):249-251.
[2] 葉應(yīng)嫵,王毓三,申子瑜.全國臨床檢驗操作規(guī)程[M].3版.南京:東南大學(xué)出版社,2006:743-744.
[3] 樊云容,甘超,漆涌,等.UF-1000i全自動尿有形成分分析儀對尿路感染的診斷價值[J].中華醫(yī)學(xué)檢驗雜志,2009,32(7):635-638.