王 微，胡 毅，鄢人雨，蘭吉玉

（黔東南州農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全檢測(cè)中心 ，貴州 凱里 556000）

“柴米油鹽醬醋茶”，俗稱開(kāi)門(mén)七件事，可見(jiàn)茶的重要性。黔東南州是茶葉生產(chǎn)大州，茶產(chǎn)業(yè)亦是雷山縣的支柱產(chǎn)業(yè)，已成為茶區(qū)農(nóng)民增收致富奔小康的重要途徑。截止2016年，雷山縣茶園面積1.07萬(wàn)hm2（其中無(wú)公害茶葉基地達(dá)1萬(wàn)hm2，有機(jī)茶葉面積達(dá)到624.5 hm2）。登記茶企業(yè)156家，其中合作社51家、省級(jí)龍頭企業(yè)5家、州級(jí)龍頭企業(yè)7家、州級(jí)示范社1家、獲得對(duì)外貿(mào)易經(jīng)營(yíng)資格2家。

2013年，雷山縣獲中國(guó)國(guó)際茶文化研究會(huì)授予的“中國(guó)茶文化之鄉(xiāng)”，雷山銀球茶被授予“中華文化名茶”稱號(hào)；2015年，“雷山銀球茶”獲國(guó)家地理標(biāo)志保護(hù)產(chǎn)品、貴州省首屆春茶斗茶大賽綠茶類金獎(jiǎng)“茶王”和百年世博中國(guó)名茶金獎(jiǎng)。

目前，我國(guó)茶園中仍存在農(nóng)藥用量大、次數(shù)多甚至濫用等情況[1-2]，農(nóng)藥污染后的茶葉，除降低其品質(zhì)外，飲用隨之帶來(lái)的對(duì)人體的急慢性毒性問(wèn)題，特別是致癌和致突變等問(wèn)題更是讓人聞之后怕[3]。為了解雷山縣茶葉農(nóng)藥殘留情況，我們對(duì)雷山縣春茶農(nóng)藥殘留進(jìn)行了檢測(cè)分析。

1 材料與方法

1.1 儀器與試劑

1.1.1 儀器

分散機(jī)（德國(guó)IKA），旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀（上海亞榮生化儀器廠），氮吹儀（UGC-24C 北京優(yōu)晟），離心機(jī)（TG-16-WS 湖南湘儀），電子天平（JY5002 上海舜宇恒平），三重四級(jí)桿串聯(lián)氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀（7890B-7000C 安捷倫），三重四級(jí)桿串聯(lián)液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀（AcQuity H/TQ-Smicro沃特世）。

1.1.2 試劑

乙腈（色譜純），甲苯（色譜純），正己烷（TEDIA公司，色譜純），氯化鈉（分析純），無(wú)水硫酸鈉（分析純），Cleanert TPT柱（艾杰爾）。

1.2 樣品采集

雷山縣以春茶為主，約占該縣茶葉生產(chǎn)總量的90%以上，其中名優(yōu)茶占40%、大眾茶占60%。采集當(dāng)?shù)厣a(chǎn)的有代表性的綠茶、紅茶樣品，每份樣品取樣量不少于500 g，同時(shí)記錄原料來(lái)源和生產(chǎn)批次。采樣時(shí)間：春茶4月至5月15日。共采集樣品59個(gè)。

1.3 檢測(cè)指標(biāo)

吡蚜酮、蟲(chóng)螨腈、敵百蟲(chóng)、啶蟲(chóng)脒、甲胺磷、甲拌磷、甲基對(duì)硫磷、甲基硫環(huán)磷、克百威、硫環(huán)磷、氯唑磷、滅線磷、內(nèi)吸磷、氰戊菊酯、三氯殺螨醇、水胺硫磷、特丁硫磷、辛硫磷、氧樂(lè)果、茚蟲(chóng)威、滅多威、乙酰甲胺磷、氯氰菊酯、滴滴涕、溴氰菊酯、殺螟硫磷、氟氰戊菊酯、六六六、氯菊酯、苯醚甲環(huán)唑、除蟲(chóng)脲、硫丹、噻嗪酮、噠螨靈、丁醚脲、聯(lián)苯菊酯、氯氟氰菊酯和高效氯氟氰菊酯、甲氰菊酯、吡蟲(chóng)啉、多菌靈、噻蟲(chóng)嗪、氟氯氰菊酯和高效氟氯氰菊酯、噻螨酮、喹螨醚、氯噻啉、毒死蜱、殺撲磷、炔螨特、丙溴磷、噻蟲(chóng)胺、乙螨唑、氟苯蟲(chóng)酰胺、唑蟲(chóng)酰胺、氟蟲(chóng)脲、百菌清、噻蟲(chóng)啉、西瑪津、莠去津、吡唑醚菌酯、甲氨基阿維菌素苯甲酸鹽、甲萘威、草甘膦和草銨膦共63個(gè)農(nóng)藥指標(biāo)和1個(gè)化學(xué)物質(zhì)：蒽醌[4]。

1.4 樣品前處理

提取：稱取5.0 g茶葉于100 mL離心管中，加入 25 mL 乙腈，15000 r/min 均質(zhì)提取 1 min，4500 r/min 離心 5 min 取上清液 10 mL。凈化：用 Cleanert TPT 柱凈化后濃縮定容至 2 mL。待測(cè)上機(jī)：上述液體取1 mL進(jìn)行GC-MS/MS上機(jī)檢測(cè)，取1 mL用甲醇-水進(jìn)行溶劑交換并定容1 mL，進(jìn)行LC-MS/MS上機(jī)檢測(cè)。

1.5 數(shù)據(jù)分析方法

檢測(cè)后根據(jù)GB 2763-2016中規(guī)定的茶葉限量要求進(jìn)行判定樣品的合格率，同時(shí)作農(nóng)藥指標(biāo)的檢出規(guī)律和殘留水平等分析；并根據(jù)膳食評(píng)估公式對(duì)樣品進(jìn)行風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估分析。膳食暴露評(píng)估是食品危險(xiǎn)度評(píng)估的重要組成部分，也是膳食安全性的衡量指標(biāo)，分為長(zhǎng)期膳食攝入和慢性風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估

長(zhǎng)期膳食攝入評(píng)估[5]：按照FAO（聯(lián)合國(guó)糧食及農(nóng)業(yè)組織）統(tǒng)計(jì)數(shù)據(jù)[6]中國(guó)居民每人每天飲茶 11.4 g、成人體重按照60 kg，用公式（1）計(jì)算國(guó)家估算每日攝入量：

式中：NEDI—國(guó)家估算每日攝入量，單位mg/kg bw/d；STMR—農(nóng)產(chǎn)品的規(guī)范試驗(yàn)殘留平均值，單位mg/kg；F—農(nóng)產(chǎn)品的消費(fèi)量，單位kg/d；bw—人群平均體重，單位kg。

農(nóng)殘慢性攝入風(fēng)險(xiǎn)[7]用國(guó)家估算每日攝入量占ADI的百分比表示，用公式（2）計(jì)算：

式中：ADI—每日允許攝入量，單位mg/kg bw/d；%ADI—慢性風(fēng)險(xiǎn)。

%ADI≤100%時(shí)，表示慢性風(fēng)險(xiǎn)可以接受，%ADI越小，風(fēng)險(xiǎn)越??；當(dāng)%ADI＞100%時(shí)，表示有不可接受的慢性風(fēng)險(xiǎn)，%ADI越大，風(fēng)險(xiǎn)越大。

短期膳食攝入評(píng)估[8]：根據(jù)世界衛(wèi)生組織數(shù)據(jù)，中國(guó)居民茶葉消費(fèi)的大份餐（LP）每天為 75.88 g。

式中：NESTI—國(guó)家估計(jì)急性攝入量，單位mg/kg bw/d；LP—大份餐，即某類食品一餐的最大消費(fèi)量，一般以日消費(fèi)量的97.5百分位點(diǎn)值為準(zhǔn)；單位kg/d；HR—最高殘留量，單位mg/kg；%ARfD — 急性膳食攝入風(fēng)險(xiǎn)；SM—安全界限，單位mg/kg。

%ARf D 越小風(fēng)險(xiǎn)越小，當(dāng) % ARf D ≤ 100%時(shí)，表示風(fēng)險(xiǎn)在可以接受范圍；反之，% ARf D＞100%時(shí)，表示風(fēng)險(xiǎn)不可以接受。

借鑒 VRC 的獸藥殘留風(fēng)險(xiǎn)排序矩陣[9]，并用農(nóng)藥毒性指標(biāo)代替獸藥藥性指標(biāo)，進(jìn)行農(nóng)藥殘留風(fēng)險(xiǎn)排序。用公式（6）計(jì)算農(nóng)藥使用頻率：

公式（7）計(jì)算各樣品中各農(nóng)藥殘留的風(fēng)險(xiǎn)得分（S）：

其中：FOD—農(nóng)藥使用頻率；P—為果實(shí)發(fā)育日數(shù)，單位為d（天）；T—果實(shí)發(fā)育過(guò)程中使用該農(nóng)藥的次數(shù) ；A—毒性得分；B—毒效得分；C—膳食比例得分；D—農(nóng)藥使用頻率得分；E—高暴露人群得分；F—?dú)埩羲降梅?；S—?dú)埩麸L(fēng)險(xiǎn)得分。

毒性（A）采用急性經(jīng)口毒性（LD50）；毒效（B）采用ADI值；殘留水平采用殘留檢測(cè)值；膳食比例根據(jù)中國(guó)茶葉產(chǎn)量、出口量及貯藏?fù)p耗率推算中國(guó)居民茶葉暴露量占總膳食的比例。每種農(nóng)藥殘留的風(fēng)險(xiǎn)得分以該農(nóng)藥在所有樣品中殘留風(fēng)險(xiǎn)得分平均值計(jì)算，風(fēng)險(xiǎn)得分越大，殘留風(fēng)險(xiǎn)越高。

2 結(jié)果與分析

2.1 回收率與精密度

本 實(shí) 驗(yàn)方法 在 GB/T 23204-2008[10]和 GB 23200.13-2016[11]的前處理方法上進(jìn)行了優(yōu)化，使前處理更簡(jiǎn)單、便捷，一個(gè)前處理后能同時(shí)進(jìn)行GC-MS/MS和LC-MS/MS上機(jī)檢測(cè)。本方法采用乙腈提取，能很好的提取出大部分農(nóng)藥殘留；與GB/T 23204-2008標(biāo)準(zhǔn)相比，減少了一個(gè)濃縮步驟，能盡量減少前處理中的損失；同時(shí)采用TPT柱進(jìn)行凈化，能很好的去除色素和雜質(zhì)[12]。本方法的大部分農(nóng)藥在添加量為0.1 mg/kg時(shí)，回收率在85%～105%之間，表示該方法滿足檢測(cè)要求；部分指標(biāo)如甲胺磷、乙酰甲胺磷、氧樂(lè)果、氟胺氰菊酯和丁醚脲等的回收率為80%～120%，其回收率仍在可行范圍；相對(duì)偏差RSD值在1.8%～5.6%之間，RSD＜10%，表示該方法的精密度較好。

2.2 樣品的檢測(cè)結(jié)果

59份樣品中，共檢出含農(nóng)藥殘留樣品33份，檢出率55.9%，未檢出農(nóng)藥殘留樣品26份。按照食品中農(nóng)藥最大殘留限量GB 2763-2016[13]中規(guī)定值，樣品合格率為100%；其中檢出指標(biāo)17個(gè)，檢測(cè)項(xiàng)次101次（表1）。

由表1可見(jiàn)，草甘膦、聯(lián)苯菊酯、唑蟲(chóng)酰胺、氯氟氰菊酯、噻嗪酮等5種農(nóng)殘檢出率較高。其中，檢出率最高的為草甘膦和聯(lián)苯菊酯，其次是唑蟲(chóng)酰胺和氯氟氰菊酯。唑蟲(chóng)酰胺在GB 2763-2016中沒(méi)有規(guī)定其最大殘留限量，其檢出范圍在0.0141～0.4402 mg/kg，無(wú)法判定殘留情況。此外，檢出率較高、在GB 2763-2016中沒(méi)有規(guī)定其最大殘留限量的吡唑醚菌酯，其檢出率達(dá)到 10.17%，檢出范圍 0.0093～0.0681 mg/kg。另檢出率較高的噻嗪酮，檢出率達(dá)到16.95%，但其殘留限量為10 mg/kg，檢出值低于殘留限量標(biāo)準(zhǔn)10倍以上，可視為較安全的。而在GB 2763-2016中雖沒(méi)有規(guī)定最大殘留限量指標(biāo)的唑蟲(chóng)酰胺、吡唑醚菌酯、毒死蜱3種農(nóng)藥，但仍有一定的使用和檢出，應(yīng)引起重視。

2.3 樣品風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估

2.3.1 慢性膳食攝入風(fēng)險(xiǎn)

根據(jù)膳食評(píng)估公式計(jì)算得到表2。從表2可以看出，17個(gè)農(nóng)藥的慢性風(fēng)險(xiǎn)（%ADI）均小于100%，表示慢性風(fēng)險(xiǎn)可以接受。%ADI越小表示慢性風(fēng)險(xiǎn)越小，表2中所有指標(biāo)的慢性風(fēng)險(xiǎn)均小于1%（0.004%～0.544%），表示雷山茶葉的慢性風(fēng)險(xiǎn)是完全可以接受的，且均很低。其中檢出率最高的草甘膦的慢性風(fēng)險(xiǎn)為0.004%，遠(yuǎn)低于1%，風(fēng)險(xiǎn)可以接受，但是除草劑的使用不僅僅影響茶葉的品質(zhì)，還會(huì)破壞環(huán)境的生態(tài)平衡，仍需慎重使用。檢出農(nóng)藥中最高的聯(lián)苯菊酯的慢性風(fēng)險(xiǎn)值為0.544%，也小于1%。

2.3.2 急性膳食攝入風(fēng)險(xiǎn)

根據(jù)世界衛(wèi)生組織（WHO）數(shù)據(jù)庫(kù)，除草甘膦、噠螨靈和唑蟲(chóng)酰胺3個(gè)指標(biāo)沒(méi)有急性參考劑量（ARfD）外，其余指標(biāo)的急性參考劑量（ARfD）見(jiàn)表2。急性風(fēng)險(xiǎn)（%ARfD）＜100%時(shí)，急性風(fēng)險(xiǎn)可接受。表2可以看出，雷山茶葉14項(xiàng)農(nóng)藥急性風(fēng)險(xiǎn)（%ARfD）均＜100%，急性風(fēng)險(xiǎn)都可接受，%ARfD范圍在0.007%～42.285%。但是聯(lián)苯菊酯的急性風(fēng)險(xiǎn)%ARfD為42.285%，急性風(fēng)險(xiǎn)較高，應(yīng)引起重視。結(jié)果表明，所檢農(nóng)藥的最高殘留值均低于安全界限（SM），進(jìn)一步證實(shí)了這些農(nóng)藥的急性膳食風(fēng)險(xiǎn)很低。

表1 茶葉中農(nóng)藥殘留檢出結(jié)果Table 1 Determination result of pesticides residues in tea

表2 農(nóng)藥殘留慢性風(fēng)險(xiǎn)和急性風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估Table 2 Chronic and acute risk assessment of pesticide residues in Tea

2.3.3 農(nóng)藥殘留風(fēng)險(xiǎn)排序

根據(jù)中國(guó)茶葉產(chǎn)量、出口量及貯藏?fù)p耗率推算，中國(guó)居民茶葉暴露量占總膳食比例小于2.5%，因此膳食比例得分（C）為0；按照農(nóng)藥標(biāo)簽和調(diào)研資料顯示農(nóng)藥每季在茶樹(shù)上使用次數(shù)最多不超過(guò)3次，按最大3次計(jì)，每季按90 d計(jì)算，則農(nóng)藥使用頻率評(píng)分（D）為1分。由于無(wú)確定性資料判定是否存在高暴露人群，因此沒(méi)有高暴露人群得分（E）為3分。由表2可見(jiàn)每種農(nóng)藥的殘留水平，計(jì)算得到每種農(nóng)藥的殘留水平得分。殘留水平中的MRL值以GB 2763-2016中限量值來(lái)作為參考值，其中毒死蜱、唑蟲(chóng)酰胺和吡唑醚菌酯沒(méi)有限量要求，則以歐盟標(biāo)準(zhǔn)中茶葉限量要求作為參考。

圖1 茶葉中17種農(nóng)藥殘留的風(fēng)險(xiǎn)排序（A：高風(fēng)險(xiǎn)；B：中風(fēng)險(xiǎn)；C：低風(fēng)險(xiǎn)）Fig.1 Ranking of residue risk of 17 pesticides in Tea

借鑒 VRC 獸藥殘留風(fēng)險(xiǎn)排序矩陣，根據(jù)公式（4）計(jì)算各農(nóng)藥的殘留風(fēng)險(xiǎn)得分，進(jìn)行茶葉產(chǎn)品中農(nóng)藥殘留風(fēng)險(xiǎn)排序，結(jié)果如圖1所示。根據(jù)各農(nóng)藥的殘留風(fēng)險(xiǎn)得分將風(fēng)險(xiǎn)大小劃分為3類，第1類為高風(fēng)險(xiǎn)農(nóng)藥，風(fēng)險(xiǎn)得分均≥20，共有3種，分別為毒死蜱、聯(lián)苯菊酯和唑蟲(chóng)酰胺；第2類為中風(fēng)險(xiǎn)農(nóng)藥，風(fēng)險(xiǎn)得分在15～20之間，共有8種；第3類為低風(fēng)險(xiǎn)農(nóng)藥，共有6種，風(fēng)險(xiǎn)得分介于10～15之間。17種農(nóng)藥在低、中和高風(fēng)險(xiǎn)水平的比例分別為35.3%、47.1%和17.6%。由此可見(jiàn)，茶葉中農(nóng)藥殘留總體上處在中低風(fēng)險(xiǎn)水平，但需重點(diǎn)關(guān)注3種高風(fēng)險(xiǎn)水平的農(nóng)藥。

3 結(jié)論與建議

增加檢測(cè)指標(biāo)后，農(nóng)藥檢出率大幅提高[14]。本次實(shí)驗(yàn)可看出：本次采集的59份樣品，農(nóng)藥殘留檢出率為55.9%，檢出指標(biāo)均遠(yuǎn)低于GB 2763-2016規(guī)定的最大殘留限量，全部合格；其中，有26份未檢出任何農(nóng)藥殘留，占44.1%。所有樣品均未檢出含有化學(xué)污染物蒽醌。所檢出的農(nóng)藥慢性攝入風(fēng)險(xiǎn)和急性攝入風(fēng)險(xiǎn)均在可接受范圍，且大部分都很低。所檢出農(nóng)藥中，大部分是中低風(fēng)險(xiǎn)農(nóng)藥（82.4%），高風(fēng)險(xiǎn)農(nóng)藥僅為3種（17.6%）。

黔東南州雷山縣地勢(shì)較高，茶園位置在海拔900～1400 m之間，且初春氣溫較低，因此，茶樹(shù)的病蟲(chóng)害相對(duì)較少。據(jù)調(diào)查，雷山茶園病蟲(chóng)害春季均較少，隨氣溫和雨水量的增加，以夏秋季節(jié)病蟲(chóng)害為主。因此，夏秋季節(jié)的病蟲(chóng)害可能會(huì)導(dǎo)致農(nóng)藥的大量使用，從而增大農(nóng)藥殘留風(fēng)險(xiǎn)。但春茶農(nóng)藥檢出率較高，所以夏秋季節(jié)農(nóng)藥殘留問(wèn)題應(yīng)更加重視。建議首先從源頭抓起，科學(xué)合理用藥，注意農(nóng)藥的安全間隔期。其次，政府相關(guān)部門(mén)加強(qiáng)農(nóng)資市場(chǎng)和基地監(jiān)管，禁止銷售、使用國(guó)家禁用農(nóng)藥。同時(shí)，大力推廣物理防治和生物農(nóng)藥、植物源農(nóng)藥或者水浸出率低的農(nóng)藥。

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