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      一起豬弓形蟲和鏈球菌混合感染的診斷與防治

      2018-02-05 11:23:13郎利敏王克領(lǐng)張立憲徐引弟焦文強胡德林
      養(yǎng)豬 2018年1期
      關(guān)鍵詞:磺胺類豬鏈球菌弓形蟲

      郎利敏,王克領(lǐng),張立憲,游 一,徐引弟,焦文強,胡德林

      (1.河南省農(nóng)業(yè)科學(xué)院畜牧獸醫(yī)研究所,河南 鄭州 450002;2.商水縣畜牧局動物衛(wèi)生監(jiān)督所,商水 466100)

      豬弓形蟲病是由剛第弓形蟲引起的一種人獸共患原蟲病,以高熱稽留、呼吸困難、死亡為主要特征,磺胺類藥物對其有良好的治療效果,其他藥物無效[1]。豬鏈球菌病是由致病性鏈球菌引起的一種急性、敗血癥型、腦膜腦炎型的人獸共患傳染病,以高熱、氣喘、神經(jīng)癥狀、關(guān)節(jié)腫大、皮膚發(fā)紅、急性死亡等為主要特征[2]。

      隨著集約化、規(guī)?;B(yǎng)豬業(yè)的發(fā)展,飼養(yǎng)密度增加,豬免疫抑制性疾病、豬群抵抗力下降等因素的存在,目前豬弓形蟲病和鏈球菌病在豬場時有發(fā)生,由于這兩種疫病在臨床癥狀、剖檢病理變化方面和豬瘟、藍耳病、偽狂犬病等有相似之處,很容易發(fā)生誤診;另外近些年由于抗生素類藥物的大量使用,豬鏈球菌對很多抗生素類藥物產(chǎn)生耐藥性,如果不能及時使用敏感藥物治療,會造成極大的損失。2017年8月,河南開封某肥育豬場發(fā)生一起豬弓形蟲和鏈球菌混合感染疫情,由于未能及時確診和采取正確的措施,損失嚴(yán)重,現(xiàn)將本次疫情的診斷過程、治療結(jié)果和體會報告如下。

      1 發(fā)病情況

      發(fā)病豬場存欄50 kg左右肥育豬600頭,2017年8月初豬群出現(xiàn)發(fā)燒、減食,病豬呼吸困難,皮膚發(fā)紅,有的急性死亡。發(fā)病前期使用替米考星和氟苯尼考治療7 d,未能控制疫情,期間注射了豬瘟疫苗和偽狂犬病疫苗,仍不見好轉(zhuǎn),然后使用磺胺六甲氧嘧啶拌料,病豬注射復(fù)方長效磺胺,疫情稍有緩解,但每天會出現(xiàn)3~5頭病豬,仍有急性死亡病豬。本次疫情持續(xù)20多天,無法控制,遂來河南省農(nóng)業(yè)科學(xué)院動物疫病診斷中心就診。

      2 臨床癥狀

      病豬高熱,體溫41.5~42.0℃,精神沉郁,采食量下降或廢絕,呼吸困難,呈明顯的腹式呼吸,眼結(jié)膜潮紅,發(fā)病初期頭部、四肢、腹下出現(xiàn)紫紅色出血斑,后期全身紫紅色,個別豬有神經(jīng)癥狀、跛行,有急性死亡,死亡豬口、鼻流出淡紅色泡沫狀液體。

      3 剖檢病變

      剖檢病死豬3頭,淋巴結(jié)腫大、出血,切面有灰白色干酪樣壞死灶;肺臟紫紅色,彌漫性大葉性肺炎,肺間質(zhì)增寬,充滿黃色膠凍樣水腫液(圖1);胸腔、心包腔有少量淡黃色透明滲出液;心肌腫大,表面有少量出血點;肝臟腫大,質(zhì)硬,暗紅色,有大量灰白色、灰黃色粟粒大小壞死灶,有鮮紅色出血點(圖2);脾臟腫大、出血,邊緣有少量梗死灶;有2頭皮下水腫,脂肪黃染,有1頭后肢關(guān)節(jié)腫脹,內(nèi)有黏稠、渾濁關(guān)節(jié)液。

      圖1 肺間質(zhì)增寬,充滿膠凍樣水腫液

      圖2 肝臟大量壞死灶、出血點

      4 實驗室檢測

      4.1 弓形蟲檢測

      4.1.1 弓形蟲體檢測 無菌操作取病豬的肝、脾、肺門淋巴結(jié)等涂片,干燥固定,經(jīng)姬姆薩氏法染色后,低倍鏡觀察,發(fā)現(xiàn)少量半月形的弓形蟲滋養(yǎng)體,胞漿呈淺藍色,核呈深藍紫色,偏于蟲體一端,核與尖端之間有顆粒。

      4.1.2 弓形蟲血清抗體檢測 采集病豬血清7頭份、同群健康豬血清6頭份,使用中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院蘭州獸醫(yī)研究所生產(chǎn)的弓形蟲抗體間接血凝檢測試劑進行弓形蟲抗體檢測,結(jié)果發(fā)病豬弓形蟲抗體呈陽性6頭,陽性率 86%,同群健康豬弓形蟲抗體呈陽性只有1頭,陽性率17%。

      4.2 細菌分離、鑒定和藥敏試驗

      4.2.1 細菌分離培養(yǎng) 無菌操作取病死豬的心血、肝、脾、淋巴結(jié)等組織分別涂抹接種普通營養(yǎng)瓊脂平板、綿羊鮮血營養(yǎng)瓊脂平板,37℃培養(yǎng),觀察至24 h后,普通營養(yǎng)瓊脂平板上無細菌生長,鮮血瓊脂平板上形成半透明、表面光滑濕潤、灰白色露滴樣的小菌落,呈明顯的β溶血。挑取典型菌落,涂片,革蘭氏染色鏡檢,可見革蘭氏陽性球菌或球桿菌,散在或成雙,部分呈短鏈狀排列(圖3)。

      圖3 豬鏈球菌菌體形態(tài)

      4.2.2 細菌PCR鑒定 參照文獻[3-4]根據(jù)豬鏈球菌gdh基因序列設(shè)計引物,上游引物:5-GCAGCGTAT TCTGTCAAACG-3′,下游引物:5-CCATGGACAGAT AAAGATGG-3′,PCR擴增的產(chǎn)物為689 bp大小的片段,引物由上海生工生物工程公司合成,按照常規(guī)PCR檢測方法進行核酸提取和擴增,PCR產(chǎn)物經(jīng)1.0%瓊脂糖凝膠進行電泳,擴增出了689 bp大小的預(yù)期目的條帶(圖4),證明本次分離到的為鏈球菌。

      圖4 鏈球菌PCR擴增結(jié)果

      4.2.3 細菌藥敏試驗 參照文獻[5],采用 K-B紙片擴散法進行試驗。將分離鑒定好的細菌接種于綿羊全血瓊脂平皿,涂勻,選取常用的抗生素的藥敏紙片貼于培養(yǎng)基上,于 37℃培養(yǎng) 24 h,測量抑菌圈直徑,根據(jù)抑菌圈的大小判定分離株對藥物的敏感性。結(jié)果表明,對鏈球菌(SS)高度敏感的藥物有:阿莫西林、頭孢氨芐、頭孢噻肟、利福平、頭孢拉定、恩諾沙星 、頭孢噻呋 ;中度敏感藥物:頭孢他啶、氯霉素;耐藥藥物:林可霉素、氟苯尼考、諾氟沙星、紅霉素、磺胺六甲氧嘧啶、復(fù)方新諾明、多西環(huán)素。

      4.3 病毒核酸檢測(PCR)

      采集發(fā)病豬的肺臟、脾臟、淋巴結(jié)、腦組織等,應(yīng)用常規(guī)PCR方法,進行豬瘟病毒、偽狂犬病病毒、藍耳病病毒的核酸檢測,均為陰性。

      5 綜合防治措施

      綜合發(fā)病情況、臨床癥狀、剖檢變化和實驗室檢測結(jié)果,確診該起疫情為豬弓形蟲和鏈球菌混合感染。

      (1)將病豬隔離、單獨飼養(yǎng),部分病程較長、病情嚴(yán)重的豬淘汰并實行嚴(yán)格的無害化處理。清除糞污,采用3%燒堿水溶液對全場地面及用具進行徹底消毒,杜絕貓、狗在豬場活動,做好滅鼠工作。

      (2)考慮到該豬場磺胺類藥已經(jīng)使用7 d(磺胺類藥物連續(xù)使用不得超過7 d),且剛停止使用該藥,根據(jù)鏈球菌藥敏試驗結(jié)果,先全群飼料中添加10%阿莫西林預(yù)混劑1 kg/t飼料、10%恩諾沙星預(yù)混劑2 kg/t飼料、扶正解毒散1 kg/t飼料,混勻,連用7 d后停藥,再飼料添加磺胺氯達嗪1 kg/t飼料、扶正解毒散 1 kg/t飼料,混勻,連用7 d。飲水中添加優(yōu)質(zhì)電解質(zhì)多維1 kg/t、葡萄糖5 kg/t,自由飲用,連用 15 d。

      病豬注射頭孢噻呋,按說明書使用,肌肉注射0.1 mg/kg體重,每天1次,連用4次。期間新發(fā)病豬使用磺胺間甲氧嘧啶注射,采用上述措施3 d后,豬群中新發(fā)病例明顯減少,部分病豬精神、食欲等有所好轉(zhuǎn);1周后豬群基本正常,有零星發(fā)病豬,使用磺胺藥注射后很快治愈,兩周后豬群全部恢復(fù)正常,期間有17頭嚴(yán)重病豬治療無效,死亡。

      6 小結(jié)與體會

      (1)當(dāng)前豬場弓形蟲病和鏈球菌病都是較為常見的疫病,相關(guān)病例報道很多,但有關(guān)兩者混合感染的報道較為少見。本病例通過采用實驗室檢測、加強飼養(yǎng)管理、交替使用對弓形蟲有效的磺胺類藥物和對鏈球菌敏感的藥物,很快控制了疫情,取得了良好的治療效果,說明對本次疫情診斷正確、治療措施得當(dāng)。

      (2)弓形蟲病存在發(fā)病快、死亡率高等特點,只有磺胺類藥物對其有效,如能及時確診、及時用藥,能很快得到控制[6]。但是,弓形蟲病和鏈球菌病、豬瘟、藍耳病、豬肺疫等在臨床癥狀上很相似,難以區(qū)分,生產(chǎn)中經(jīng)常出現(xiàn)誤診,不能及時采取有針對性的措施而貽誤病情,造成較大的傷亡。因此,豬場出現(xiàn)疫情時,應(yīng)及時到專業(yè)機構(gòu)進行實驗室檢測,盡早確定發(fā)病原因,采取相關(guān)措施。

      (3)磺胺類藥物經(jīng)常被豬場用來治療鏈球菌病,但近年來有文獻報道鏈球菌已經(jīng)對磺胺類藥物產(chǎn)生了耐藥性[7-9]。本次病例藥敏結(jié)果表明:該場分離的鏈球菌對復(fù)方新諾明、磺胺六甲氧嘧啶均為耐藥,這也是本次病例在發(fā)病期間使用過磺胺類藥物,卻未能控制疫情的原因。伴隨著我國養(yǎng)豬業(yè)的快速發(fā)展,抗菌藥物濫用導(dǎo)致細菌的耐藥性越來越嚴(yán)重,因此豬場應(yīng)在發(fā)生疫情時,不僅要及時確診病原,還要在有細菌性病原感染時,進行藥敏試驗,篩選出對本場菌株敏感的藥物,正確添加,才能及時控制疫情,減少損失。

      [1]宣長和,任鳳蘭,孫福先.豬病學(xué)[M].北京:中國農(nóng)業(yè)科技出版社,1996:448-452.

      [2]蔡寶祥.家畜傳染病學(xué)[M].第4版.北京:中國農(nóng)業(yè)出版社,2001:91-99.

      [3]何孔旺,倪艷秀,王繼春,等.豬鏈球菌分子流行病學(xué)[J].中國人畜共患病雜志,2002,18(5):45-47.

      [4]徐引弟,王治方,李海利,等.傳染性胸膜肺炎和豬鏈球菌混合感染的診斷與防治[J].養(yǎng)豬,2017(2):103-104.

      [5]郝春艷,王利勤,王晶玨.豬鏈球菌的分離鑒定及藥敏試驗[J].動物醫(yī)學(xué)進展,2010,31(5):124-128.

      [6]張玲娟.豬弓形蟲病的診斷與治療[J].中國畜禽種業(yè),2016(2):105-106.

      [7]易新健,劉準(zhǔn),凌云志,等.豬鏈球菌耐藥現(xiàn)狀分析及防控[J].養(yǎng)豬,2017(4):107-108.

      [8]閆若潛,趙明軍,張志凌,等.河南省致病性豬鏈球菌血清型及耐藥性狀況調(diào)查[J].河南畜牧獸醫(yī)(綜合版),2007,28(5):25-27.

      [9]劉靜,李賢賢,張鵬,等.豬鏈球菌的分離鑒定及對常用抗菌藥物的耐藥性[J].中國獸醫(yī)雜志,2012,48(7):30-33.

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