周文宗， 張鶯鶯， 涂尾龍， 王洪洋， 曹建國， 吳華莉， 呂巍巍， 談永松

(上海市農(nóng)業(yè)科學(xué)院，上海 201106)

寬體金線蛭(Whitmaniapigra)隸屬環(huán)節(jié)動物門(Annelida)、蛭綱(Hirudinea)、真蛭亞綱(Euhirudinea)、無吻蛭目(Arhynchobdellida)、黃蛭科(Haemopidae)、金線蛭屬(Whitmania)。近年來，由于寬體金線蛭具有抗凝血、溶解血栓等特有的藥用和保健價值[1]，其在心血管疾病藥物開發(fā)方面有巨大的市場潛力。同時，由于其養(yǎng)殖周期短且效益好，其人工養(yǎng)殖規(guī)模越來越大，受到了養(yǎng)殖者、消費者和研究人員的青睞。目前國內(nèi)研究人員對寬體金線蛭的養(yǎng)殖技術(shù)[2-5]、生活習(xí)性[6-7]、養(yǎng)殖模式[8-10]、藥理作用[11-13]、環(huán)境適應(yīng)性[14-16]等領(lǐng)域作了一些報道。然而對于養(yǎng)殖密度對寬體金線蛭生長性能的影響還鮮有報道。寬體金線蛭是一種群居性水生動物，養(yǎng)殖密度的不同會對其生長性能造成不同的影響。本試驗通過構(gòu)建圍隔系統(tǒng)研究不同的養(yǎng)殖密度對寬體金線蛭生長性能的影響，旨在篩選出最佳的寬體金線蛭養(yǎng)殖密度，以期為當(dāng)?shù)仞B(yǎng)殖人員提供參考依據(jù)，促進(jìn)寬體金線蛭養(yǎng)殖業(yè)的發(fā)展。

1 材料與方法

1.1 試驗材料

試驗在上海市青浦區(qū)鑫盛水產(chǎn)養(yǎng)殖專業(yè)合作社進(jìn)行，所用的寬體金線蛭為2016年繁殖的同一批青年苗種，體質(zhì)肥滿、體型正常，體表光滑且無傷病，初始體長為(5.74±0.74) cm，初始體質(zhì)量為(4.37±0.83) g。

1.2 網(wǎng)箱

采用室外網(wǎng)箱養(yǎng)殖寬體金線蛭，網(wǎng)箱設(shè)在池塘中，為長方體，容積為60 m3(30 m×3 m×1 m)。

1.3 試驗設(shè)計和養(yǎng)殖管理

共設(shè)置4個試驗組(D1、D2、D3、D4)，養(yǎng)殖密度分別為30、40、50、60 ind./m2，每組3個平行。飼養(yǎng)用的福壽螺(Pomaceacanaliculata)是合作社在水泥池中培養(yǎng)的，中華圓田螺(Cipangopaludinacahayensis)購自附近的商販，養(yǎng)殖用水從附近的河里抽取，經(jīng)過沉淀和凈化后使用。每隔2 d向網(wǎng)箱中投喂中華園田螺和福壽螺1次，投喂72 h后撈出殘余餌料，每隔3 d換水1/3。每隔100 m安裝5 m高的防鳥網(wǎng)，防止飛鳥捕捉寬體金線蛭。每次投喂福壽螺和中華圓田螺前，先用2%的聚維酮碘溶液將其浸泡5 min再投喂。試驗持續(xù)35 d。

1.4 測定指標(biāo)

試驗于2016年7月24日開始，自苗種放至圍欄中飼養(yǎng)，每隔5 d測定1次體質(zhì)量和體長指標(biāo)，測定時間為08：30—10：30；試驗歷時35 d，于2016年8月27日結(jié)束。試驗結(jié)束后，隨機選取寬體金線蛭，先用紙吸干蛭體表面的水分，再用電子天平(精確到0.000 1 g)和電子數(shù)顯游標(biāo)卡尺(精確到0.01 mm)分別測量各試驗組的終末體質(zhì)量和終末體長。

在正常情況下，每條寬體金線蛭平均每日增加體質(zhì)量的單位為克(g)，生產(chǎn)上常以此作為統(tǒng)計寬體金線蛭生長速率的重要指標(biāo)[17-18]。日增體質(zhì)量公式如下：

ADG=(mt-m0)/t。

(1)

在正常狀態(tài)下，日增體長是指單條水蛭平均每日增加的體長，單位為厘米(cm)。日增體長(ADL)公式如下：

ADL=(Lt-L0)/t。

(2)

存活率是指養(yǎng)殖一段時間后，撈出并且成活的條數(shù)占初始投放條數(shù)的百分比。存活率(SR)公式如下：

SR=Nt/N0×100%。

(3)

特定生長率是指生長率與生長天數(shù)的比值，是衡量生長狀況的1個常用指標(biāo)，特定生長率越大，代表每天體質(zhì)量增長越快。特定生長率(SGR)公式如下：

SGR=(lnmt-lnm0)/t×100%。

(4)

體質(zhì)量增加率是指體質(zhì)量增加量與生長天數(shù)的比值。體質(zhì)量增加率(WGR)公式如下：

WGR=(mt-m0)/m0×100%。

(5)

公式(1)～公式(5)中：m0為試驗開始時寬體金線蛭的平均體質(zhì)量，g；mt為試驗結(jié)束時寬體金線蛭的平均體質(zhì)量，g；L0為試驗開始時寬體金線蛭的平均體長，cm；Lt為試驗結(jié)束時寬體金線蛭的平均體長，cm；N0為試驗開始時寬體金線蛭的條數(shù)，cm；Nt為試驗結(jié)束時寬體金線蛭的回捕條數(shù)，cm；t為試驗天數(shù)，d。

1.5 數(shù)據(jù)統(tǒng)計

試驗數(shù)據(jù)用“平均值±標(biāo)準(zhǔn)差”表示，采用Excel與SPSS 20.0軟件對試驗數(shù)據(jù)進(jìn)行單因素方差分析(One-way ANOVA)，并進(jìn)行多重比較(LSD法)，P<0.05表示差異顯著。

2 結(jié)果與分析

2.1 養(yǎng)殖密度對寬體金線蛭體長和體質(zhì)量增加的影響

由圖1可知，隨著時間的延長，寬體金線蛭的體長和體質(zhì)量在試驗期內(nèi)呈現(xiàn)明顯的上升趨勢。由表1可知，在30、60 ind./m2的養(yǎng)殖密度下，終末體長分別達(dá)到7.66、7.83 cm，分別較初始體長增加1.36、1.81 cm；在40 ind./m2的養(yǎng)殖密度下，其體長在第10～15 d生長速度最快，終末體長達(dá)到了8.43 cm，較初始體長增加了3.11 cm，顯著高于D3組，但與D1和D4組差異不顯著。此外，D3組體質(zhì)量增加最為明顯，在35 d飼養(yǎng)期后其平均體質(zhì)量達(dá)到9.69 g，較初始體質(zhì)量增加5.51 g；D1、D2、D4組的體質(zhì)量雖然在第5～10 d時有所減少，但在15 ～35 d期間，體質(zhì)量逐漸增加，其平均終末體質(zhì)量也分別達(dá)到了8.67、9.63、9.00 g，分別較初始體質(zhì)量增加4.00、5.50、4.17 g，但各組終末體質(zhì)量無顯著性差異。

2.2 養(yǎng)殖密度對寬體金線蛭特定生長率和存活率的影響

由表2可知，在養(yǎng)殖密度為30～60 ind./m2范圍內(nèi)，隨著密度的增加，寬體金線蛭的日增體質(zhì)量、日增體長、特定生長率、體質(zhì)量增加率和存活率整體呈現(xiàn)先升高后降低的趨勢。D2組寬體金線蛭的日增體長指標(biāo)顯著高于D1組，但與D3和D4組無顯著差異。D3組的日增體質(zhì)量最高，達(dá) 0.167 g，顯著高于D1、D4組，與D2組差異不顯著；此外，D3組寬體金線蛭的特定生長率和體質(zhì)量增加率最高，均顯著高于D1組，但與D2、D4組相比差異不顯著。D2組寬體金線蛭的存活率最高，顯著高于其他試驗組，D1組的存活率最低，顯著低于其他試驗組。

表1 養(yǎng)殖密度對寬體金線蛭生長性能的影響

表2 養(yǎng)殖密度對寬體金線蛭特定生長率和成活率的影響

3 討論

由于寬體金線蛭是一種群居性動物，因此在人工養(yǎng)殖時適宜的養(yǎng)殖密度尤為重要。沈勤報道，采用池塘大網(wǎng)箱養(yǎng)殖寬體金線蛭，幼蛭的放養(yǎng)密度一般控制在9.00×105～1.05×106ind./hm2[19]。高明等報道，一般人工飼養(yǎng)池放養(yǎng)種蛭的養(yǎng)殖密度為10～20 ind./m2[6]。從本試驗可知，在養(yǎng)殖密度為40、50 ind./m2時，其日增體質(zhì)量顯著高于其他養(yǎng)殖密度組，說明養(yǎng)殖密度為40～50 ind./m2時，能夠有效促進(jìn)寬體金線蛭體質(zhì)量的增長；其他組的寬體金線蛭的體質(zhì)量雖有所增長，但增長速度較慢，不能適應(yīng)實際生產(chǎn)的需要。本試驗條件下，在養(yǎng)殖密度為40、50、60 ind./m2時，其日增體長均明顯高于養(yǎng)殖密度為30 ind./m2的試驗組，但以40 ind./m2的養(yǎng)殖密度為最佳。在水蛭的實際生產(chǎn)中，體長指標(biāo)與經(jīng)濟效益并不顯著相關(guān)，但可作為衡量寬體金線蛭是否健康生長的指標(biāo)。本試驗結(jié)果與其他文獻(xiàn)報道的最佳放養(yǎng)密度不盡相同，這可能是由不同養(yǎng)殖模式中寬體金線蛭的養(yǎng)殖池條件、養(yǎng)殖方式、飼養(yǎng)管理人員技術(shù)水平高低的不同引起的[6]。此外，養(yǎng)殖溫度、餌料、水質(zhì)等因素不同也會影響寬體金線蛭生長性能[20]。

寬體金線蛭具有很高的藥用價值，尤其是在治療心腦血管疾病和高脂血癥方面具有很高的臨床應(yīng)用價值；國外在寬體金線蛭上的研究，多集中在生物學(xué)分類、生理機制、藥理毒理、神經(jīng)系統(tǒng)、活性物質(zhì)提取和分析、耐受力等方面[21-26]。受環(huán)境污染和過度捕捉的雙重影響，野生藥用水蛭資源越來越少，導(dǎo)致供不應(yīng)求，價格不斷攀升。因此，必須通過人工養(yǎng)殖來解決市場供需矛盾、恢復(fù)水蛭自然資源的群體數(shù)量。寬體金線蛭具有生長迅速、養(yǎng)殖周期短、個體大等優(yōu)勢特點，受到了大量養(yǎng)殖戶的青睞。由于我國對于影響寬體金線蛭生長因素的研究還不夠深入，導(dǎo)致技術(shù)尚不成熟，人工養(yǎng)殖成本高、成活率較低[16]。人工養(yǎng)殖寬體金線蛭的關(guān)鍵技術(shù)之一是要把握好適宜的養(yǎng)殖密度和合適的養(yǎng)殖模式，這須要根據(jù)實際養(yǎng)殖環(huán)境來確定。寬體金線蛭的人工養(yǎng)殖模式很多，如“水泥池”“池塘+網(wǎng)箱+水泥池”“池塘+網(wǎng)箱”“池塘+水泥池+網(wǎng)箱+大棚”“水泥池+大棚”等10余種單一或復(fù)合的養(yǎng)殖模式[27]。其中“池塘+網(wǎng)箱”養(yǎng)殖模式應(yīng)用最為廣泛，因為網(wǎng)箱本身就具有防逃、防敵害、節(jié)省勞力和易收獲的優(yōu)點。

養(yǎng)殖密度是影響水蛭生長性能的重要因素。由本試驗可知，50 ind./m2的養(yǎng)殖密度，寬體金線蛭的終末體質(zhì)量較初始體質(zhì)量明顯增長；但養(yǎng)殖密度為40 ind./m2時，寬體金線蛭的日增體長和存活率都明顯高于其他試驗組。由此，筆者推測養(yǎng)殖密度可能通過間接影響環(huán)境溫度、蟲體耗氧率、水質(zhì)等幾個方面來影響寬體金線蛭的生長性能。寬體金線蛭是一種變溫動物，它的生長速度與環(huán)境溫度密切相關(guān)[28]。研究表明，寬體金線蛭的最適生長水溫在25 ℃左右[14-15]；適宜溫度下，寬體金線蛭用于適應(yīng)環(huán)境和維持生命活動的能量少，用于生長的能量多，飼料轉(zhuǎn)化效率高，生長速度快，而當(dāng)溫度超過臨界值后，導(dǎo)致寬體金線蛭代謝紊亂、生長速度變緩[16]。此外，隨著水溫的升高，寬體金線蛭的耗氧率也隨之上升，窒息點與溫度和體質(zhì)量呈負(fù)相關(guān)關(guān)系，與耗氧量呈正相關(guān)關(guān)系[29]。此外，水質(zhì)對于水生動物的生長和存活影響非常大，當(dāng)水體中無機鹽含量在適宜濃度范圍時，可增加浮游植物和其他水生生物的生物量，促進(jìn)養(yǎng)殖生產(chǎn)；當(dāng)水體中無機鹽含量超過臨界值后，水體易發(fā)生富營養(yǎng)化，對水生動物產(chǎn)生有害的影響[30]。由此，筆者認(rèn)為，養(yǎng)殖密度有可能通過影響寬體金線蛭的耗氧率和窒息點、水體質(zhì)量、水體溫度來影響其生長性能。因此，探索寬體金線蛭的養(yǎng)殖密度對水體質(zhì)量、水體溫度、蟲體耗氧率、窒息點及體質(zhì)量的影響，研究它們之間的相關(guān)性，對于闡明養(yǎng)殖密度影響寬體金線蛭生長性能的原理具有重要的意義。今后，需要加大樣本量、拉大梯度范圍、延長飼養(yǎng)期進(jìn)行進(jìn)一步深入研究。

綜上所述，在本試驗條件下，隨著放養(yǎng)密度的增加，寬體金線蛭的體質(zhì)量和體長的增加量呈現(xiàn)先增加后減少的特點。在養(yǎng)殖密度為50 ind./m2的條件下，寬體金線蛭生長速度最快；在密度為40 ind./m2的條件下，終末體長、日增體長最大，存活率最高。綜合研究結(jié)果與生產(chǎn)實踐來看，宜將養(yǎng)殖密度控制為40 ind./m2，有助于保證寬體金線蛭蟲體健康，并促進(jìn)其較快的生長。