薛沾枚 劉玉鵬 趙蕊

摘? 要：馬齒莧是我國(guó)衛(wèi)生部規(guī)劃的78種藥食同源的野生植物之一，多糖是其主要活性成分。采用超聲波法提取馬齒莧多糖，并制備成顆粒劑，通過(guò)考察原料藥浸膏粉與輔料配比、輔料用量、濕潤(rùn)劑濃度因素對(duì)顆粒劑成型率、吸濕性、休止角等指標(biāo)的影響，篩選出制備馬齒莧多糖顆粒劑的最佳工藝。結(jié)果表明，超聲波法提取馬齒莧多糖時(shí)料液比1∶35，提取時(shí)間55 min，溫度45℃，為最佳提取工藝。馬齒莧多糖顆粒劑制備工藝篩選出藥粉1∶1.5，乳糖與可溶性淀粉混合輔料2∶1，采用80%乙醇做濕潤(rùn)劑，是最佳制備工藝。

關(guān)鍵詞：馬齒莧多糖;超聲波工藝優(yōu)化;顆粒劑

中圖分類號(hào) R944.2+7 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼 A ? 文章編號(hào) 1007-7731（2018）23-0026-03

Abstract：Purslane is one of the 78 wild medicinal plants that have been planned by the Ministry of health in China. Polysaccharide is the main active ingredient. In this experiment，Portulaca oleracea polysaccharide was extracted by ultrasonic wave and prepared into granules. The optimum preparation technology of Portulaca oleracea polysaccharide granules was screened by investigating the ratio of extract powder and excipients，the dosage of excipients and the concentration of wetting agent. The results showed that the optimum extraction conditions were as follows： the ratio of material to liquid was 1∶35，the extraction time was 55 min，and the temperature was 45 C. The preparation technology of Portulaca oleracea polysaccharide granules was optimized as follows： powder 1∶1.5，lactose and soluble starch 2∶1，80% ethanol as wetting agent.

Key words：Purslane polysaccharide; Ultrasonic technology optimization; Granules

馬齒莧（Portulaca oleracea）又稱螞蟻菜、長(zhǎng)壽草、五行草等，在我國(guó)分布廣泛[1]。多糖是馬齒莧主要的活性功能物質(zhì)[2]。筆者課題組前期研究結(jié)果表明，馬齒莧多糖具有抗宮頸癌活性，為了更好地對(duì)其進(jìn)行開(kāi)發(fā)利用，將馬齒莧多糖制備成顆粒劑，并對(duì)制備工藝進(jìn)行優(yōu)化，為馬齒莧多糖臨床應(yīng)用提供理論基礎(chǔ)。

1 材料

1.1 試劑 馬齒莧全草，石油醚、無(wú)水乙醇、95%乙醇、丙酮、苯酚、濃硫酸、山梨醇、甘露醇、糊精、蔗糖、乳糖、可溶性淀粉。

1.2 儀器 紫外分光光度計(jì)、離心機(jī)、水浴鍋、烘干機(jī)。

2 方法

2.1 馬齒莧多糖的制備

2.1.1 分析測(cè)定 葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制及回歸方程建立：稱取葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)品100mg于105℃干燥至恒重，搖勻定容，得1.0mg/mL的標(biāo)準(zhǔn)葡萄糖溶液。精確量取0mL、0.1mL、0.2mL、0.3mL、0.4mL、0.5mL、0.6mL、0.7mL、0.8mL于具塞試管中，加水至1mL，采用苯酚-硫酸法分別加入6%苯酚0.5mL、硫酸5mL搖勻，沸水浴15min，冷卻至室溫，于490nm處測(cè)定吸光度。以吸光度值（A）為縱坐標(biāo)，標(biāo)準(zhǔn)葡萄糖濃度（C）為橫坐標(biāo)繪制[4]。

2.1.2 提取路線 新鮮馬齒莧干燥→粉碎→5倍石油醚脫脂2次→5倍95%乙醇脫脂2次→超聲波水提取2次→上清液合并濃縮→3倍量95%乙醇沉淀，4℃過(guò)夜→離心→95%乙醇洗滌沉淀2次→無(wú)水乙醇洗滌沉淀2次→丙酮洗滌沉淀2次→干燥→馬齒莧多糖

2.1.3 正交實(shí)驗(yàn) 通過(guò)參考文獻(xiàn)和預(yù)實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，提取時(shí)間、提取溫度、料液比是影響超聲波法提取馬齒莧多糖的重要因素，實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)如表1。

2.2 馬齒莧多糖顆粒劑制備

2.2.1 輔料選擇 選用常用輔料，乳糖、可溶性淀粉、蔗糖、糊精、甘露醇、山梨醇進(jìn)行吸濕率考察，每隔12h進(jìn)行吸濕測(cè)定，篩選出吸濕性好的粒劑制備輔料[5]。

2.2.2 單一輔料制粒 將浸膏粉：輔料=1∶1配比，過(guò)篩3次混勻，采用80%乙醇制成軟材，過(guò)14目篩制粒，置60℃烘干，通過(guò)計(jì)算顆粒劑的成型率、吸濕率進(jìn)行綜合評(píng)分，計(jì)算公式如下[6]：

2.2.2.1 成型率 根據(jù)2010版本《中國(guó)藥典》一部附錄IC附錄，采用雙篩法篩選合格顆粒劑，即能通過(guò)一號(hào)篩和不能通過(guò)五號(hào)篩的顆粒為合格顆粒，公式如下[6]：

2.2.2.2 吸濕率 稱取自制顆粒劑置于稱量瓶中，干燥置恒重后精密稱取質(zhì)量，放于相對(duì)濕度75%的過(guò)飽和NaCl溶液中，室溫定期稱量計(jì)算吸濕率，公式如下[7]：

2.2.2.3 休止角 采用固定式漏斗法，將顆粒劑緩緩倒入漏斗，圓錐體的頂端與末端漏斗口接觸。根據(jù)如下公式計(jì)算休止角，α越小流表明流動(dòng)性越好[8]：

2.2.3 正交試驗(yàn)優(yōu)化顆粒劑制備工藝 取藥粉45g分為9份，所制軟材標(biāo)準(zhǔn)為手握成軟團(tuán)，輕壓即散，過(guò)12目篩后，于60℃干燥，14目篩整粒[9]。以藥粉與輔料用量比，不同輔料配比和乙醇濃度為考察因素，通過(guò)吸濕率、成型率、休止角的綜合評(píng)價(jià)為考察指標(biāo)，按照表2進(jìn)行正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)。

3 結(jié)果與分析

3.1 標(biāo)準(zhǔn)曲線 采用苯酚-硫酸法繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線如圖1，制得標(biāo)準(zhǔn)曲線方程為：y=9.9536x-0.0234，R2=0.9998，表明葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)品在規(guī)定范圍內(nèi)線性關(guān)系良好。

3.2 超聲波法提取多糖正交試驗(yàn) 由表3可以看出，影響馬齒莧多糖提取率的主要因素中，提取時(shí)間為最顯著的影響因素，依次是料液比、提取溫度，Rb>Ra>Rc，最佳工藝組合為A3B3C1。

3.3 輔料篩選吸濕測(cè)定 圖2吸濕曲線可看出，甘露醇的吸濕率最低，但價(jià)格昂貴;山梨醇的吸濕率最高，在72h時(shí)完全潮解，進(jìn)而排除。選用可溶性淀粉、乳糖、糊精、蔗糖進(jìn)行單一輔料實(shí)驗(yàn)，綜合制粒效果篩選輔料種類。

3.4 單一輔料制備 表4綜合評(píng)分結(jié)果表明，乳糖為馬齒莧多糖粉的最佳輔料，為節(jié)約成本且使顆粒劑能夠保持較好的理化性狀，根據(jù)綜合評(píng)分選取排名第1、第2的乳糖和可溶性淀粉，兩者共同作為顆粒劑的混合輔料。

3.5 顆粒劑制備正交實(shí)驗(yàn)結(jié)果 表5、6可以看出，綜合評(píng)分影響因素為A>B>C。藥粉與輔料比對(duì)顆粒劑的成型有著顯著影響。最佳制備工藝條件選擇為A3B3C2，即藥粉1∶1.5，乳糖與可溶性淀粉混合輔料2∶1，采用80%乙醇做濕潤(rùn)劑。依據(jù)最佳工藝制得顆粒劑為棕褐色，顏色均一，顆粒均勻，流動(dòng)性好。

4 結(jié)論與討論

采用超聲波提取法來(lái)提取馬齒莧多糖，對(duì)主要影響超聲波提取法的3個(gè)因素：提取時(shí)間、提取溫度、料液比;正交試驗(yàn)結(jié)果表明，料液比1∶35，提取時(shí)間55min，溫度45℃提取工藝最佳。

吸濕實(shí)驗(yàn)表明，馬齒莧多糖粉吸濕性強(qiáng)，易吸濕結(jié)塊顏色變深，而顆粒劑具有穩(wěn)定、運(yùn)輸、攜帶、口服方便等優(yōu)點(diǎn)[1，2]。在制備馬齒莧多糖顆粒劑時(shí)，考慮到成本因素、抗吸濕性和成型性等因素，選用了乳糖和可溶性淀粉。乳糖口感細(xì)膩，使得顆粒劑粒度均勻[1，3]。馬齒莧多糖粉在所制軟材中容易結(jié)塊，加入可溶性淀粉使得顆粒劑大小均一、濕度適中。采用L9（34）正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)馬齒莧多糖顆粒劑制備工藝，篩選出浸膏藥與輔實(shí)1∶1.5，乳糖與可溶性淀粉混合輔料2∶1，采用80%乙醇做濕潤(rùn)劑，制備工藝最佳。

參考文獻(xiàn)

[1]王曉玲，王紅霞.馬齒莧的傳統(tǒng)應(yīng)用和現(xiàn)代研究概況[J].首都醫(yī)藥，2004（04）：45-48.

[2]Wan Chen，Gaoqiang Liu，Huandong Yang. Effects of Processing Treatments on the Antioxidant Properties of Polysaccharide from Cordyceps militaris[J].International Journal of? Food? Engineering，2017，13（1）.

[3]Azza A，Matloub，Hadeer A. et al. Influence of Bioactive Sulfated Polysaccharide-protein Complexes on Hepatocarcinogenesis，Angiogenesis and Immunomodulatory Activities [J].Asian Pacific Journal of Tropical Medicine，2016，9（12）：1175-1186.

[4]雷呈，李斐. 超聲波輔助提取山茱萸多糖的實(shí)驗(yàn)研究[J].天然產(chǎn)物研究與開(kāi)發(fā)，2013，25（07）：990-994.

[5]肖桂蘭.中藥顆粒劑的研究現(xiàn)狀及應(yīng)用前景[J].中國(guó)中醫(yī)藥現(xiàn)代遠(yuǎn)程教育，2013，11（15）：130.

[6]吳司琪，伍振峰，岳鵬飛，等.中藥制粒工藝及其設(shè)備的研究概況[J].中國(guó)醫(yī)藥工業(yè)雜志，2016，47（03）：341-346.

[7]錢(qián)忠直.建立符合中醫(yī)藥特點(diǎn)的中藥質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)—解讀2010年版《中國(guó)藥典》[J].中國(guó)中藥雜志，2010，35（16）：2048-2051.

[8]安品弟，吳仲，蔣慧穎，等.武夷巖茶復(fù)方顆粒劑的制備工藝[J]. 海峽科學(xué)，2016（11）：17-18.

[9]崔雅慧，鄭艷春，牛向偉，等.一步制粒技術(shù)在中藥制劑應(yīng)用中關(guān)鍵因素的探討[J].內(nèi)蒙古中醫(yī)藥，2012，31（12）：46-47.

[10]楊昱，白靖文，俞志剛.超聲輔助提取技術(shù)在天然產(chǎn)物提取中的應(yīng)用[J].食品與機(jī)械，2011，27（01）：170-174.

[11]王美玲.中藥顆粒劑質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的研究[J].黑龍江科學(xué)，2014，5（03）：98-100.

（責(zé)編：王慧晴）