宋華文 王金才
(湛江恒興養(yǎng)殖技術(shù)服務(wù)有限公司,廣東湛江 524300)
隨著生態(tài)養(yǎng)殖發(fā)展的需求,微生態(tài)制劑作為抗生素的替代品逐漸成為水產(chǎn)養(yǎng)殖動(dòng)物病害防治的一種生物控制模式,在水產(chǎn)養(yǎng)殖中的應(yīng)用已經(jīng)成為一個(gè)熱點(diǎn)。我國(guó)農(nóng)業(yè)部第318號(hào)公告《飼料添加劑品種目錄》中公布了15種允許使用的微生物?,F(xiàn)對(duì)其中的乳酸菌(10種)和酵母菌(2種)在水產(chǎn)養(yǎng)殖中的應(yīng)用進(jìn)行總結(jié),為乳酸菌和酵母菌在水產(chǎn)養(yǎng)殖中的健康發(fā)展和高效應(yīng)用提供理論參考和技術(shù)借鑒。
乳酸菌與酵母菌都富含酶系和高價(jià)值生理活性物質(zhì),是水產(chǎn)動(dòng)物重要的蛋白質(zhì)來(lái)源,其發(fā)酵產(chǎn)品是優(yōu)質(zhì)的飼料添加劑,在水產(chǎn)養(yǎng)殖上經(jīng)常用于飼喂水產(chǎn)動(dòng)物。乳酸菌與酵母菌作為飼料添加劑在水產(chǎn)養(yǎng)殖中具有許多相似的作用。
1.1.1 提供營(yíng)養(yǎng),促進(jìn)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的吸收
乳酸菌能產(chǎn)生淀粉酶、脂肪酶、蛋白酶等多種酶類,將機(jī)體不易吸收的大分子量蛋白質(zhì)降解為易于吸收的游離氨基酸和多肽,合成機(jī)體所需的煙酸、泛酸、葉酸、維生素B1、維生素B6及維生素B12等多種物質(zhì),為水產(chǎn)動(dòng)物提供營(yíng)養(yǎng),并能產(chǎn)生乙酸、乳酸和促生長(zhǎng)因子。此外,乳酸菌能降解飼料在消化中產(chǎn)生的一些抗?fàn)I養(yǎng)因子,提高飼料適口性,增加動(dòng)物的攝食率,提高飼料的消化率和利用率。乳酸菌還能促進(jìn)維生素D的吸收和脂類的消化,提高礦物質(zhì)磷、鈣和鐵的利用率[1]。
1.1.2 抑制病原菌,調(diào)節(jié)腸道微生態(tài)平衡
乳酸菌可通過脂磷壁酸以及菌體分泌的表面蛋白黏附在腸道黏膜細(xì)胞上,從而在水產(chǎn)動(dòng)物腸壁上定植。乳酸菌在腸壁定植后,可以競(jìng)爭(zhēng)性地利用腸道中的可溶性碳水化合物合成大量的有機(jī)酸和細(xì)菌素等物質(zhì),從而降低腸道pH,刺激腸道蠕動(dòng),加速致病菌的外排,也抑制了大腸桿菌、沙門菌、梭菌等致病菌的繁殖;乳酸菌的兼性厭氧的特性還能消耗腸道中的氧氣,從而抑制有害需氧菌的繁殖,起到調(diào)節(jié)腸道菌群的作用[2]。
1.1.3 增強(qiáng)免疫力
乳酸菌能通過多種途徑來(lái)增強(qiáng)水產(chǎn)動(dòng)物的免疫力,主要是通過乳酸菌菌體或代謝產(chǎn)物對(duì)水產(chǎn)動(dòng)物腸道黏膜的免疫作用。在細(xì)胞免疫方面,乳酸菌能激活Th2細(xì)胞,增強(qiáng)SIgA抗體分泌;在體液免疫方面,乳酸菌能夠激活巨噬細(xì)胞、NK細(xì)胞和B淋巴細(xì)胞,增加白細(xì)胞介素的產(chǎn)生量[3]。此外,乳酸菌可通過增強(qiáng)其體壁或體液中的過氧化氫酶、溶菌酶和超氧化物歧化酶等多種免疫酶活性來(lái)達(dá)到增強(qiáng)水產(chǎn)動(dòng)物免疫力的目的[4]。
1.1.4 吸附霉菌毒素
乳酸菌對(duì)黃曲霉毒素B1的吸附作用較強(qiáng)。黃曲霉毒素B1可通過非共價(jià)方式與乳酸菌細(xì)胞壁的多聚糖和肽糖脂等組分相結(jié)合,形成黃曲霉毒素B1-乳酸菌復(fù)合物排出體外,而起到解毒的作用[5]。乳酸菌對(duì)黃曲霉毒素B1的吸附能力與相互作用的溫度和時(shí)間沒有關(guān)系,也與乳酸菌的存活狀態(tài)沒有關(guān)系,其吸附黃曲霉毒素B1的能力與乳酸菌的細(xì)胞數(shù)目成正比[6,7]。
1.2.1 提供營(yíng)養(yǎng),促進(jìn)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的吸收
酵母菌富含蛋白質(zhì)、多糖、核酸、B族維生素、消化酶等營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)和促生長(zhǎng)因子,能增強(qiáng)水產(chǎn)動(dòng)物的消化吸收,提高飼料利用率,促進(jìn)各類水產(chǎn)動(dòng)物的生長(zhǎng)[8]?;罱湍妇茉谀c道中產(chǎn)生多胺類物質(zhì),并能黏附在腸黏膜上生長(zhǎng)和繁殖,提高蛋白酶和脂肪酶在mRNA水平上的表達(dá),促進(jìn)腸道成熟,增強(qiáng)腸細(xì)胞對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的吸收能力[9]。酵母細(xì)胞壁富含甘露寡糖,其能夠增加水產(chǎn)動(dòng)物腸道微絨毛長(zhǎng)度,改善腸道微絨毛形態(tài),擴(kuò)大腸道褶皺面積,有利于腸道內(nèi)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的消化吸收[10]。
1.2.2 抑制病原菌,調(diào)節(jié)腸道微生態(tài)平衡
首先,酵母菌屬于兼性厭氧菌,可消耗水產(chǎn)動(dòng)物胃腸道內(nèi)的氧氣,促進(jìn)乳酸菌生長(zhǎng)繁殖,并抑制需氧菌的生長(zhǎng),從而促進(jìn)水產(chǎn)動(dòng)物腸道微生態(tài)平衡。其次,酵母菌能為乳酸菌的生長(zhǎng)繁殖提供氨基酸、維生素、丙酮酸鹽等營(yíng)養(yǎng)因子,促進(jìn)乳酸菌的生長(zhǎng),降低胃腸道pH,調(diào)節(jié)胃腸道功能的正常運(yùn)行[11]。此外,酵母菌細(xì)胞壁的甘露寡糖的結(jié)構(gòu)與病原菌在腸壁上的受體結(jié)構(gòu)相似,某些大腸桿菌或沙門氏菌能夠凝集在酵母菌細(xì)胞壁外層的甘露聚糖上,繼而阻斷其在腸壁上的定植,從而減少了腸道病原菌的數(shù)量[12]。
1.2.3 增強(qiáng)免疫力
魚類為低等脊椎動(dòng)物,其免疫系統(tǒng)不成熟,它們對(duì)感染的抵抗主要依賴于非特異性免疫反應(yīng)。對(duì)蝦的免疫系統(tǒng)比魚類更差,更依賴非特異性免疫反應(yīng)來(lái)抵抗感染。β-葡聚糖和甘露寡糖是酵母菌細(xì)胞壁的有效成分。β-葡聚糖能激活巨噬細(xì)胞,增強(qiáng)水產(chǎn)動(dòng)物的非特異性免疫系統(tǒng)功能[13]。甘露寡糖也能通過提高水產(chǎn)動(dòng)物白細(xì)胞吞噬能力和溶菌酶活性來(lái)增強(qiáng)水產(chǎn)動(dòng)物機(jī)體的非特異性免疫功能[14]。
1.2.4 吸附霉菌毒素
酵母菌細(xì)胞壁上的多糖、蛋白質(zhì)和脂類等物質(zhì)可通過離子鍵、氫鍵和疏水作用力來(lái)吸附降解霉菌毒素[15]。酵母細(xì)胞壁可以吸附2.7mg/g玉米赤霉烯酮,并且這種吸附平衡可以在10min內(nèi)完成,與鋁硅酸鹽類吸附劑相比有明顯的優(yōu)勢(shì)[16]。酵母細(xì)胞壁對(duì)玉米赤霉毒素、黃曲霉毒素等具有較強(qiáng)的吸附作用,且不受pH的影響[17]。
在水產(chǎn)養(yǎng)殖中,不要長(zhǎng)期單獨(dú)飼喂酵母菌和乳酸菌。使用酵母菌和乳酸菌飼喂水產(chǎn)動(dòng)物應(yīng)間歇性進(jìn)行。長(zhǎng)期飼喂過多的乳酸菌和酵母菌,導(dǎo)致在對(duì)蝦腸道定植下來(lái)的活菌持續(xù)繁殖,過多的活菌掠奪吸收對(duì)蝦腸道里的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),從而令對(duì)蝦持續(xù)感到饑餓,導(dǎo)致不自覺進(jìn)食,加上乳酸菌與酵母代謝產(chǎn)物的協(xié)同作用,腸道就會(huì)在這種持續(xù)的進(jìn)食過程中變粗,而腸壁也會(huì)逐漸變薄[18]。
在水產(chǎn)養(yǎng)殖中,將微生態(tài)制劑直接潑灑于養(yǎng)殖池中,是為了凈化水質(zhì),改良養(yǎng)殖水體,為水產(chǎn)動(dòng)物提供一個(gè)良好的水體生存環(huán)境。
乳酸菌經(jīng)常作為水質(zhì)改良劑用于改良養(yǎng)殖水體。乳酸菌能通過氧化、固氮、氨化、硝化和反硝化等作用,將養(yǎng)殖水體中的殘餌、糞便、死藻等有害有機(jī)物轉(zhuǎn)化為磷酸鹽、硝酸鹽和二氧化碳等營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),從而達(dá)到凈化水質(zhì)的目的;同時(shí)提高水體中的溶氧量,保持養(yǎng)殖水體的潔凈,促進(jìn)水產(chǎn)動(dòng)物的健康生長(zhǎng)[19]。
目前,還沒有釀酒酵母菌和產(chǎn)朊假絲酵母菌單獨(dú)作為水質(zhì)改良劑用于改善養(yǎng)殖水體的報(bào)道。此兩種酵母常與芽孢桿菌、光合細(xì)菌、乳酸菌等有益菌搭配使用,最常見的為EM菌。EM 菌能分解水體中的殘餌、糞便、死藻等有害有機(jī)物,降低水體中的氨氮、亞硝酸鹽、硫化氫等有害物質(zhì)的含量,降低化學(xué)需氧量和生化需氧量,提高水中溶解氧的含量,穩(wěn)定水體pH,有效控制水體藻相,達(dá)到凈化養(yǎng)殖水體和改善養(yǎng)殖環(huán)境的作用[20,21]。
2.3.1乳酸菌應(yīng)用的注意事項(xiàng)
乳酸菌在偏酸環(huán)境下生長(zhǎng),最適pH一般為5.5~6.5,過高或過低都不利于乳酸菌的生長(zhǎng)。乳酸菌是營(yíng)養(yǎng)缺陷型菌株,對(duì)營(yíng)養(yǎng)的需求比較苛刻,其生長(zhǎng)多以單糖和雙糖等碳水化合物為基質(zhì),還輔助一些氨基酸和維生素等。養(yǎng)殖水體中的殘餌、糞便、死藻等有機(jī)物,主要成分多為大分子結(jié)構(gòu)的蛋白質(zhì)、纖維素和淀粉等,大多不能為乳酸菌利用。因此,使用乳酸菌潑水時(shí),需要額外添加適當(dāng)?shù)奶荚?如紅糖、糖蜜等),提高水體的C/N比,促進(jìn)乳酸菌的生長(zhǎng)。一般來(lái)說(shuō),天亮后盡早使用乳酸菌,以最大限度地使水體中的菌藻充分利用乳酸菌的代謝產(chǎn)物快速生長(zhǎng)繁殖,以便迅速建立良好的養(yǎng)殖水體生態(tài)系統(tǒng)[22]。
2.3.2酵母菌應(yīng)用的注意事項(xiàng)
釀酒酵母菌和產(chǎn)朊假絲酵母菌都在偏酸環(huán)境中生長(zhǎng),最適pH范圍為3.0~7.5,而養(yǎng)殖水體pH為7.5~8.5。當(dāng)酵母菌進(jìn)入水體后,酵母因不能耐受過高pH而逐漸死亡自溶,其中的營(yíng)養(yǎng)因子釋放到水體中,不僅促進(jìn)有益菌的生長(zhǎng),還能夠促進(jìn)大腸桿菌、弧菌等致病菌的生長(zhǎng)[23,24]。在水體中大腸桿菌、弧菌等致病菌占優(yōu)勢(shì)的情況下,大量使用酵母菌產(chǎn)品潑水很可能會(huì)導(dǎo)致水體微生態(tài)環(huán)境嚴(yán)重惡化。因此,釀酒酵母菌和產(chǎn)朊假絲酵母菌并不適合單獨(dú)作為水質(zhì)改良劑用于改良養(yǎng)殖水體,需要與其他有益菌搭配使用。
乳酸菌和酵母菌在水產(chǎn)動(dòng)物腸道上都具有定植能力,在促進(jìn)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的吸收、抑制病原菌、調(diào)節(jié)腸道微生態(tài)平衡、提高免疫力、吸附霉菌毒素等方面都有明顯的效果。乳酸菌和酵母菌均在偏酸環(huán)境生長(zhǎng),水產(chǎn)動(dòng)物腸道偏酸性,養(yǎng)殖水體尤其是南美白對(duì)蝦養(yǎng)殖水體偏堿性,并不適合乳酸菌與酵母長(zhǎng)期在其中生長(zhǎng)繁殖。況且,用于拌料的乳酸菌和酵母菌并不是完全被水產(chǎn)動(dòng)物攝食,部分直接進(jìn)入水體,以及一些被攝入的乳酸菌和酵母菌也被直接排出體外,從而進(jìn)入水體生長(zhǎng)繁殖;同時(shí),將乳酸菌和酵母拌料,增加了水產(chǎn)動(dòng)物的攝食率,減少殘餌,這都可以起到改良水質(zhì)的作用。因此,在水產(chǎn)養(yǎng)殖中,乳酸菌和酵母作為飼料添加劑來(lái)飼喂水產(chǎn)動(dòng)物以改善水產(chǎn)動(dòng)物腸道比作為水質(zhì)改良劑直接添加在水中用于以改善養(yǎng)殖水體更高效。