李澤鵬
摘 要 以徐麥33為供試材料,研究了在小麥開(kāi)花期噴施不同微量元素對(duì)小麥籽粒產(chǎn)量構(gòu)成因素、蛋白質(zhì)組分含量、GMP含量、面筋含量等的影響。結(jié)果表明:在花期噴施不同微量元素能夠提升小麥產(chǎn)量,在產(chǎn)量構(gòu)成因素方面,主要提高了小麥的千粒重,不同處理之間穗粒數(shù)和穗數(shù)沒(méi)有顯著差異;噴施不同的外源微量元素能夠顯著提高小麥的總蛋白含量,不同處理之間清蛋白和球蛋白的含量差異不顯著,但麥谷蛋白和醇溶蛋白較對(duì)照都有顯著提高;噴施外源鋅、硒、鐵可以顯著提高小麥面粉濕面筋含量、干面筋含量和SDS沉降值;與對(duì)照相比,噴施外源物質(zhì)都可以顯著的提高高低分子量麥谷蛋白亞基。
關(guān)鍵詞 小麥;產(chǎn)量;品質(zhì)
中圖分類號(hào):S512.1 文獻(xiàn)標(biāo)志碼:B DOI:10.19415/j.cnki.1673-890x.2018.03.053
小麥(Triticum aestivum Linn.)是禾本目(Poales)禾本科(Poceeae)小麥屬(Triticum)草本植物,是三大谷物之一。
小麥?zhǔn)鞘澜缟戏N植面積最大的糧食作物,也是我國(guó)第二大糧食作物。由于農(nóng)民對(duì)小麥產(chǎn)量的重視,導(dǎo)致我國(guó)優(yōu)質(zhì)的專用小麥需要大量進(jìn)口。生活水平的提高,使得人民對(duì)優(yōu)質(zhì)專用小麥的需求量大大增加,但品質(zhì)指標(biāo)不協(xié)調(diào)、面筋質(zhì)量差等嚴(yán)重阻礙了優(yōu)質(zhì)小麥的生產(chǎn)。要解決我國(guó)優(yōu)質(zhì)小麥供應(yīng)不足的問(wèn)題,除了優(yōu)質(zhì)的品種外,環(huán)境條件也起到非常重要的作用。N、P、K的供應(yīng),微量元素和氨基酸液肥的補(bǔ)充,化學(xué)調(diào)控可以有效提高或降低小麥的面筋含量。根據(jù)需求的不同,配制不同的外源調(diào)控物質(zhì)。
絕大多數(shù)陸生植物主要依靠根系吸收養(yǎng)分,同時(shí)植物的葉片也可以吸收外源物質(zhì),如氣體、營(yíng)養(yǎng)元素、農(nóng)藥等,葉片在吸收水分的同時(shí)也能夠?qū)I(yíng)養(yǎng)物質(zhì)吸收到植物體中去[1]。葉面肥是以葉面吸收為目的,是將營(yíng)養(yǎng)元素施用于農(nóng)作物葉片表面,通過(guò)葉片的吸收而發(fā)揮功能的一種肥料類型。葉面肥的作用迅速,因此大大提高了肥料的時(shí)效性,并且其簡(jiǎn)單的操作和吸收效率較高,有效地減少了成本。大量研究表明,葉片對(duì)養(yǎng)分的吸收利用與根系一樣,都能起到改善作物品質(zhì)、提高產(chǎn)量的效果[2]。植物種類及生長(zhǎng)狀況,葉面噴施液的組成與養(yǎng)分元素的性質(zhì),溫度、光照等環(huán)境條件都影響葉片養(yǎng)分的吸收與利用[3]。在葉面肥中加入活性劑等助劑可以提高葉面噴施效果,因此,活性劑成為葉面噴施劑不可或缺的一部分。近年來(lái),中國(guó)葉面肥產(chǎn)品數(shù)量和種類增長(zhǎng)迅速,但產(chǎn)品的質(zhì)量較差,使用技術(shù)也有待提高。外源噴施微量元素可以有效改善小麥品質(zhì),增加小麥產(chǎn)量。小麥葉面肥是一種快速、高效、及時(shí)補(bǔ)充養(yǎng)分的方式。小麥從苗期到蠟熟前均能夠吸收葉片噴施的氮素營(yíng)養(yǎng),除氮肥外,還有一些磷鉀肥和微量元素肥料也有報(bào)道[4-9]。植物葉片與外界的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)交換主要有3條途徑:1)通過(guò)分布在葉面的氣孔;2)通過(guò)葉表面角質(zhì)層的親水小孔;3)通過(guò)葉片細(xì)胞的質(zhì)外連絲進(jìn)行主動(dòng)吸收。其中,第一種是養(yǎng)分進(jìn)入葉片內(nèi)部的主要途徑之一[10],雖然其表面也有角質(zhì)層覆蓋[11],但沒(méi)有蠟質(zhì)層,其角質(zhì)層極性較高,有利于養(yǎng)分的進(jìn)入,養(yǎng)分穿過(guò)部分角質(zhì)層的速度大于非氣孔部分角質(zhì)層[12]。葉片散發(fā)的養(yǎng)分,首先以擴(kuò)散方式進(jìn)入蠟質(zhì)層和角質(zhì)層,而后進(jìn)入葉肉細(xì)胞被吸收利用[13]。養(yǎng)分透過(guò)蠟質(zhì)層、角質(zhì)層后到達(dá)表皮細(xì)胞壁,一般認(rèn)為表皮細(xì)胞壁對(duì)養(yǎng)分進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)部的阻礙作用相對(duì)不大[14]。養(yǎng)分透過(guò)表皮細(xì)胞壁,經(jīng)過(guò)跨膜(原生質(zhì)膜)運(yùn)輸進(jìn)入細(xì)胞質(zhì)中,其運(yùn)輸機(jī)制與根部細(xì)胞一樣[15]。養(yǎng)分進(jìn)入葉肉細(xì)胞以后參與植物生理活動(dòng),植物對(duì)其利用效果與根部吸收的養(yǎng)分相同。
微量元素包括鐵、鋅、銅、錳、鉻、硒、鉬、鈷和氟等。相對(duì)于大量元素而言,微量元素在生物體內(nèi)含量極少,但與動(dòng)植物的生存和健康息息相關(guān),具有至關(guān)重要的作用。1)通過(guò)與蛋白質(zhì)和其他有機(jī)基團(tuán)結(jié)合,形成酶、激素、維生素等生物大分子,發(fā)揮重要的生理生化功能。2)構(gòu)成體內(nèi)重要的載體與電子傳遞系統(tǒng),參與激素與維生素的合成。3)對(duì)遺傳信息的攜帶者核酸的物理、化學(xué)性質(zhì)均可產(chǎn)生影響。例如,多種RNA聚合酶中含有鋅,而核酸還原酶的作用則依賴于鐵[16];鐵、鋅、硒3種微量元素在植物體內(nèi)具有重要的生物學(xué)功能,含量過(guò)多或過(guò)少,都將導(dǎo)致植物產(chǎn)生生理疾病[17-18]。
鋅是植物體內(nèi)多種酶的組成成分和活化劑。小麥缺鋅表現(xiàn)為麥苗葉片失綠,心葉白化,中后期植株矮小,葉小而脆,根系變黑,空秕粒較多,千粒重低[19]。鐵是人們第一個(gè)發(fā)現(xiàn)的植物必需微量元素[20],在植物呼吸、光合和氮代謝等的氧化還原過(guò)程中都起著重要作用[21],植株缺鐵葉子會(huì)變黃,得黃葉病[22]。硒對(duì)高等植物具有抗氧化作用,可提高植株的抗逆性和抗衰老能力,促進(jìn)植株的正常生長(zhǎng),推測(cè)硒可能是高等植物的必需微量元素。此外,微量元素還有重金屬拮抗和環(huán)境脅迫抵制、影響植物氣味等功能。在植物中微量元素只有在其最適濃度范圍內(nèi)才能發(fā)揮其生物學(xué)功能,例如低濃度的硒才能促進(jìn)植物的生長(zhǎng)發(fā)育,超過(guò)一定的濃度范圍,會(huì)抑制植物的生長(zhǎng),對(duì)植物產(chǎn)生毒害,濃度越高抑制越強(qiáng),產(chǎn)生的毒害作用越大。一般非硒積累的植物含硒
量>50 mg·kg-1時(shí),就會(huì)使植物中毒,表現(xiàn)出生長(zhǎng)緩慢、植株矮小、葉子失綠等中毒癥狀。
本試驗(yàn)通過(guò)在小麥花期直接噴施葉面肥的方式,高效快速地給小麥補(bǔ)充微量元素,研究在花期噴施不同微量元素對(duì)小麥產(chǎn)量和品質(zhì)的影響,以期為小麥產(chǎn)量與品質(zhì)的提高提供可行性建議。
1 材料與方法
1.1 試驗(yàn)方案
本試驗(yàn)以徐麥33好為供試品種,于2015—2016年進(jìn)行,試驗(yàn)地點(diǎn)位于徐州市睢寧農(nóng)業(yè)科技園區(qū)。撒下基肥,適期播種。三葉一心同時(shí)各個(gè)小區(qū)的基本苗數(shù),并對(duì)各個(gè)小區(qū)進(jìn)行間苗,使各小區(qū)的基本苗數(shù)一致,保證幼苗均勻。施純氮量為240 kg·hm-2,基肥和追肥各占50%,小區(qū)采用完全隨機(jī)區(qū)組設(shè)計(jì),每個(gè)處理3個(gè)重復(fù),噴施不同外源微量元素物質(zhì)。在小麥開(kāi)花期時(shí)噴施外源物質(zhì),籽粒成熟收獲后分析籽粒的品質(zhì)指標(biāo)。
1.2 測(cè)定項(xiàng)目和方法
1.2.1 產(chǎn)量及產(chǎn)量結(jié)構(gòu)
成熟期調(diào)查667 m2穗數(shù)、每穗粒數(shù),取樣點(diǎn)隨機(jī)選5 m2計(jì)產(chǎn),測(cè)定千粒重和實(shí)際產(chǎn)量。
1.2.2 蛋白質(zhì)及其組分含量
于成熟期剝?nèi)∽蚜?,烘干磨碎,采用半微量凱氏定氮法,全氮含量乘以5.7即為蛋白質(zhì)含量,清蛋白、球蛋白、醇溶蛋白、谷蛋白分別用水、10%的氯化鈉、70%的乙醇和0.2%的NaOH提取,提取后烘干提取液,方法同總蛋白測(cè)定方法測(cè)定蛋白組分的含量。
1.2.3 小麥面粉干濕面筋測(cè)定
根據(jù)GB/T 14607-1993《小麥粉干面筋測(cè)定法》測(cè)定小麥粉干面筋含量;根據(jù)GB/T 14608-1993《小麥粉濕面筋測(cè)定法》測(cè)定小麥濕面筋含量。
1.2.4 小麥面粉沉降值測(cè)定
利用小麥沉降值測(cè)定-Zeleny試驗(yàn)方法,測(cè)定小麥沉降值。沉降試驗(yàn)是測(cè)定小麥粉強(qiáng)度簡(jiǎn)單而快速的方法,該試驗(yàn)采用帶有玻璃塞的有刻度試管,從“0”刻度到100 mL刻度的距離為180~185 mm,利用小麥粉在乳酸溶液中沉降的體積來(lái)表示小麥面筋的質(zhì)量。乳酸溶液有膨脹小麥面筋蛋白質(zhì)的作用,使面粉顆粒漲大,溶液黏度上升,改變了面粉顆粒的沉降速度。筋力強(qiáng)的面粉沉降速度慢,一定時(shí)間內(nèi)面粉沉降物體積大(高);筋力弱的面粉沉降速度快,沉降物體積小(低),沉降物的體積(mL)即為小麥粉的沉降值。
1.2.5 小麥高低分子量麥谷蛋白亞基測(cè)定方法
參照梁榮奇等的方法提取高分子量麥谷蛋白亞基(HMW-GS)和低分子量麥谷蛋白亞基(LMW-GS)。沉淀麥谷蛋白大聚合體(GMP)中加入200 μL樣品緩沖液(62.5 mmol·L?1 Tris-HCl,pH 6.8,20%丙三醇,5% SDS,1%DTT),60 ℃水浴振蕩1 h,10 000 g離心10 min,上清液用于SDS-PAGE電泳。分離膠濃度10%,濃縮膠濃度4%,膠厚1 mm,20個(gè)上樣孔,每個(gè)樣品點(diǎn)樣15 μL,每板電流15 mA。電泳結(jié)束后,用0.05%考馬斯亮藍(lán)R250染色24 h,然后用蒸餾水脫色2 d。采取岳鴻偉[23]等的切膠比色法測(cè)定HMW-GS和LMW-GS的含量。將脫過(guò)色的膠放入白瓷盤(pán)中,在日光燈下用刀片從凝膠上切下染上色的蛋白質(zhì)條帶,置玻璃試管中,加入1 mL含有3% SDS的50%異丙醇,用封口膜封口,37 ℃水浴中靜置24 h提取HMW-GS 和LMW-GS,于595 nm下測(cè)定提取液吸光值。用不同點(diǎn)樣量的標(biāo)準(zhǔn)蛋白(116 kD)做標(biāo)準(zhǔn)曲線,計(jì)算各樣品HMW-GS和LMW-GS含量,以各次電泳結(jié)果的平均值作為該樣品HMW-GS和LMW-GS含量。
1.3 數(shù)據(jù)分析
數(shù)據(jù)處理用Excel 2007和SPSS18.0軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行處理并分析其差異顯著性,并采用SigmaPlot10.0作圖。
2 結(jié)果與分析
2.1 噴施不同外源物質(zhì)對(duì)小麥產(chǎn)量的影響
表2可以看出,外源微量元素的噴施可以提高小麥籽粒的千粒重,并且較對(duì)照差異顯著,其中外源硒的施入對(duì)小麥籽粒千粒重影響最大。由于是開(kāi)花期后開(kāi)始進(jìn)行的噴施處理,所以產(chǎn)量構(gòu)成因素中的穗粒數(shù)和穗數(shù)較對(duì)照沒(méi)有明顯的差異。外源噴施鋅、鐵、硒及其復(fù)配物,增加小麥千粒重幅度分別是3.7%、3.1%、9.03%、5.33%。
2.2 噴施不同外源物質(zhì)對(duì)小麥品質(zhì)的影響
2.2.1 噴施不同外源物質(zhì)對(duì)小麥蛋白含量及其組分的影響
表3可以看出,噴施外源物質(zhì)能夠提高小麥的蛋白含量,對(duì)蛋白組分產(chǎn)生了不同的影響。對(duì)于清蛋白,微量元素鋅和復(fù)合物能夠顯著提高小麥的清蛋白含量,提高幅度為45.9%和40.5%,而鐵和硒對(duì)清蛋白影響不大;對(duì)于球蛋白,噴施外源微量元素對(duì)其含量的影響不大,各處理之間差異不顯著;對(duì)于醇溶蛋白來(lái)說(shuō),趨勢(shì)和清蛋白相似,鋅和復(fù)合物對(duì)小麥醇溶蛋白提升的幅度為26.2%和23.1%;外源噴施微量元素也可以提高麥谷蛋白的含量,其中噴施鋅對(duì)其的影響最大,提高幅度達(dá)到了34.2%。
2.2.2 對(duì)小麥GMP含量的影響
如圖1可知,與噴施清水相比,噴施鋅、鐵、硒以及復(fù)合產(chǎn)物,能夠提高徐麥33面粉的GMP含量,分別提高了6.13%、9.67%、5.76%和12.84%。處理都達(dá)到了顯著水平。
2.2.3 對(duì)小麥高低分子量麥谷蛋白亞基的影響
圖2表示,噴施外源微量元素可以提升HMW-GS和LMW-GS的含量。對(duì)于高分子量麥谷蛋白亞基而言,噴施鋅的提高幅度最大,達(dá)到27.23%,其次就是復(fù)合物對(duì)HMW-GS的提高較大,提高幅度為24.39%;低分子量的影響趨勢(shì)和高分子量相似,鋅和復(fù)合物提高的幅度分別為22.99%、25.03%。
2.2.4 對(duì)小麥面筋含量及沉降值的影響
由圖3觀察可知,花期噴施外源微量元素可以促進(jìn)小麥濕面筋的形成,增加量在3%~16.3%,并且微量元素鋅和鐵能夠顯著的提高濕面筋的含量。同樣也提高干面筋的含量,外源鋅和鐵都可顯著提高干面筋的含量。對(duì)于面筋指數(shù),噴施外源微量元素都能夠顯著提高小麥的面筋指數(shù)。
由圖4觀察可以得出,噴施微量元素處理,增加了SDS沉降值,增加量為3.46%~9.84%。
3 討論
3.1 噴施不同外源微量元素對(duì)小麥產(chǎn)量的影響
張起昌對(duì)不同筋力小麥品種混噴多種微肥后,表明補(bǔ)充微肥有利于小麥對(duì)養(yǎng)分的吸收利用,加快了有機(jī)物質(zhì)積累,最終對(duì)產(chǎn)量結(jié)構(gòu)具有顯著的促進(jìn)作用。噴施外源物質(zhì)能夠很大程度上影響小麥產(chǎn)量,具體體現(xiàn)為提高了小麥的千粒重,進(jìn)而提高了小麥的產(chǎn)量,該試驗(yàn)施用微肥后,較不施肥的CK相比,產(chǎn)量提高了3.22%~7.60%。可見(jiàn),適當(dāng)噴施外源鋅、鐵、硒也是提高小麥產(chǎn)量的一種重要措施,但不同時(shí)期噴施外源微量元素對(duì)小麥產(chǎn)量及其構(gòu)成因素的影響還需要進(jìn)一步試驗(yàn)研究。
3.2 噴施不同外源微量元素對(duì)小麥品質(zhì)的影響
3.2.1 噴施不同微量元素對(duì)小麥蛋白品質(zhì)的影響
張英華等研究發(fā)現(xiàn),包括鋅和鐵在內(nèi)的4種微量元素含量與粒重、蛋白質(zhì)含量存在正相關(guān),這就表示著籽粒微量元素含量與粒重和蛋白質(zhì)含量可以同步提高。微量元素在氮素同化以及蛋白質(zhì)的合成過(guò)程中扮演著非常重要的作用。在本研究中,噴施外源微量元素不但提高了小麥的產(chǎn)量,而且顯著提高了小麥總蛋白的含量,這與張英華等研究相符。
Elpidio Pe?a[24]等研究表明,醇溶蛋白和麥谷蛋白的含量越高,則面筋總量相對(duì)應(yīng)的就會(huì)越高,從而有利于烘焙品質(zhì)的提高。麥谷蛋白和醇溶蛋白共同組成面筋蛋白,Peter R.Shewry[25]等研究表明,在影響面筋的元素中,麥谷蛋白占有大部分的因素。在本研究中,噴施的微量元素都能夠顯著提高小麥的麥谷蛋白和醇溶蛋白含量,而對(duì)應(yīng)的面粉的面筋含量也顯著增加,外源微量元素可以顯著的提高高低分子量麥谷蛋白亞基,進(jìn)而提高小麥面筋的品質(zhì)。
梁榮奇等研究表明,麥谷蛋白大聚合體(GMP)的相對(duì)含量與面團(tuán)的強(qiáng)度呈顯著的正相關(guān),品質(zhì)優(yōu)良的小麥品種,其較大分子量的GMP的比例高于品質(zhì)差劣的。AM Degaonkar[26]等的研究表明,GMP的含量與沉降值、面團(tuán)形成的時(shí)間相關(guān)顯著,GMP含量高的品種其面筋強(qiáng)度較大,面包烘焙品質(zhì)也比較好。本研究中,噴施微量元素可顯著提高GMP含量,其中鋅、鐵、硒的復(fù)合使用提高幅度最大,GMP含量提高了12.84%。
3.2.2 噴施不同微量元素對(duì)小麥加工品質(zhì)的影響
劉萬(wàn)代等研究表明,花后噴施微肥對(duì)不同筋力的小麥的濕面筋含量等品質(zhì)指標(biāo)均有顯著的提高。本試驗(yàn)中,噴施鋅和鐵都能顯著提高了面粉濕面筋和干面筋含量,其中噴施鋅對(duì)面筋指數(shù)的影響最大;所有噴施處理均能夠提高面粉SDS沉降值,并且除了鋅、鐵、硒的復(fù)配處理外,均達(dá)到了顯著水平。Ghasemi-Fasaei[27]等研究表明,鐵肥在提高籽粒鐵含量的同時(shí)增加了對(duì)其他陽(yáng)離子的拮抗作用,從而減少籽粒對(duì)鋅、銅等離子的吸收。魯璐等研究表明,小麥對(duì)各種元素的吸收會(huì)相互影響,鋅、鐵兩種元素的吸收相互促進(jìn),鋅、鐵與硒相互拮抗。因此本試驗(yàn)中雖然單獨(dú)噴施鋅、鐵、硒3種微量元素,小麥的品質(zhì)會(huì)顯著提高,但是鋅、鐵、硒的復(fù)合使用,可能會(huì)較對(duì)照沒(méi)有明顯的差異。
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