王 敏， 田孟丹， 范耘碩， 高金偉

(1.天津農(nóng)學(xué)院水產(chǎn)學(xué)院/天津市水產(chǎn)生態(tài)與養(yǎng)殖重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，天津 300380； 2.大連海洋大學(xué)，遼寧大連 116023)

通信作者：高金偉，女，博士研究生，實(shí)驗(yàn)師，主要從事功能性餌料微藻研究。E-mail：gaojinwei@tjau.edu.cn。

威氏海鏈藻(Thalassiosiraweissflogii)是一種典型的中心綱(Centricae)浮游硅藻，硅質(zhì)化程度高，生存能力強(qiáng)[1-2]，細(xì)胞由無定型二氧化硅組成，具有精致而獨(dú)特的微納米分級結(jié)構(gòu)。這種殼體具有多孔、比表面積大、機(jī)械性能良好、光學(xué)性能優(yōu)異等特點(diǎn)[3-4]，在制備新型納米材料和器件(如微型傳感器、微過濾器、生物載體等)時具有獨(dú)特的優(yōu)勢[5-6]。硅藻生長速度快、營養(yǎng)需求低、遺傳性狀穩(wěn)定，實(shí)現(xiàn)硅藻的大規(guī)模培養(yǎng)可為今后制備新型納米材料提供豐富的原料[7]。

微量元素在海水藻的生長過程中不可缺少，一方面是由于有些微量元素是細(xì)胞本身組成不可缺少的元素[8]，另一方面是由于有些微量元素是酶活性基團(tuán)的組成部分[9]。因此，在海水單胞藻培養(yǎng)過程中，必須使用微量元素，否則隨著常量元素氮(N)、磷(P)等的消耗，微量元素將會限制海水單胞藻的生長。一般認(rèn)為鐵(Fe)、銅(Cu)、鋅(Zn)、錳(Mn)、鉬(Mo)、鈷(Co)等是海洋浮游植物必需微量元素，通常以無機(jī)離子形式將上述微量元素加入單胞藻培養(yǎng)液中[10]。本研究除選取培養(yǎng)試驗(yàn)研究較少的因子，鉀鈉比(K ∶Na)、硅(Si)、氮磷比(N ∶P)及微量元素鐵(Fe)外，也研究了不同N ∶P對威氏海鏈藻生長的影響，為今后威氏海鏈藻大規(guī)模培養(yǎng)以及研究其形成赤潮的機(jī)理提供依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)藻種

本試驗(yàn)所用威氏海鏈藻由國家海洋局第二海洋研究所提供。

1.2 藻種培養(yǎng)

培養(yǎng)用水由海水晶配制，鹽度為3%，經(jīng)0.45 μm過濾、121 ℃ 滅菌20 min后，配制f/2海水培養(yǎng)液。22 ℃恒溫培養(yǎng)箱中，60 μmol/(m2·s)光照，12 h ∶12 h的明暗周期培養(yǎng)，在光照條件時每3 h搖瓶1次，取指數(shù)生長期的威氏海鏈藻進(jìn)行試驗(yàn)。

1.3 試驗(yàn)儀器

試驗(yàn)所用儀器詳見表1。

表1 試驗(yàn)儀器信息

1.4 試驗(yàn)設(shè)計(jì)

1.4.1 不同氮磷比對威氏海鏈藻的影響 分為固定氮含量組與固定磷含量組，各設(shè)置5個試驗(yàn)組，每組3個平行，將處于指數(shù)生長期的威氏海鏈藻(1 ∶1)起始密度為5萬個/mL接種于250 mL三角瓶中，裝瓶量為150 mL。以NaNO3和NaH2PO4·H2O分別為氮源和磷源，設(shè)置不同營養(yǎng)條件組：(1)固定氮組。N濃度為1 000 μmol/L，4 ∶1條件P濃度為534 μmol/L，8 ∶1條件P濃度為267 μmol/L，12 ∶1條件P濃度為179 μmol/L，16 ∶1條件P濃度為134 μmol/L，20 ∶1 條件濃度為107 μmol/L。(2)固定磷組。磷濃度為250 μmol/L，4 ∶1 條件氮濃度為 46.75 μmol/L，8 ∶1條件氮濃度為 93.5 μmol/L，12 ∶1條件氮濃度為140.5 μmol/L；16 ∶1條件氮濃度為 187.25 μmol/L，20 ∶1條件氮濃度為234 μmol/L。

其他培養(yǎng)基條件同f/2。置于22 ℃光照培養(yǎng)箱中，培養(yǎng)8 d，每天搖瓶4次。培養(yǎng)過程中在0、2、4、6、8 d定時取樣，測定威氏海鏈藻的生物量、吸光度和葉綠素含量。

1.4.2 不同K ∶Na對威氏海鏈藻的影響 設(shè)置3個試驗(yàn)組，每組3個平行，以KNO3和NaNO3分別為鈉源和鉀源，用該2種藥品代替原來f/2培養(yǎng)基中的NaNO3母液，配制新的母液，設(shè)置不同營養(yǎng)條件：(1)1 ∶3條件。重新配制的Na、K母液中NaNO3、KNO3含量分別為1.16、87.74 g/L。(2)1 ∶1條件。重新配制的Na、K母液中NaNO3、KNO3含量分別為11.7、41.8 g/L。(3)3 ∶1條件。重新配制的Na、K母液中NaNO3、KNO3含量分別為29.31、20.9 g/L。其余同“1.4.1”節(jié)。

1.4.3 不同Si含量對威氏海鏈藻的影響 在f/2培養(yǎng)基的基礎(chǔ)上添加Na2SiO3·9H2O調(diào)節(jié)硅含量，不同組培養(yǎng)基中最終硅含量分別為0.0、0.5、1.2、2.0 mg/L；取處于指數(shù)生長期的威氏海鏈藻(1 ∶1)接種于250 mL三角瓶中，裝瓶量為 150 mL。其余同“1.4.1”節(jié)。

1.4.4 不同F(xiàn)e含量對威氏海鏈藻的影響 在f/2培養(yǎng)基的基礎(chǔ)上添加FeCl3·6H2O調(diào)節(jié)鐵含量，不同組培養(yǎng)基中最終鐵含量分別為0.0、0.2、2.0、4.0 mg/L。其余同“1.4.1”節(jié)。

1.5 分析測定方法

1.5.1 威氏海鏈藻生物量和吸光度測定 在0、2、4、6、8 d定時取樣，藻液經(jīng)過預(yù)處理后，利用XB-K-25型血球計(jì)數(shù)板在電子顯微鏡下直接計(jì)算藻細(xì)胞數(shù)量。采用紫外可見分光光度計(jì)在680 nm處測定威氏海鏈藻的吸光度(D680 nm)。

1.5.2 葉綠素a含量測定 吸取2 mL藻液置于2 mL離心管中，于12 000 r/min離心5 min，用移液槍吸去上清液。沉淀藻于1.5 mL 80%丙酮中重懸浮，后用錫箔紙完全包裹 2 mL 離心管，并置于光線較暗處55 ℃水浴放置30 min，后于 12 000 r/min 離心5 min，吸出上清液轉(zhuǎn)移至10 mL離心管中，并用80%丙酮定容于5 mL，測定663 nm處的吸光度，根據(jù)公式計(jì)算出葉綠素a含量：葉綠素a的含量(mg/L)=D663 nm/82。

1.6 統(tǒng)計(jì)分析

試驗(yàn)數(shù)據(jù)以“平均值±標(biāo)準(zhǔn)差”表示。應(yīng)用SPSS 19.0統(tǒng)計(jì)分析軟件，采用t-檢驗(yàn)進(jìn)行分析，P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果與分析

2.1 不同的N ∶P對威氏海鏈藻生長的影響

2.1.1 固定N含量下不同N ∶P對威氏海鏈藻生長的影響

2.1.1.1 威氏海鏈藻的細(xì)胞密度 由圖1可知，不同試驗(yàn)組中威氏海鏈藻的生物量曲線，威氏海鏈藻在N ∶P=4 ∶1的培養(yǎng)液中，其藻細(xì)胞密度在培養(yǎng)2～4 d呈現(xiàn)快速的增長，4～6 d時增長緩慢。威氏海鏈藻的生長狀況在N ∶P=16 ∶1條件下藻細(xì)胞密度增長速率最快，曲線的波動性小，直線增長。

2.1.1.2 威氏海鏈藻吸光度 由圖2可知，威氏海鏈藻在 N ∶P=20 ∶1 的培養(yǎng)液中，吸光度曲線相比于其他試驗(yàn)組的平穩(wěn)增長，其增長狀況在0～6 d時穩(wěn)定增長，6～8 d時并未出現(xiàn)增長。培養(yǎng)后8 d吸光度最低的則為N ∶P=12 ∶1試驗(yàn)組，D680 nm值為0.148。在觀察期內(nèi)N ∶P為4 ∶1，試驗(yàn)組D680 nm值始終高于其他試驗(yàn)組(P)，8 dD值為0.221，經(jīng)t-檢驗(yàn)，N ∶P=4 ∶1試驗(yàn)組的吸光度明顯高于其他組(P<0.05)。

2.1.1.3 威氏海鏈藻葉綠素含量 由圖3可知，不同氮磷比培養(yǎng)基中威氏海鏈藻葉綠素含量與所測得藻液吸光度的生長

曲線相似，在培養(yǎng)條件為N ∶P=4 ∶1時藻液的葉綠素含量呈指數(shù)增長，增長速率最快，在培養(yǎng)了8 d后葉綠素的含量最高，達(dá)到了572.34 mg/m3。經(jīng)t-檢驗(yàn)，N ∶P=4 ∶1試驗(yàn)組的葉綠素含量從培養(yǎng)4 d到培養(yǎng)期結(jié)束均顯著高于其他組(P<0.05)。葉綠素含量最低的則為N ∶P=12 ∶1試驗(yàn)組，在培養(yǎng)期內(nèi)每天所測得的葉綠素含量都是最低的。

2.1.2 固定P含量下不同N ∶P對威氏海鏈藻生長的影響

2.1.2.1 威氏海鏈藻的生物量 由圖4可知，不同N ∶P試驗(yàn)組在培養(yǎng)0～2 d內(nèi)藻細(xì)胞密度均在增長，增長最為顯著的是N ∶P=4 ∶1、12 ∶1 、20 ∶1培養(yǎng)基中的藻液。N ∶P=16 ∶1 試驗(yàn)組藻在培養(yǎng)6 d內(nèi)一直增長，在6～8 d時出現(xiàn)了藻類的死亡使細(xì)胞濃度減少，而其余各組在培養(yǎng)期間內(nèi)都有一定的波動性。經(jīng)t-檢驗(yàn)，N ∶P=16 ∶1試驗(yàn)組的葉綠素含量均顯著高于其他組(P<0.05)?？梢姡虾ｆ溤逶贜 ∶P=16 ∶1 的培養(yǎng)基條件下生長情況最好。

2.1.2.2 威氏海鏈藻光密度值 由圖5可知，各威氏海鏈藻試驗(yàn)組的吸光度在培養(yǎng)0～4 d內(nèi)都有明顯的上升，隨后在培養(yǎng)4～6 d時其值均出現(xiàn)了下降，只有N ∶P=16 ∶1試驗(yàn)組的吸光度在培養(yǎng)4～6 d維持不變，仍為0.115，可以說明在 N ∶P=16 ∶1試驗(yàn)組培養(yǎng)基中的藻類雖沒有在增長但相較于其他組也沒有出現(xiàn)大量的死亡，且在觀察期結(jié)束時，該試驗(yàn)組藻液的吸光度達(dá)到最高值，為0.127。

2.1.2.3 威氏海鏈藻葉綠素含量 由圖6可知，N ∶P=4 ∶1的試驗(yàn)組葉綠素含量在觀察期的4 d后出現(xiàn)明顯的下降，其余試驗(yàn)組在培養(yǎng)2 d后葉綠素含量開始下降，與所測得藻液的吸光度不一樣，吸光度在培養(yǎng)4 d后開始下降，但培養(yǎng)的 6 d 葉綠素含量與吸光度一樣，都又開始增長了。相比于其他試驗(yàn)組，只有N ∶P=16 ∶1試驗(yàn)組的藻液的葉綠素含量在培養(yǎng)4～6 d時增加了，其余各組維持不變或有大幅下降趨勢，觀察期結(jié)束時，測得N ∶P=16 ∶1 培養(yǎng)基中的藻液葉綠素含量最高，經(jīng)t-檢驗(yàn)(P<0.05)可以得出該試驗(yàn)組的威氏海鏈藻的生長情況是最好的，吸光度和葉綠素含量達(dá)到最高。

2.2 不同K ∶Na(摩爾比)環(huán)境對威氏海鏈藻生長的影響

2.2.1 威氏海鏈藻的生物量 由圖7可知，威氏海鏈藻在 K ∶Na=1 ∶3、3 ∶1試驗(yàn)組的藻細(xì)胞密度在培養(yǎng)期間一直增長，K ∶Na=1 ∶1試驗(yàn)組的藻液濃度雖在培養(yǎng)0～4 d出現(xiàn)了大量的增長，所測得的藻細(xì)胞密度均比其余2個試驗(yàn)組高，但在觀察期4～6 d卻出現(xiàn)了大幅下降，代表藻類出現(xiàn)了大量的死亡。K ∶Na=1 ∶3試驗(yàn)組的培養(yǎng)基在培養(yǎng)8 d后其中的藻細(xì)胞數(shù)量最多，比原始培養(yǎng)增長了約5倍。

2.2.2 威氏海鏈藻光密度值 由圖8可知，威氏海鏈藻在 K ∶Na=1 ∶1的培養(yǎng)基中的吸光度的曲線與生物量是相似的，均在增長后大幅度下降。K ∶Na=3 ∶1試驗(yàn)組藻的吸光度明顯地升高，而K ∶Na=1 ∶3的培養(yǎng)基中藻的吸光度與生物量曲線相似，呈穩(wěn)定上升趨勢，在培養(yǎng)期結(jié)束時其吸光度也達(dá)到0.164。

2.2.3 威氏海鏈藻葉綠素含量 由圖9可知，在不同K ∶Na的培養(yǎng)條件下，威氏海鏈藻均可以生長，其葉綠素含量都呈增加趨勢，只是各試驗(yàn)組在培養(yǎng)2～4 d時均有下降的趨勢，但 4 d 后又呈現(xiàn)增長的情況，藻的葉綠素含量增長最快的是 K ∶Na=1 ∶3 試驗(yàn)組，在培養(yǎng)期內(nèi)每次所測得的葉綠素含量都是最高的，最終為372.31 mg/m3。

2.3 不同Si含量的培養(yǎng)液對威氏海鏈藻生長的影響

2.3.1 威氏海鏈藻的生物量 由圖10可知，威氏海鏈藻在過高Si含量的培養(yǎng)液中長勢最差，與初始培養(yǎng)基中藻細(xì)胞密度相比，其細(xì)胞密度只是出現(xiàn)微量的增加，沒有硅元素添加的試驗(yàn)組雖比Si含量為4 mg/L藻細(xì)胞濃度高，但遠(yuǎn)沒有添加Si元素0.5、1.2 mg/L的試驗(yàn)組生長狀況好(P<0.05)，培養(yǎng)8 d后藻細(xì)胞密度最高的是硅含量為0.5 mg/L的試驗(yàn)組。

2.3.2 威氏海鏈藻吸光度 由圖11可知，不同Si含量的培養(yǎng)基中所測得威氏海鏈藻液的吸光度均呈上升趨勢，與測得的藻細(xì)胞密度生長狀況類似，在培養(yǎng)8 d后Si含量為4 mg/L時吸光度為最低，與其他試驗(yàn)培養(yǎng)基中測得的吸光度差異顯著(P<0.05)，Si含量為1.2 mg/L的吸光度最高。

2.3.3 威氏海鏈藻葉綠素含量 由圖12可知，威氏海鏈藻在不同Si含量的培養(yǎng)基中生長一段時間后，所測得葉綠素含量與上述吸光度結(jié)果相似，Si含量為4 mg/L的試驗(yàn)組葉綠素含量也是最低的，沒有Si元素培養(yǎng)基中的藻的葉綠素含量增長也不是最高的，Si含量為1.2 mg/L的試驗(yàn)組測得的葉綠素含量到達(dá)347 mg/m3，是最高的。

2.4 不同F(xiàn)e含量對威氏海鏈藻生長的影響

2.4.1 威氏海鏈藻的生物量 由圖13可知，威氏海鏈藻的藻細(xì)胞濃度波動性相對較小的是Fe含量為1 mg/L的試驗(yàn)組，藻細(xì)胞密度呈穩(wěn)定的增多。而其余各組藻細(xì)胞的生長均有快速增長和死亡期，在圖13中所表現(xiàn)出的即是細(xì)胞密度較大的波動性。

2.4.2 威氏海鏈藻吸光度 由圖14可知，該藻在Fe含量為2 mg/L試驗(yàn)組中穩(wěn)定增長，達(dá)到0.12；Fe含量為0.0、0.5、1.0 mg/L 時，藻類吸光度上升后又出現(xiàn)了下降，與培養(yǎng)2 d后基本相同。

2.4.3 威氏海鏈藻葉綠素含量 由圖15可知，缺少Fe元素的培養(yǎng)液是不適合威氏海鏈藻的生長的，表現(xiàn)為其葉綠素含量直線下降，培養(yǎng)8 d后的藻液葉綠素含量較初始培養(yǎng)基中藻液的葉綠素含量還低，說明藻類出現(xiàn)了大量的死亡。Fe是微量元素，在培養(yǎng)液中添加一定量的Fe可以促進(jìn)藻類的生長。相較于Fe含量為0.0 mg/L的試驗(yàn)組，F(xiàn)e含量為0.5、1.0 mg/L 的威氏海鏈藻的葉綠素含量保持相等。藻液長勢最好的則為培養(yǎng)基中Fe含量為2 mg/L的試驗(yàn)組，葉綠素含量增長最多，曲線明顯的上升，比初始值增長了3倍。

3 討論

3.1 不同N ∶P對威氏海鏈藻生長的影響

培養(yǎng)液中的N是組成植物細(xì)胞內(nèi)的蛋白質(zhì)、核酸等活性物質(zhì)的重要成分，P具有作為底物或調(diào)節(jié)物參與其光合作用，所以不同N ∶P的培養(yǎng)基會影響威氏海鏈藻的生長。

根據(jù)所測定的威氏海鏈藻的生物量、吸光度、葉綠素含量3個測定結(jié)果看，在N ∶P=16 ∶1的情況下增長速率更趨穩(wěn)定，符合Redfield的16 ∶1比值[11]。微藻對主要營養(yǎng)鹽(氮磷)的吸收是根據(jù)自身需要按一定的比例進(jìn)行的[12]。在分別固定N和P的條件下，威氏海鏈藻更適應(yīng)N ∶P=16 ∶1的培養(yǎng)液。含氮量較少或較多試驗(yàn)組的藻的生長受到了一定的限制，不同含磷量藻類都呈現(xiàn)增長趨勢，但增長速率不一樣。本組試驗(yàn)處理表明環(huán)境中的氮濃度影響遠(yuǎn)大于磷濃度的影響。這與一些赤潮發(fā)生的氮磷比環(huán)境相似[13]。

3.2 不同K ∶Na對威氏海鏈藻生長的影響

由此推測，培養(yǎng)液中K、Na的含量和比例可能會影響藻類的生長。試驗(yàn)結(jié)果表明，在K ∶Na=1 ∶1時，培養(yǎng)藻液的細(xì)胞密度及吸光度在觀察后4 d達(dá)到該組試驗(yàn)培養(yǎng)期內(nèi)的峰值，但隨后迅速減少，可能是因?yàn)樵?種元素在藻細(xì)胞組成所占的比例不一樣，外界培養(yǎng)環(huán)境中的該種元素限制了藻類的生長，藻類迅速生長后由于其制約作用又導(dǎo)致藻類的大量死亡。相較于K ∶Na=1 ∶1，其余K ∶Na=1 ∶3、3 ∶1的藻細(xì)胞從所測定的結(jié)果來看，雖然其增長速率不一樣，但均能一直增殖。

3.3 不同Si含量對威氏海鏈藻生長的影響

Si是硅藻生長繁殖的必需營養(yǎng)元素，它除了作為細(xì)胞壁結(jié)構(gòu)成分外，還參與蛋白質(zhì)、光合色素及DNA合成和細(xì)胞分裂等多種代謝和生長過程[14]。

對營養(yǎng)鹽硅的研究比較少。Lippemeier等研究了不同濃度的硅對硅藻的影響，結(jié)果表明，當(dāng)Si受限時，其非光化學(xué)淬滅qN很強(qiáng)，F(xiàn)、Fm、Fv/Fm下降[15]。當(dāng)Si恢復(fù)正常濃度后，F(xiàn)、Fm、Fv/Fm在20 min內(nèi)快速上升。細(xì)胞密度在Si含量為 0.5 mg/L 時達(dá)到最大值，威氏海鏈藻的生長隨著硅含量的增加而加快，呈現(xiàn)出“低—高—低”的現(xiàn)象。本試驗(yàn)表明，較低Si含量限制了威氏海鏈藻的生長，這可能是因?yàn)镾i元素參與細(xì)胞組成，微量元素缺失，不能夠供應(yīng)細(xì)胞正常的新陳代謝，導(dǎo)致光合作用減弱，細(xì)胞生長周期縮短。此外伴隨著其他營養(yǎng)鹽(N、P、Fe等)的消耗，Si限制變得不明顯。Si含量為 4 mg/L 時，威氏海鏈藻生長速度最慢，細(xì)胞密度和葉綠素含量最低，這是過高的Si含量限制了威氏海鏈藻的生長。這可能是高濃度的Si加快了威氏海鏈藻的代謝速度，不能累計(jì)足夠的營養(yǎng)物質(zhì)，供給細(xì)胞分裂的能量，導(dǎo)致藻類提前進(jìn)入衰退期。此外，還可以看出，無論Si含量過高還是過低，相對于Si含量為0 mg/L時，都對威氏海鏈藻的生長起了促進(jìn)作用，證明Si元素是威氏海鏈藻生長所必需的微量元素之一。

3.4 不同F(xiàn)e含量對威氏海鏈藻生長的影響

Fe是浮游植物生長的必需營養(yǎng)素，參與藻類細(xì)胞基本生理功能如光合作用和呼吸作用。水環(huán)境中Fe的可利用程度影響浮游植物的生產(chǎn)力、群落結(jié)構(gòu)和生態(tài)功能[16-18]。在藻類進(jìn)行碳氮同化、色素合成及光合作用的過程中，F(xiàn)e是必不可少的元素[19]。適宜的鐵濃度對浮游植物的生長具有促進(jìn)作用[20]。當(dāng)Fe受到限制時，浮游植物會呈現(xiàn)出典型的黃化現(xiàn)象，細(xì)胞體積變小，細(xì)胞內(nèi)葉綠素?cái)?shù)量減少，色素結(jié)合蛋白與光合作用蛋白也相應(yīng)減少[21]。研究表明，F(xiàn)e能夠控制葉綠素的生物合成[22-23]。Fe離子在細(xì)胞呼吸鏈中起著重要作用，它形成的鐵硫蛋白組成了呼吸鏈復(fù)合物Ⅰ、Ⅱ轉(zhuǎn)移體、Ⅲ，擔(dān)任了電子的傳遞體及質(zhì)子的移位體，促進(jìn)細(xì)胞內(nèi)ADP合成ATP，為細(xì)胞新陳代謝提供能量。

在Fe含量為0 mg/L的情況下，威氏海鏈藻生長顯著比添加Fe離子的試驗(yàn)組生長緩慢，細(xì)胞密度在4 d之后呈下降趨勢，說明在消耗完常量元素N、P等之后，微量元素Fe成為了限制藻類生長的因素。Fe含量為1、2 mg/L時，藻類生長速度和細(xì)胞密度顯著高于0.5 mg/L，但是葉綠素含量在Fe含量為2 mg/L時最大，證明了Fe離子參與細(xì)胞的組成，并參與線粒體的氧化磷酸化，給細(xì)胞生長、繁殖提供能量。適宜Fe濃度對浮游植物的生長具有促進(jìn)作用[24]。Fe離子作為藻類生長所必需的微量元素，在細(xì)胞培養(yǎng)中必須添加一定量的Fe元素。在海洋大環(huán)境中，控制含F(xiàn)e廢水的肆意排放，能夠有效地預(yù)防赤潮等發(fā)生。

4 結(jié)論

培養(yǎng)環(huán)境中不同的N ∶P影響著威氏海鏈藻的生長速率，但是環(huán)境中的N濃度對其生長的制約作用要比P濃度顯著，固定P的條件下生長趨勢較固定N時生長曲線更為易辨。在其他條件不變的情況下，威氏海鏈藻N ∶P的組成都較接近于Redfield比值吸收外界營養(yǎng)鹽N ∶P=16 ∶1。

不同K ∶Na的培養(yǎng)液條件下，威氏海鏈藻的各生物學(xué)指標(biāo)的區(qū)別并沒有其他試驗(yàn)組的曲線區(qū)別更具有差異性，但也可以得出在K ∶Na為1 ∶3時生長最為快速及平穩(wěn)，藻細(xì)胞密度、藻液的吸光度和葉綠素含量都能到達(dá)最高，K ∶Na=1 ∶1 的試驗(yàn)組各生物學(xué)指標(biāo)都是最低的，而且各曲線的波動性液較大，K ∶Na=3 ∶1對威氏海鏈藻的生長沒有抑制作用但也沒有很大的促進(jìn)作用。

培養(yǎng)液中沒有相應(yīng)的元素Si或含量過高均對威氏海鏈藻的增長起一定的抑制作用，所測得的藻細(xì)胞密度、吸光度和葉綠素含量都沒有其含量為0.5、1.2 mg/L測得的指標(biāo)高，可得出威氏海鏈藻只有在適量Si元素的添加的培養(yǎng)基中才能平穩(wěn)的增長，該試驗(yàn)得出Si含量為1.2 mg/L時最適合該藻的生長。

Fe是葉綠素合成的重要元素之一，在缺Fe即Fe=0 mg/L 的條件下葉綠素含量很低，藻類出現(xiàn)了大量的死亡。在Fe含量最高(為2 mg/L)時，測得威氏海鏈藻的葉綠素含量最高。根據(jù)其細(xì)胞密度及吸光度來看，在Fe含量最高時，生長狀況也最好。

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