(大英縣畜牧食品局,四川大英 629300)
豬附紅細胞體病(Porcine eperythrozoonosis,PE)是由豬附紅細胞體(Eperythrozoon suis,E.suis)寄生于紅細胞表面或游離于血漿和骨髓中而引起的一種以貧血、黃疸、發(fā)熱為主要臨床特征的人畜共患病。該病常與其他豬病混合感染,表現(xiàn)出多種臨床癥狀,而且該病的隱性感染率高,潛在的危害性很大,是嚴重威脅養(yǎng)豬業(yè)和公共衛(wèi)生安全的傳染病之一。
附紅細胞體的分類一直存有爭議,1993年,《伯吉氏細菌鑒定手冊》依據(jù)生物學特性及表型特征,將附紅細胞體屬(Eperythrozoon)和血巴爾通體屬(Haemobartonella)作為母血營養(yǎng)的微生物劃分為微粒孢子科(Anaplasmataceae),該科與立克次氏體科(Rickettsiaceae)、巴爾通體科(Bartonellaceae)一起被劃分為立克次氏體目(Rickettsiales)。然而,有學者認為附紅細胞體和血巴爾通體不屬于立克次氏體,更接近于軟體綱動物,因為它們沒有細胞內(nèi)寄生能力,個體小,無細胞壁,無鞭毛,對青霉素及其類似物具有抵抗力,對四環(huán)素敏感,這些特點都與支原體相似。
豬附紅細胞體光鏡下形態(tài)呈小球狀、卵圓形、桿狀或環(huán)形等多種形態(tài),大小為0.3~1.3×0.5~2.6 μm,平均直徑0.2~2 μm,它們單獨或成簇附著于紅細胞表面,或游離于血漿中(見圖1),附著于紅細胞表面時看不到運動,游離狀態(tài)下則可作搖擺、扭轉(zhuǎn)、翻滾等運動。豬附紅細胞體可被多種染料染色,經(jīng)姬姆薩或瑞氏染色后為藍紫色,革蘭氏染色陰性。電鏡觀察豬附紅細胞體有單層膜,無細胞壁,無明顯細胞器,無核狀結(jié)構(gòu),可見顆粒狀物分布在胞質(zhì)內(nèi),整個細胞呈圓盤狀,一面凹陷,一面凸出,單個或成簇以凹面附著在紅細胞表面,較大的成熟附紅細胞體可使附著處的紅細胞膜結(jié)構(gòu)改變、變形,甚至產(chǎn)生空洞,有些附紅細胞體可伸出纖絲,嵌在細胞膜上,被寄生的紅細胞變形為錘狀、星芒狀、齒輪狀或不規(guī)則形狀。
圖1 豬附紅細胞體吖啶橙染色照片(100×)
豬附紅細胞體多呈隱性感染,感染動物可能不表現(xiàn)任何臨床癥狀,但卻可以引起豬免疫抑制。豬附紅細胞體病的發(fā)生很大程度上取決于個體的易感性和環(huán)境因素的作用,正常豬通過靜脈注射感染后,3~7d可以在血液中檢出附紅細胞體,而去脾豬感染后2 d即可檢出。哺乳仔豬和保育豬感染后病死率較高,急性發(fā)病一般表現(xiàn)為精神沉郁,食欲不振,皮膚發(fā)紅,高熱稽留,耐過后常常生長停滯而成為僵豬;成年豬病死率較低,但可導致母豬生殖機能下降,繁殖障礙,不發(fā)情,流產(chǎn)和死胎等。貧血和黃疸是豬附紅細胞體病特征性病理變化,病豬血液稀薄如水,凝固不良,紅細胞比容降低,肝臟腫大,呈棕黃色,脾臟腫大,質(zhì)地柔軟,全身淋巴結(jié)腫大出血,心臟擴張,心包內(nèi)有淡紅色液體,心冠脂肪黃染,肺水腫,骨髓液和腦積液增多。
豬附紅細胞體病慢性病例一般表現(xiàn)為皮膚蒼白,生長遲滯,同時由于附紅細胞體抑制機體免疫機能,容易誘發(fā)混合感染,使疾病復雜化,給診斷和治療帶來困難。筆者查閱了中國1990~2008年公開發(fā)表的98篇豬附紅細胞體病病例報告,混合感染為86篇,占報告總數(shù)的87.75%,其中豬附紅細胞體與豬瘟病毒、豬鏈球菌、豬繁殖與呼吸綜合征病毒、弓形體、大腸桿菌、圓環(huán)病毒、偽狂犬病毒等的混合感染較多見。目前國內(nèi)養(yǎng)豬業(yè),特別是規(guī)?;B(yǎng)豬場,在飼料中添加藥物的“保健”措施比較普遍,在大量使用藥物的壓力下,附紅細胞體感染后,機體往往處于亞臨床狀態(tài),自身的抗病能力減弱,在受到其他病原體侵襲后,極易發(fā)生混合感染,這對豬群的安全是十分嚴重的威脅。
附紅細胞體附著在紅細胞膜上后,機體產(chǎn)生冷凝集素(Cold agglutinins,CAs),冷凝集素攻擊被感染的紅細胞而發(fā)生溶血,同時附紅細胞體感染還能夠誘導機體產(chǎn)生自體免疫抗體,導致過敏反應,進一步引起免疫性溶血,使紅細胞數(shù)減少,血紅蛋白降低,導致機體出現(xiàn)貧血。研究顯示,在感染豬表現(xiàn)典型附紅細胞體病臨床癥狀的階段,機體內(nèi)附紅細胞體特異性免疫反應反而減弱,而自體免疫反應卻在增強,這種現(xiàn)象的發(fā)生機制及其與冷凝集素的關系目前尚不清楚。附紅細胞體附著在紅細胞上,不僅可改變紅細胞表面結(jié)構(gòu),致使其膜抗原發(fā)生改變,并導致紅細胞的變形性、可塑性消失,因而在脾竇內(nèi)滯留時間延長,得以被免疫活性細胞吞噬和清除。當脾臟被切除后,這一功能喪失,加之術后應激狀態(tài)下全身免疫機能整體下降,豬附紅細胞體極易感染并迅速繁殖,導致臨床癥狀兇險,也加劇了溶血性貧血的發(fā)生和黃疸及血紅蛋白尿的形成。
由于附紅細胞體的大量繁殖,宿主動物機體的糖分解迅速增加,附紅細胞體通過糖酵解消耗糖,同時產(chǎn)生大量乳酸,因此豬附紅細胞體急性感染可導致嚴重的低血糖癥和酸中毒。隱性感染動物的血糖濃度可比正常下降25%左右,急性發(fā)病則更嚴重得多,患病動物由于血液中乳酸和丙酮酸含量上升而出現(xiàn)酸中毒,同時,被感染的紅細胞攜氧能力降低,影響肺臟氣體交換,導致機體呼吸困難。
根據(jù)1990~2008年間公開發(fā)表的豬附紅細胞體病的流行病學調(diào)查和病例報告,全國已有26個省區(qū)存在豬附紅細胞體病,在中國的東北、華北、西北、中南、西南、東南均存在豬附紅細胞體流行地區(qū),這說明,豬附紅細胞體病在中國的地域分布十分廣泛。在22篇豬附紅細胞體病流行病學調(diào)查中,樣品感染率在50%以上的有19篇,占總篇數(shù)的86.36%,雖然感染率極高,但所檢出的附紅細胞體陽性豬大多數(shù)為隱性感染。隱性感染豬不表現(xiàn)臨床癥狀,但卻可以持續(xù)傳播病原體,導致更多的豬感染,另外,由于附紅細胞體可以寄生在藥物無法到達的骨髓中,病豬“康復”后仍然攜帶蟲體,這同樣可以造成病原體傳播,且“康復豬”容易出現(xiàn)附紅細胞體病的反復發(fā)作。
多篇流行病學調(diào)查顯示,中國人群的附紅細胞體感染率較高,且與職業(yè)呈現(xiàn)一定的相關性,經(jīng)常與動物或動物制品接觸的人群(如:養(yǎng)殖場飼養(yǎng)員、牧民、獸醫(yī)、屠宰廠工人、餐飲業(yè)者等)感染率高于其他人群。附紅細胞體感染與年齡相關性不明顯,但機體免疫機能發(fā)育不完全或衰退者(如:兒童、老人及免疫機能障礙者)更容易發(fā)病,尚德秋等推測附紅細胞體病的發(fā)生主要與機體的免疫狀況有關。
目前,獸醫(yī)臨床診斷豬附紅細胞體病的主要方法是臨床癥狀觀察結(jié)合血涂片染色鏡檢,常用的染色方式為吉姆薩染色或瑞氏染色,這種方法快速、簡便,對檢測條件要求很低,國內(nèi)流行病學調(diào)查絕大多數(shù)以臨床癥狀觀察結(jié)合血涂片法作為診斷依據(jù),有學者對此提出異議,認為正常紅細胞在血涂片制作過程中,也可能發(fā)生變形,變形率約為1%~3%,這降低了血涂片法的準確性、敏感性和特異性,使得假陽性增多。
近年來,隨著豬附紅細胞體病在全球的蔓延,豬附紅細胞體的研究漸成熱點,但是由于其體外培養(yǎng)困難,至今尚未建立成熟的培養(yǎng)方法,這給進一步開展豬附紅細胞體生物學特性研究、篩選有效藥物、制備診斷抗原及研制疫苗造成了困難。豬附紅細胞體病的防治主要依靠藥物,有關豬附紅細胞體疫苗的研制報道極少,曾有文獻報道將豬附紅細胞體滅活后免疫仔豬,結(jié)果顯示所制疫苗保護期可達6~8個月,但未見后續(xù)相關報道。