周秋梅 陳小燕 段定 曾華婷 陳洪

【摘 要】采取水提醇沉法探討滸苔中多糖的提取工藝，研究溫度、時間、料液比三因素對多糖提取的影響。通過單因素和正交試驗(yàn)得到滸苔多糖提取最佳工藝組合為：溫度100℃，時間5h，料液比（g/ml）1：40。

【關(guān)鍵詞】滸苔多糖；提取工藝

中圖分類號： TQ461 文獻(xiàn)標(biāo)識碼： A 文章編號： 2095-2457（2018）01-0051-002

【Abstract】The extraction process of polysaccharides from Enteromorpha prolifera was studied by water extraction and alcohol precipitation method.The effects of temperature，time and solid-liquid ratio on the extraction of polysaccharides were studied.The optimal combination of polysaccharides from Enteromorpha polysaccharides was obtained by single factor and orthogonal experiments as follows：temperature 100℃，time 5h，ratio of material to liquid（g/ml）1：40.

【Key words】Enteromorpha polysaccharides；Extraction process

滸苔（Enteromorpha）屬于綠藻門、綠藻綱、石莼目、石莼科滸苔屬藻類植物，是重要的經(jīng)濟(jì)海藻，也是一種海洋中藥。滸苔在農(nóng)業(yè)、食品、化工、醫(yī)藥等行業(yè)被廣泛應(yīng)用[1]。充分開發(fā)利用豐富的滸苔資源是改善生態(tài)環(huán)境和海藻綜合利用的重要課題。滸苔多糖的提取方法有多種[2]，但水提醇沉法是多糖提取的傳統(tǒng)方法，該方法所使用的試驗(yàn)設(shè)備簡單，操作方便，準(zhǔn)確度高，成本低廉，一次性投入較小，容易實(shí)現(xiàn)工業(yè)化生產(chǎn)。本實(shí)驗(yàn)中采用水提醇沉法探討了滸苔多糖的提取工藝，通過單因素和正交試驗(yàn)，比較提取時間、料液比和溫度對多糖提取率的影響，確定了滸苔多糖提取的最佳工藝，為開發(fā)和利用滸苔多糖提供理論參考。

1 實(shí)驗(yàn)部分

1.1 材料、儀器及試劑

材料：滸苔，浙江寧波，干燥野生滸苔。

試劑：葡萄糖、重蒸酚、95%乙醇、濃硫酸等。

儀器：AUY120型電子天平，SHZ-DⅢ型循環(huán)真空泵，UV-2012PCS紫外分光光度計(jì)，DF-1O1S型集熱式恒溫磁力攪拌器。

1.2 試驗(yàn)方法

1.2.1 滸苔多糖提取工藝流程：

滸苔5.0g干燥粉碎→水提→抽濾得濾液→真空濃縮→加95%乙醇醇沉→抽濾得濾液→真空濃縮→滸苔多糖→用蒸餾水稀釋至料液比對應(yīng)體積→澄清液（備用）

1.2.2 提取液多糖含量測定

多糖含量測定采用苯酚-硫酸法[3]。

以葡萄糖為標(biāo)樣，以葡萄糖質(zhì)量為橫坐標(biāo)，吸光度為縱坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，用上法測定，得回歸方程為y=17.123x+0.0065，r=0.9997。

1.2.3 滸苔多糖提取率的測定及計(jì)算

取備用的澄清液1ml于10ml容量瓶中加蒸餾水定容，取1ml稀釋液，于490nm處測定其吸光度，根據(jù)以下公式計(jì)算出多糖提取率。式中：C為根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線回歸方程計(jì)算得到的樣品多糖濃度（mg/ml），V為提取液總體積（ml），M為滸苔質(zhì)量（g），10為1ml提取液稀釋倍數(shù)，1000為mg與g的單位換算率。

多糖提取率=■×100%

2 結(jié)果與討論

2.1 滸苔多糖提取單因素實(shí)驗(yàn)

2.1.1 溫度對滸苔多糖提取率的影響

料液比（g/ml）1：50，時間4h，探討提取溫度為60、70、80、90、100℃，5個不同水平對滸苔多糖提取率的影響。多糖提取率（%）分別為1.182，1.378，1.843，2.016，2.085。由此可知，多糖提取率隨著溫度的上升而增加，當(dāng)溫度達(dá)到100℃時多糖提取率為2.085，此時提取率比60℃時提高了76.40%，可見溫度對多糖提取率有顯著的影響，溫度100℃時提取率最佳。隨溫度的增加，提取率雖有提高，但逐漸放緩，且溫度增加會增加成本。綜合考慮，本實(shí)驗(yàn)選擇溫度（℃）80、90、100為正交試驗(yàn)因素。

2.1.2 時間對滸苔多糖提取率的影響

料液比（g/ml）1：50，溫度100℃，探討提取時間（h）為1、2、3、4、5 五個不同水平對滸苔多糖提取率的影響。多糖提取率（%）分別為1.534，1.538，1.964，2.125，1.673。由此可知，提取時間在4h時提取率達(dá)到最大值2.125，此時提取率比1h時提高了38.53%；此后，隨時間的延長，多糖提取率呈下降趨勢，可能是高溫下長時間提取會造成多糖的分解，導(dǎo)致多糖提取率的減少，時間4h時提取率最佳。

2.1.3 料液比對滸苔多糖提取率的影響

溫度為100℃，時間為4h，探討料液比（g/ml）為1：20、1：30、1：40、1：50、1：60五個不同水平對多糖提取率的影響。多糖提取率（%）分別為1.671，1.801，1.646，2.011，1.78。由此可知，料液比（g/ml）1：50提取率最佳。

2.2 滸苔多糖提取的正交實(shí)驗(yàn)結(jié)果

正交試驗(yàn)是在單因素實(shí)驗(yàn)的基礎(chǔ)上，選擇提取溫度（A）、時間（B）、料液比（C）為考察因素，以多糖提取率為指標(biāo)，采用正交試驗(yàn)法確定滸苔多糖提取的最佳工藝。

由表2可知，采用水提醇沉法浸提滸苔多糖，影響多糖提取率的因素主次順序依次為A（提取溫度）>B（提取時間）>C（料液比）。根據(jù)極差分析得到滸苔多糖提取最優(yōu)方案為A3B3C1。

3 結(jié)論

影響多糖提取率的因素主次順序依次為提取溫度、提取時間、料液比，其中，提取溫度對滸苔多糖提取率的影響顯著。滸苔多糖最佳提取工藝為：提取溫度100℃，提取時間5小時，料液比（g/ml）1：40。

【參考文獻(xiàn)】

[1]單俊偉，劉海燕.滸苔的研究與資源化利用進(jìn)展[J].現(xiàn)代農(nóng)業(yè)科技，2016（15）：258-260.

[2]唐志紅，于志超.滸苔多糖超聲波提取工藝的研究[J].現(xiàn)代食品科技，2011，27（01）：56-59.

[3]張青，張?zhí)烀?苯酚-硫酸比色法測定多糖含量[J].山東食品科技，2004（7）：17-18.