余賢美 王潔 侯長明 張坤鵬 艾呈祥
摘要:采用菌絲生長速率法和孢子萌發(fā)法測定了16種常用殺菌劑對柿樹炭疽病菌哈銳炭疽菌(Colletotrichum horii)菌絲生長及孢子萌發(fā)的影響。結(jié)果顯示,16種常用殺菌劑中,10%苯醚甲環(huán)唑散粒劑、33.5%喹啉銅懸浮劑、25%溴菌腈乳油、70%代森錳鋅可濕性粉劑、430 g·L-1戊唑醇懸浮劑、50%咪鮮胺錳鹽可濕性粉劑、400 g·L-1氟硅唑乳油、250 g·L-1己唑醇懸浮劑、70%代森聯(lián)水分散粒劑、22%多菌靈+8%戊唑醇(福連)和50%福美雙可濕性粉劑等11種殺菌劑對菌絲生長抑制效果較好,抑制率為95.63%~100%;70%代森聯(lián)水分散粒劑、33.5%喹啉銅懸浮劑、25%溴菌腈乳油、70%代森錳鋅可濕性粉劑、50%氯溴異氰尿酸水溶性粉劑、50%福美雙可濕性粉劑和400 g·L-1氟硅唑乳油等7種藥劑處理對病原菌分生孢子抑制效果較好,分生孢子萌發(fā)率為0~3.33%。其中,33.5%喹啉銅懸浮劑、25%溴菌腈乳油、70%代森錳鋅可濕性粉劑和400 g·L-1氟硅唑乳油對柿樹炭疽病菌菌絲生長和產(chǎn)孢的抑制效果均較好,可作為防治柿樹炭疽病的優(yōu)選藥劑,其次為70%代森聯(lián)水分散粒劑和50%福美雙可濕性粉劑,可作為備選藥劑。該研究結(jié)果可為柿樹炭疽病的有效防治提供科學依據(jù)和試驗數(shù)據(jù)。
關(guān)鍵詞:柿樹炭疽??;哈銳炭疽菌;抑菌藥劑;室內(nèi)藥劑篩選
中圖分類號:S436.65文獻標識號:A文章編號:1001-4942(2018)03-0090-04
Abstract In this research,the inhibitory effects of 16 fungicides on Colletotrichum horri causing persimmon anthracnose were investigated using mycelial growth and spore germination methods.The results showed that among the 16 tested fungicides, 10% difenoconazole WG, 33.5% copper quinolate SC, 25% bromothalonil EC, 70% mancozeb WP, 430 g·L-1 tebuconazole SC, 50% prochloraz-manganese chloride, 400 g·L-1 flusilazole EC, 250 g·L-1 hexaconazole SC, 70% polyram WG, 22% carbendazim+8% tebuconazole (Fulian), and 50% thiram WP achieved better inhibitory effects on mycelial growth of C.horri with the inhibition rate of 95.63%~100%;70% polyram WG, 33.5% copper quinolate SC, 25% bromothalonil EC, 70% mancozeb WP, 50% chlorobromoisocyanuric acid SP, 50% thiram WP and 400 g·L-1 flusilazole EC achieved better inhibitory effects on spore germination of C.horri with the germination rate of 0~3.33%. In conclusion,33.5% copper quinolate SC, 25% bromothalonil EC, 70% mancozeb WP and 400 g·L-1 flusilazole EC achieved the best inhibitory effects both on mycelial growth and spore germination, so they could be used as the preference fungicides for the control of persimmon anthracnose. The fungicides of 70% polyram WG and 50% thiram WP also achieved better inhibitory effects, and they could be used as the alternative fungicides. These results could provide scientific references and data for effective control of persimmon anthracnose.
Keywords Persimmon anthracnose; Colletotrichum horri; Inhibitory fungicides;Fungicide screening in laboratory
由哈銳炭疽菌(Colleltrichum horii)引起的柿樹炭疽病,是柿樹生產(chǎn)上的一種毀滅性病害,幾乎分布于國內(nèi)柿樹主要栽培區(qū),嚴重制約了我國柿樹產(chǎn)業(yè)的可持續(xù)發(fā)展[1,2]。對于柿樹炭疽病的防治,在加強栽培管理措施、提高植株抗病能力的基礎(chǔ)上,仍以化學藥劑為主,常用殺菌劑有咪鮮胺、苯醚甲環(huán)唑、戊唑醇、代森猛鋅、甲基硫菌靈、百菌清、多菌靈、異菌脲、敵菌靈、多效唑等[3-10]。然而,由于化學農(nóng)藥的連續(xù)、不合理使用,不僅造成了農(nóng)藥殘留和環(huán)境污染,也使病原菌產(chǎn)生了抗藥性,降低了防治效果[9,10]。因此,有必要篩選出更多有效的殺菌劑,以供合理混用和輪換使用,延緩或減輕抗藥性的產(chǎn)生,延長殺菌劑的使用壽命,最終達到有效防治病害的目的。筆者采用菌絲生長速率法和孢子萌發(fā)法,研究16種生產(chǎn)上常用殺菌劑對柿樹炭疽病菌C.horii的抑制效果,旨在篩選出有效的抑菌藥劑,為柿樹炭疽病的有效防控提供科學依據(jù)。
1 材料與方法
1.1 材料
柿樹炭疽病菌C.horii由本課題組分離保存。16種殺菌劑及其生產(chǎn)廠家詳見表1。
1.2 殺菌劑的抑制效果測定
1.2.1 菌絲生長抑制試驗 采用菌絲生長速率法。在無菌條件下,于PDA培養(yǎng)基凝固前,按照各殺菌劑田間推薦使用濃度,加入相應藥劑混勻,制成含藥培養(yǎng)基,倒平板。待培養(yǎng)基凝固后,將直徑為5 mm的菌餅接種到含藥培養(yǎng)基平板中央,以不含藥的PDA培養(yǎng)基為對照,每處理重復3次,于25℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)5 d后,用十字交叉法測量菌落直徑,計算各處理菌落直徑平均值,并根據(jù)以下公式計算各殺菌劑對菌絲生長的抑制率。
菌絲生長抑制率(%)=(對照菌落直徑-處理菌落直徑)/(對照菌落直徑-菌餅直徑)×100。
1.2.2 孢子萌發(fā)試驗 配制1.0×106個/mL的分生孢子懸浮液,吸取孢子懸浮液和殺菌劑推薦使用濃度的兩倍液各40 μL,混勻后滴于潔凈的單凹載玻片上,置于25℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng),以無菌水為對照。培養(yǎng)8 h后,在顯微鏡下觀察,統(tǒng)計各處理的分生孢子萌發(fā)率。
1.3 數(shù)據(jù)處理
試驗數(shù)據(jù)采用DPS 9.5和Microsoft Excel 2013軟件進行統(tǒng)計分析。
2 結(jié)果與分析
2.1 16種殺菌劑對柿樹炭疽病菌菌絲生長的抑制作用
由表2可知,與對照相比,250 g·L-1己唑醇懸浮劑、70%代森聯(lián)水分散粒劑、22%多菌靈+8%戊唑醇 (福連)、50%福美雙可濕性粉劑、10%苯醚甲環(huán)唑散粒劑、33.5%喹啉銅懸浮劑、25%溴菌腈乳油、70%代森錳鋅可濕性粉劑、430 g·L-1戊唑醇懸浮劑、50%咪鮮胺錳鹽可濕性粉劑和400 g·L-1氟硅唑乳油等11種藥劑,抑菌效果較好,菌絲生長抑制率為95.63%~100%,彼此間均差異不顯著,均顯著高于其他藥劑;其次是1.5%多抗霉素粉劑、95%三乙磷酸鋁可濕性粉劑和50%氯溴異氰尿酸水溶性粉劑,菌絲生長抑制率分別為61.94%、63.11%和62.70%,三者間差異不顯著;77%絡合態(tài)硫酸銅鈣可濕性粉劑和50%多菌靈可濕性粉劑,抑制效果較差,對菌絲生長的抑制率低于50%,二者間差異顯著,均顯著低于其它藥劑。
2.2 16種殺菌劑對柿樹炭疽病菌分生孢子萌發(fā)的影響
由表2可知,16種供試殺菌劑處理柿樹炭疽病菌分生孢子后,其孢子萌發(fā)率有極顯著差異。其中,70%代森聯(lián)水分散粒劑、33.5%喹啉銅懸浮劑、25%溴菌腈乳油、70%代森錳鋅可濕性粉劑、50%氯溴異氰尿酸水溶性粉劑和50%福美雙可濕性粉劑等6種殺菌劑處理后,其孢子萌發(fā)率為零,表明這些藥劑對柿樹炭疽病菌分生孢子萌發(fā)具有很強的抑制作用;400 g·L-1氟硅唑乳油次之,其處理的孢子萌發(fā)率為3.33%,與前面6種藥劑
間差異不顯著,但極顯著低于其它殺菌劑;1.5%多抗霉素粉劑和77%絡合態(tài)硫酸銅鈣可濕性粉劑處理,孢子萌發(fā)率分別為5.67%和7.33%,對柿樹炭疽病菌分生孢子的萌發(fā)也具有較強的抑制作用;抑制效果最差的是50%多菌靈可濕性粉劑、95%三乙磷酸鋁可濕性粉劑、10%苯醚甲環(huán)唑散粒劑和250 g·L-1己唑醇懸浮劑,其分生孢子萌發(fā)率與清水對照相近,甚至高于清水對照。
3 討論與結(jié)論
化學藥劑仍是當今病害防治的主要手段。對于柿樹炭疽病菌的藥劑篩選,近年來也有一些相關(guān)報道。曲健祿等[3]從7種常用殺菌劑中,篩選出多菌靈、苯醚甲環(huán)唑、戊唑醇和氟硅唑等四種殺菌劑對柿樹炭疽病菌C.gloeosporioides具有明顯的抑制作用。郗慧[12]研究發(fā)現(xiàn),噻菌靈和多菌靈對柿樹炭疽病菌抑制效果最好,抑制率均在90%以上,其次是戊唑醇和苯醚甲環(huán)唑,而在田間,80%?!じd\500倍液防治效果最好,防治率為74.89%,但70%甲基硫菌靈、50%多菌靈、80%代林錳鋅的防治效果較差,防治率均不足50%。鄧全恩等[13]通過室內(nèi)毒力測定和田間防治試驗,發(fā)現(xiàn)25%咪鮮胺EC 2 000倍液和25 g·L-1咯菌腈SC 1 000倍液對柿炭疽病抑制效果較好,防治效果分別為49.10%和47.76%。
對于殺菌劑的篩選,大多數(shù)文獻報道均以EC50值和菌絲生長抑制率作為抑菌效果的篩選依據(jù)[3,8-10,12],而孢子萌發(fā)作為病原菌侵染過程的重要影響因素,亦可作為重要的篩選依據(jù)。吳良慶等[11]通過菌絲生長抑制率和孢子萌發(fā)率,以田間生產(chǎn)上的常用藥劑濃度,從22種殺菌劑中篩選出250 g·L-1丙環(huán)唑乳油、33.5%喹啉銅懸浮劑、25%溴菌腈乳油、70%代森錳鋅可濕性粉劑和50%甲基硫菌靈可濕性粉劑等5種對梨炭疽病菌菌絲生長和分生孢子萌發(fā)抑制效果俱佳的藥劑。
本研究采用菌絲生長速率法和孢子萌發(fā)法,分析了16種生產(chǎn)上常用的殺菌劑對柿樹炭疽病菌的抑制作用,發(fā)現(xiàn)不同的化學藥劑處理,對柿樹炭疽病菌菌絲生長和分生孢子萌發(fā)的抑制效果差異較大,其中,250 g·L-1己唑醇懸浮劑、70%代森聯(lián)水分散粒劑、22%多菌靈+8%戊唑醇 (福連)、50%福美雙可濕性粉劑、10%苯醚甲環(huán)唑散粒劑、33.5%喹啉銅懸浮劑、25%溴菌腈乳油、70%代森錳鋅可濕性粉劑、430 g·L-1戊唑醇懸浮劑、50%咪鮮胺錳鹽可濕性粉劑和400 g·L-1氟硅唑乳油等11種殺菌劑對柿樹炭疽病菌菌絲生長抑制效果較好,70%代森聯(lián)水分散粒劑、33.5%喹啉銅懸浮劑、25%溴菌腈乳油、70%代森錳鋅可濕性粉劑、50%氯溴異氰尿酸水溶性粉劑、50%福美雙可濕性粉劑和400 g·L-1氟硅唑乳油等7種藥劑對分生孢子的萌發(fā)抑制效果較好。但是,部分藥劑對柿樹炭疽病菌菌絲生長有極強的抑制效果,而對孢子萌發(fā)的抑制率卻較低,如250 g·L-1己唑醇懸浮劑、22%多菌靈+8%戊唑醇 (福連)、10%苯醚甲環(huán)唑散粒劑、430 g·L-1戊唑醇懸浮劑和50%咪鮮胺錳鹽可濕性粉劑;而另一部分藥劑能有效抑制孢子萌發(fā),但對菌絲生長的抑制效果卻又較差,如50%氯溴異氰尿酸水溶性粉劑。綜合考慮供試藥劑對菌絲生長、分生孢子萌發(fā)的抑制效果,本研究認為16種供試殺菌劑中,33.5%喹啉銅懸浮劑、25%溴菌腈乳油、70%代森錳鋅可濕性粉劑和400 g·L-1氟硅唑乳油的抑菌效果好,可作為優(yōu)選藥劑;其次是70%代森聯(lián)水分散粒劑和50%福美雙可濕性粉劑,可作為備選藥劑。
參 考 文 獻:
[1] Zhang J Z. Anthracnose of persimmon caused by Colletotrichum gloeosporioides in China [J]. Asian and Australasian Journal of Plant Science and Biotechnology, 2008, 2(2): 50-54.
[2] Xie L, Zhang J Z, Cai L, et al. Biology of Colletotrichum horii, the causal agent of persimmon anthracnose[J]. Mycology: An International on Fungal Biology, 2010, 1: 4, 242-253.
[3] 曲健祿,武海斌,范昆,等.柿樹炭疽病菌的生物學特性及幾種殺菌劑對其的抑制作用[J].農(nóng)藥學學報, 2012, 14(5): 503-509.
[4] 劉杰, 劉華堂, 王淑芳. 柿樹炭疽病的防治措施[J]. 山東林業(yè)科技, 2004(6): 78.
[5] 李曉夢, 丁向陽. 多效唑?qū)谑辽L的影響[J]. 林業(yè)科技開發(fā), 2008, 22(5): 101-103.
[6] 耿倩倩. 柿樹炭疽病發(fā)生特點與防治方法[J]. 河北果樹, 2012(5): 53.
[7] 劉尚佐. 柿樹炭疽病防治技術(shù)[J]. 山西果樹, 2013(4): 54.
[8] 高楊楊,禾麗菲,李北興,等.山東省辣椒炭疽病病原菌的鑒定及高效防治藥劑的篩選[J].中國農(nóng)業(yè)科學,2017, 50(8): 1452-1464.
[9] 華永剛,姜禮元,林福平,等.柿炭疽菌的室內(nèi)藥效試驗[J]. 中國森林病蟲, 2001, 20(6): 11-13.
[10]薛杰,田振龍,劉大勇,等.柿樹炭疽病發(fā)生規(guī)律及防治試驗[J]. 山西果樹, 2003(4): 5-7.
[11]吳良慶,朱立武,衡偉,等.碭山梨炭疽病病原鑒定及其抑菌藥劑篩選[J].中國農(nóng)業(yè)科學, 2010, 43(18): 3750-3758.
[12]郗慧.我國柿樹炭疽病調(diào)查、鑒定及其防治研究[D].洛陽:河南科技大學, 2015.
[13]鄧全恩,丁向陽,徐建強,等.柿炭疽病防治藥劑的篩選[J].林業(yè)科學研究,2017,30(1): 160-165.