林英，王新波，焦玥明，郝慎文

（萊蕪市動物疫病預(yù)防與控制中心，山東 萊蕪 271100）

萊蕪市是傳統(tǒng)的蛋雞養(yǎng)殖基地，蛋雞養(yǎng)殖戶大部分是從原來的家庭養(yǎng)殖逐步發(fā)展而來，養(yǎng)殖數(shù)量在1萬～2萬之間的占80%以上，大多采用機(jī)械化飼養(yǎng)，平時由家庭成員管理，不雇傭工人，只在注射疫苗雇傭防疫人員進(jìn)行操作。由于目前蛋雞場免疫的疫苗種類多、注射頻次高，從事防疫的人員良莠不齊，而且一棟雞舍少說也有上萬只蛋雞，一旦免疫達(dá)不到應(yīng)有效果，帶來的經(jīng)濟(jì)損失不可估量。所以免疫后抗體水平檢測成為評估疫苗免疫效果和確定下次合適的免疫時間的重要依據(jù)。由于家庭養(yǎng)殖的局限性，很多蛋雞場沒有會采集血清的工作人員，不具備送檢血清的條件，單靠各級畜牧部門到場到戶采樣監(jiān)測，受到人員、時間的限制，遠(yuǎn)遠(yuǎn)滿足不了各蛋雞場的需求。外人進(jìn)入雞舍逮雞采血的過程給雞群帶來較大的應(yīng)激，且進(jìn)入全封閉的雞舍采樣需要消毒、更衣等一系列準(zhǔn)備工作，耗時耗力，有的養(yǎng)殖戶怕交叉感染，采樣后的雞只不再放回原雞舍而直接淘汰，造成很大的浪費(fèi)。檢測卵黃抗體采樣簡便，對雞群無應(yīng)激，可成批次進(jìn)行檢測，是蛋雞養(yǎng)殖戶樂于接受的檢測方法。但是隨著禽流感免疫毒株的不斷變化，從H5N1Re-1一直到 H5N1Re-8，2017年秋季又改為H5N1Re-8+H7N9，注射疫苗后血清抗體和卵黃抗體的相關(guān)性到底如何，成為我們檢測者和養(yǎng)殖戶共同關(guān)心的問題。

我國在20世紀(jì)80年代就有用卵黃樣本代替血清樣本進(jìn)行新城疫抗體檢測的研究，一般來說，雞的免疫球蛋白存在于血液中，并能通過血液到達(dá)卵黃中，所以血清抗體和卵黃抗體具有一定的相關(guān)性，但是卵黃的形成較血清有滯后性，所以在免疫后各個階段相關(guān)性如何需要進(jìn)行研究。

萊蕪市動物疫病預(yù)防與控制中心為了更好的做好高致病性禽流感、新城疫的監(jiān)測，為養(yǎng)殖戶提供檢測服務(wù)和免疫方案的指導(dǎo)，防范重大動物疫病，保障蛋雞養(yǎng)殖業(yè)的健康發(fā)展。于2017年9～12月在蛋雞養(yǎng)殖密集的萊蕪口鎮(zhèn)、羊里鎮(zhèn)等地區(qū)，選擇了30家養(yǎng)殖場（戶）進(jìn)行試驗。給這些雞群注射禽流感、新城疫等疫苗后采集血清和雞蛋，對3個月的免疫抗體情況進(jìn)行檢測，以便找出血清抗體與卵黃抗體的相關(guān)性，為今后檢測數(shù)據(jù)的的分析提供基礎(chǔ)資料。

1 試驗方法

選擇30家日齡在180～200d的蛋雞養(yǎng)殖場（戶），每10家一個組，分別注射禽流感H5N1Re-8+H7N9、新城疫和禽流感H9油乳劑滅活疫苗。注射疫苗后隔 15、30、40、50、60、90d 每家對應(yīng)采集30份血清和雞蛋進(jìn)行抗體檢測，檢測內(nèi)容為新城疫、禽流感H5Re-8、禽流感H7N9、禽流感 H9抗體，檢測方法為血凝抑制試驗。取每次檢測的平均值進(jìn)行比較和分析。

檢測滴度平均值統(tǒng)計見表1、表2、表3、表4。

表1 新城疫（單位log2）

表 2 禽流感 H5Re-8（單位 log2）

表 3 禽流感 H7N9（單位 log2）

表 4 禽流感 H9（單位 log2）

2 結(jié)論與分析

由表1、表2、表3、表4可以得出以下結(jié)論：

2.1 新城疫、禽流感血清和卵黃抗體在雞體內(nèi)的消減程度并不相同，相關(guān)性也有一定的差異。新城疫油苗注射后40d抗體水平達(dá)到最高值，在此之前卵黃抗體和血清抗體平均值相差2個滴度，40～60d基本維持最高值，卵黃抗體和血清抗體平均值相差1個滴度；禽流感H5Re-8注射后40d達(dá)到最高值，在此之前卵黃抗體和血清抗體平均值相差4～5個滴度，50～60d逐漸下降，血清抗體和卵黃抗體相差3～4個滴度；禽流感H7N9注射后40d達(dá)到最高值，在此之前卵黃抗體和血清抗體平均值相差數(shù)為 4.75、3.75、1，40～50d 維持原有抗體水平，抗體相差1個滴度，60d后逐漸下降，抗體相差1.5個滴度；禽流感H9注射后15d檢測時已達(dá)峰值并在峰值維持很長時間，直到90d未檢測到下降，估計和禽流感H9毒株特性有關(guān)，檢測期間抗體一直相差一個滴度。檢測卵黃抗體時應(yīng)根據(jù)以上規(guī)律增加滴度，才能正確反映血清中抗體滴度。

2.2 高致病性禽流感在卵黃中抗體上升較慢，數(shù)值上與血清抗體差別較大，檢測時應(yīng)引起注意。

2.3 新城疫、禽流感H5Re-8、禽流感H7N9抗體水平在血清和卵黃抗體中40d左右達(dá)到峰值，60d開始下降，一個月大致下降1.5個滴度。建議養(yǎng)殖戶4個月左右注射一次油苗以維持機(jī)體內(nèi)較高抗體水平。

2.4 禽流感H9抗體水平維持時間較長，可適當(dāng)降低免疫注射頻次，節(jié)省養(yǎng)殖成本。

本次試驗雞群不是SPF雞群，在實驗開始前做過禽流感H5、H9、新城疫的基礎(chǔ)免疫，禽流感H7N9為首次免疫，試驗結(jié)果可能受到一定影響，僅供同行參考。