曲 薇, 伍 淼, 王旭東, 張淑梅, 陳秀玲, 王傲雪,2
(1.東北農(nóng)業(yè)大學(xué)園藝學(xué)院,黑龍江哈爾濱 150030; 2.東北農(nóng)業(yè)大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院,黑龍江哈爾濱 150030)
哈茨木霉(Trichodermaharzianum)屬半知菌亞門絲孢綱叢梗孢目科木霉屬,廣泛分布在自然界中,適應(yīng)性好,防病機(jī)制多樣,對(duì)多種病原真菌和細(xì)菌有拮抗作用[1],對(duì)許多植物病害防治效果顯著[2-3]。李敏等研究發(fā)現(xiàn),多菌靈藥劑和哈茨木霉菌株T-s1對(duì)水稻苗期立枯病的防效分別達(dá) 74.84%、64.83%[4]。目前,針對(duì)番茄病害的生物防治有較多報(bào)道[5-10]。姚彬等探究哈茨木霉菌菌絲、孢子懸浮液、代謝液等對(duì)病原菌的抑菌效果時(shí)發(fā)現(xiàn),哈茨木霉對(duì)番茄葉霉及灰霉的病原菌均有一定的抑制作用[8];段麗峰等研究發(fā)現(xiàn),哈茨木霉用量達(dá)6億~18億孢子/m2(制劑用量2~6 g/m2)時(shí)對(duì)大田番茄猝倒病和立枯病的防效分別達(dá)75%~85%、75%~86%,且顯著高于化學(xué)藥劑[9];陳文瑞等用麥麩混合砂子培養(yǎng)哈茨木霉來(lái)防治番茄猝倒病,其防治效果優(yōu)于敵克松,與五氯硝基苯效果相當(dāng)[10]。此外,許多學(xué)者在研究木霉時(shí)發(fā)現(xiàn),木霉可以明顯地促進(jìn)植物的生長(zhǎng),對(duì)辣椒、豇豆、芹菜、黃瓜、白菜、豌豆、花生、菊花、小麥等多種作物有促生作用[11-13]。焦琮等曾報(bào)道康氏木霉不但能有效防治菜豆炭疽病、棉花苗期立枯病,還有促進(jìn)棉花、菜豆生長(zhǎng)發(fā)育的作用[14];王慧中等將哈茨木霉添加到有機(jī)肥中制成生物菌肥,并施用到馬鈴薯、白菜上發(fā)現(xiàn),與常規(guī)施肥相比,添加哈茨木霉的有機(jī)菌肥增產(chǎn)效果明顯[15]。
本試驗(yàn)以東北農(nóng)業(yè)大學(xué)園藝學(xué)院實(shí)驗(yàn)室分離到的哈茨木霉菌株WY-1為研究對(duì)象,測(cè)定其不同濃度及施用方式對(duì)番茄幼苗的促生及常見(jiàn)病害的防控作用,以期為哈茨木霉菌株WY-1的應(yīng)用提供理論指導(dǎo)與技術(shù)依據(jù)。
哈茨木霉菌菌株WY-1,由東北農(nóng)業(yè)大學(xué)園藝學(xué)院實(shí)驗(yàn)室提供;東農(nóng)713番茄種子,由東北農(nóng)業(yè)大學(xué)番茄研究所提供。
將保存的哈茨木霉菌株活化,PD搖瓶3 d;按7%接種量轉(zhuǎn)接到固體發(fā)酵培養(yǎng)物中,混勻,置于28 ℃恒溫培養(yǎng)箱中恒溫培養(yǎng)10 d;取出發(fā)酵物,烘箱中40 ℃烘12 h;粉碎機(jī)粉碎,過(guò)200目篩,即得到原菌粉;4 ℃保存。
1.3.1浸種將番茄種子置于55 ℃溫水中浸泡30 min;分別置于由哈茨木霉原菌粉稀釋制成的孢子濃度為107、106、105CFU/mL 的溶液中浸泡7 h,以清水(CK)為對(duì)照;挑選飽滿一致的種子,播于含滅菌營(yíng)養(yǎng)土的苗缽中,每缽5~8粒種子,每處理5缽,置于東北農(nóng)業(yè)大學(xué)園藝試驗(yàn)站番茄大棚內(nèi)培養(yǎng)2個(gè)月,正常田間管理;取苗,測(cè)量其株高、根長(zhǎng)、莖粗、鮮質(zhì)量,重復(fù)3次。
1.3.2灌根將番茄種子置于55 ℃溫水中浸泡30 min;挑選飽滿一致的種子,播于盛有滅菌營(yíng)養(yǎng)土的育苗托盤中;待苗長(zhǎng)出2張真葉,將苗移至21 cm×21 cm的苗缽內(nèi),每缽5株苗;培養(yǎng)7 d后,分別采用孢子濃度為107、106、105CFU/mL的哈茨木霉溶液開始灌根,以清水(CK)為對(duì)照;每隔10 d灌根1次,連灌3次,每處理5缽;2個(gè)月后取苗,測(cè)量其株高、根長(zhǎng)、莖粗、鮮質(zhì)量,重復(fù)3次。
1.4.1白粉病以大棚內(nèi)結(jié)果期的番茄植株為試驗(yàn)對(duì)象,分別噴施哈茨木霉孢子濃度為106、105CFU/mL的溶液,以噴施多菌靈可濕性粉劑0.8 mg/mL、美國(guó)拜沃生產(chǎn)的木霉可濕性粉劑3.75×105CFU/mL、清水為對(duì)照;隨機(jī)選取150 cm×150 cm 的小塊區(qū)域?yàn)?個(gè)小組,參照劉鳴韜等的分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)[16],噴藥前及噴藥后15 d逐天觀察調(diào)查番茄白粉病的發(fā)生情況,計(jì)算病情指數(shù)和防治效果。
1.4.2灰霉病、葉霉病以4張真葉期盆栽番茄植株為試驗(yàn)對(duì)象,以噴施哈茨木霉孢子濃度為106、105CFU/mL的溶液為試驗(yàn)處理,以噴施多菌靈可濕性粉劑0.8 mg/mL、美國(guó)拜沃生產(chǎn)的木霉可濕性粉劑3.75×105CFU/mL、清水為試驗(yàn)對(duì)照。試驗(yàn)設(shè)3個(gè)方案:(1)先噴施藥劑,1 d后再接種病原菌;(2)先接種病原菌,1 d后再噴施藥劑;(3)僅接種病原菌噴清水作為對(duì)照。將處理好的番茄植株置于20 ℃條件下保濕培養(yǎng),參照徐升運(yùn)等的分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)[17],15 d內(nèi)逐天觀察并記錄番茄灰霉病、葉霉病的發(fā)病情況,計(jì)算病情指數(shù)和防治效果。
2.1.1浸種的促生效果由圖1、表1可見(jiàn),與清水處理(對(duì)照)相比,哈茨木霉菌劑浸種各處理的番茄株高、根長(zhǎng)、莖粗、植株鮮質(zhì)量都有不同程度的增加;哈茨木霉孢子濃度 107CFU/mL 溶液浸種的番茄株高、根長(zhǎng)增加幅度相對(duì)最大,分別比對(duì)照增加10.68%、27.00%,哈茨木霉孢子濃度 106CFU/mL 溶液浸種的番茄莖粗、植株鮮質(zhì)量增幅相對(duì)最大,分別比對(duì)照增加10.31%、34.26%。
表1 哈茨木霉菌劑不同濃度浸種對(duì)番茄植株生長(zhǎng)的影響
2.1.2灌根的促生效果由圖2、表2可見(jiàn),與清水處理(對(duì)照)相比,經(jīng)過(guò)哈茨木霉菌劑灌根處理的番茄植株,其株高、根長(zhǎng)、莖粗、鮮質(zhì)量等均有明顯增加,菌劑灌根對(duì)番茄植株有明顯的促生作用;使用哈茨木霉孢子濃度107、106CFU/mL處理對(duì)番茄株高、根長(zhǎng)、莖粗、鮮質(zhì)量的增加效果相對(duì)較好。綜合成本和使用效果,選擇哈茨木霉孢子濃度106CFU/mL為番茄合適的灌根濃度。
2.2.1番茄白粉病由表3可見(jiàn),噴藥后15 d,哈茨木霉菌劑對(duì)白粉病的防治效果較為明顯,噴施孢子濃度106、105CFU/mL 對(duì)白粉病的防治效果分別為82.15%、70.41%,分別是多菌靈可濕性粉劑0.8 mg/mL相對(duì)防效的1.33、1.14 倍,分別是拜沃木霉3.75×105CFU/mL相對(duì)防效的1.39、1.19倍。
2.2.2番茄灰霉病、葉霉病由表4可見(jiàn),噴施多菌靈的番茄灰霉病、葉霉病的病情指數(shù)均明顯低于只接種病原菌(對(duì)照)的病情指數(shù);噴施哈茨木霉孢子濃度106CFU/mL對(duì)番茄灰霉病、葉霉病的防治效果相對(duì)最好, 噴藥后接種、接種后噴藥的相對(duì)防效分別為77.98%、56.82%和82.66%、72.37%,分別是拜沃木霉3.75×105CFU/mL相對(duì)防效的1.45、1.35倍和1.20、1.30倍,分別是多菌靈可濕性粉劑 0.8 mg/mL相對(duì)防效的1.73、13.3倍和1.63、1.66倍;噴藥后接種的相對(duì)防效明顯好于接種后噴藥的防治效果,故田間管理時(shí)應(yīng)加強(qiáng)對(duì)番茄灰霉病、葉霉病的預(yù)防。
表2 哈茨木霉菌劑不同濃度灌根對(duì)番茄植株生長(zhǎng)的影響
表3 哈茨木霉菌劑對(duì)溫室地栽番茄白粉病的防控效果
表4 哈茨木霉菌劑對(duì)室內(nèi)盆栽番茄灰霉病、葉霉病的防治效果
哈茨木霉對(duì)番茄植株的生長(zhǎng)具有良好的促進(jìn)作用,灌根對(duì)番茄植株的促生效果明顯優(yōu)于浸種,這可能是由于哈茨木霉灌根可直接作用于幼苗根系而促使根系發(fā)達(dá),吸收水肥的能力增強(qiáng),進(jìn)而促進(jìn)幼苗生長(zhǎng),而浸種是通過(guò)提高番茄種子發(fā)芽活力來(lái)影響幼苗的生長(zhǎng),作用效果相對(duì)較弱。另外,木霉在土壤中可降解土壤中的有機(jī)物、溶解可利用礦質(zhì)元素,增加了植物對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的吸收,而浸種相對(duì)于灌根,帶入土壤的木霉菌量少,幫助降解吸收營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的能力相對(duì)較弱,因此促生效果也相對(duì)較弱。
哈茨木霉菌株WY-1具有生長(zhǎng)速度快、適應(yīng)能力強(qiáng)、防病機(jī)制多等特點(diǎn),利用哈茨木霉對(duì)番茄病害進(jìn)行防治可避免化學(xué)防治對(duì)環(huán)境造成的污染[18]。試驗(yàn)結(jié)果表明,哈茨木霉菌劑對(duì)番茄白粉病、灰霉病及葉霉病均有良好的防治效果;先噴施哈茨木霉后接種病原菌比先接種病原菌后噴施哈茨木霉對(duì)番茄灰霉病、葉霉病的防控效果相對(duì)更好,這可能是因?yàn)楣哪久股L(zhǎng)速度快,先噴施哈茨木霉可以使其迅速占位并大量繁殖,當(dāng)病原菌入侵時(shí)可抑制病原菌的生長(zhǎng),具有更加明顯的競(jìng)爭(zhēng)優(yōu)勢(shì),起到更好的防治效果,而如果先接種病原菌,則會(huì)使病原菌大量繁殖,哈茨木霉抵御病原菌的效果會(huì)有所減弱。
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