孫勁松

我們在2017年3月曾進行過櫻桃表皮微生物隨時間的變化情況及櫻桃保鮮方法的探究。

在查看實驗圖片時，指導(dǎo)老師指出了實驗中幾處不規(guī)范的操作。其中一處是在培養(yǎng)基配置完成裝入錐形瓶并進行包扎的過程中，棉塞松散，棉線打結(jié)不規(guī)范，難拆開。

取出高溫滅菌后的培養(yǎng)基時，其底部有少量白色絲狀沉淀物，我們猜測，這是在滅菌時掉落在培養(yǎng)基內(nèi)的棉花。這也表明，我們并沒有調(diào)整好包扎用品。

原來，制作培養(yǎng)基的任務(wù)由本小組成員根據(jù)教材上的步驟自行完成。在包扎時，我們只看到教材上對包扎材料和包扎效果的說明，以致無論是在選擇棉花還是將棉花制成棉塞等過程中操作均不規(guī)范，繼而導(dǎo)致實驗失敗。

據(jù)此，我們指出教材中的漏洞，并提供正確的包扎材料的處理方法。

一、探究背景

本省中學(xué)使用的《生物技術(shù)實踐》教材主要為兩種：一種由人民教育出版社出版，另一種由北京師范大學(xué)出版社出版。微生物培養(yǎng)的相關(guān)知識分別在其第二章和第一章，本小組主要依據(jù)人教版教材，參考北師大版教材進行實驗。

教材中的微生物培養(yǎng)知識包含了如何制作培養(yǎng)基、如何培養(yǎng)微生物、如何分離并純化微生物等。其中詳細地描述了培養(yǎng)基的滅菌環(huán)節(jié)，也重點介紹了稀釋涂布、平板劃線這兩種關(guān)于微生物的分離方法。介紹稀釋涂布法時，還涉及用斜面保藏法保存菌液的環(huán)節(jié)。

上述兩個環(huán)節(jié)中都涉及棉塞的使用，教材中只有“材料”和“包扎錐形瓶”處寫到用棉花，并說明其用途是堵住容器口，并未說明是否要對棉花進行處理后再使用。而我們在探究過程中發(fā)現(xiàn)，棉花需進行一定處理、制成合格的棉塞后再使用，否則會影響實驗效果。

為了確定處理棉花的必要性，我們查閱了相關(guān)資料，結(jié)果顯示“用棉花堵住容器口”這一步驟在實驗中非常重要。

在制作培養(yǎng)基時，用錐形瓶等容器盛裝培養(yǎng)基溶液，然后放入高壓蒸汽滅菌鍋滅菌，包扎處理時將棉花制成棉塞堵住容器口，既可有效防止外界微生物進入容器造成污染，又能適當(dāng)保持通風(fēng)，防止滅菌過程中容器內(nèi)壓過大而使容器炸裂。用棉線包扎并打活結(jié)可輔助棉塞完成下一步操作。而采用斜面保藏法時，同樣也需將棉花制成棉塞，以隔絕外界微生物的污染。

由此看來，將棉花制成符合要求的棉塞也很關(guān)鍵。

二、制作棉塞

我們查找了兩種用棉花制作棉塞的方法，具體如下。

1.折疊法

（1）用剪刀剪一塊正方形的棉花，鋪平置于桌面上。

（2）將棉花的一角沿下圖的虛線翻折。

（3）將相鄰的一個角向其對角翻折一小部分。

（4）繼續(xù)翻折至棉花呈塞狀。

（5）整理棉塞。將棉塞尾部適當(dāng)翻折，使尾部呈一個平面。將棉塞側(cè)邊適當(dāng)整理，使其定型。

2.填塞法

（1）取一塊大小合適的紗布，將其中心鋪于管口，任其自然下垂至管壁。

（2）將試管上端與紗布一并握住，用玻璃棒將紗布中心向管內(nèi)推移至該棉塞所需要的長度后握緊試管上端（可適當(dāng)拉展紗布防止出現(xiàn)褶皺）。

（3）用玻璃棒將適量棉花向試管內(nèi)填塞并壓緊，之后將紗布尾端捏緊。

（4）將棉塞抽出約1/3長度，散開紗布，在尾部加適量棉花并壓緊，使其略大于管口。捏緊尾部紗布并用棉線扎緊。

（5）剪去多余的線頭、紗布。

棉塞制作完成后，將其從試管內(nèi)拔出，若聽到的聲音大而尖，說明棉花塞得太緊實，會影響棉塞的透氣性；若聽到的聲音很小，而且棉塞能輕易塞回試管中，則說明棉塞太松，不易定型。棉塞檢查完后塞進試管，在管內(nèi)的長度約為3/5或2/5。

除制作棉塞外，還可用硅膠塞完成實驗。（指導(dǎo)老師：唐 梅）