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(四川省動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心，四川 成都 610041)

0 引言

高致病性豬藍(lán)耳病和豬瘟是威脅養(yǎng)豬業(yè)發(fā)展的重要病毒性傳染病，都可以不同程度地導(dǎo)致母豬繁殖障礙問題。這兩種豬病被世界動(dòng)物衛(wèi)生組織(OIE)列為必須報(bào)告的動(dòng)物疫病，我國(guó)將其列為一類動(dòng)物疫病[1]。在2016年以前這兩種豬病一直是國(guó)家強(qiáng)制免疫疾病，根據(jù)農(nóng)業(yè)部公告，2017年起取消國(guó)家強(qiáng)制免疫。為有效控制和消滅高致病性豬藍(lán)耳病、豬瘟,農(nóng)業(yè)部于2017年3月印發(fā)了《國(guó)家高致病性豬藍(lán)耳病防治指導(dǎo)意見(2017-2020年)》和《國(guó)家豬瘟防治指導(dǎo)意見(2017-2020 年)》，提出要繼續(xù)堅(jiān)持以預(yù)防為主的防控方針，做好疫苗免疫及免疫效果評(píng)價(jià)工作。2017年四川省繼續(xù)于春秋兩季對(duì)高致病性豬藍(lán)耳病和豬瘟進(jìn)行集中免疫。為切實(shí)了解疫苗免疫效果，在春秋兩季免疫后分別采集全省21個(gè)市(州)抽檢縣的血清樣品進(jìn)行抗體檢測(cè)。

1 材料

1.1 檢測(cè)試劑

高致病性豬藍(lán)耳病抗體檢測(cè)采用北京世紀(jì)元亨動(dòng)物防疫技術(shù)有限公司生產(chǎn)的豬繁殖與呼吸綜合征病毒抗體ELISA檢測(cè)試劑盒，春秋兩季檢測(cè)用試劑盒批號(hào)分別是PRRSV20170307E和PRRSV20170613E。豬瘟抗體檢測(cè)采用北京世紀(jì)元亨動(dòng)物防疫技術(shù)有限公司生產(chǎn)的豬瘟病毒抗體間接ELISA檢測(cè)試劑盒,春秋兩季檢測(cè)用試劑盒批號(hào)分別是20170111和CSFV20170516E。

1.2 樣品采集

春秋兩季免疫后分別采集全省21個(gè)市(州)的血清樣品進(jìn)行抗體檢測(cè)，每個(gè)市(州)春秋季各隨機(jī)抽檢一個(gè)縣。全年共計(jì)采集豬血清3 160份，其中春季1 588份，秋季1 572份。

2 方法

2.1 檢測(cè)方法

豬藍(lán)耳病抗體和豬瘟抗體檢測(cè)方法均按照試劑盒說(shuō)明書進(jìn)行：①取出抗原反應(yīng)板，分別在相應(yīng)孔中加入陽(yáng)性對(duì)照(2 孔)和陰性對(duì)照(2 孔)原液、稀釋好的待檢豬血清各100 μl。②充分混勻后，貼上封板膜，置37℃孵育1 h。③小心揭掉封板膜，棄去各孔中液體、拍凈。每孔加滿洗滌液，靜置約30 s，重復(fù)洗滌5次，最后在吸水紙上拍凈。④每孔加入酶結(jié)合物液100 μl，貼上封板膜，置37℃孵育30 min。⑤重復(fù)步驟3。⑥每孔加入底物液A 50 μL，再加入底物液B 50 μL，輕輕振蕩混勻，置37℃避光顯色10 min。⑦每孔加入終止液50 μl，輕輕振蕩混勻，置酶標(biāo)儀450 nm波長(zhǎng)處測(cè)定各孔OD450值。

2.2 結(jié)果判定

根據(jù)試劑盒說(shuō)明書，樣品OD450值>陽(yáng)性對(duì)照OD450平均值×0.3，即PRRSV抗體或CSFV抗體陽(yáng)性；樣品OD450值<陽(yáng)性對(duì)照OD450平均值×0.25，即PRRSV抗體或CSFV抗體陰性。當(dāng)樣品OD450值等于或介于陽(yáng)性對(duì)照OD450平均值×0.25和陽(yáng)性對(duì)照OD450平均值×0.3 之間時(shí)，雙孔復(fù)試結(jié)果中若任意一孔或兩孔均為陽(yáng)性，則視為PRRSV抗體或CSFV抗體陽(yáng)性；若兩孔均為陰性則視為PRRSV抗體或CSFV抗體陰性。

3 結(jié)果

高致病性豬藍(lán)耳病和豬瘟抗體的檢測(cè)結(jié)果分別如表1、表2所示。

3.1 高致病性豬藍(lán)耳病

2017年全年共檢測(cè)免疫豬血清3 160份，高致病性豬藍(lán)耳病抗體合格2 877份，平均合格率為91.04%，其中春季平均合格率為87.78%(1394/1588)，秋季平均合格率為94.34%(1483/1572)。21個(gè)市(州)中免疫合格率最高為100.00%，最低為79.44%。

3.2 豬瘟

2017年全年共檢測(cè)免疫豬血清3 160份，豬瘟抗體合格3 076份，平均合格率為97.34%，其中春季平均合格率為96.85%(1 538/1 588)，秋季平均合格率為97.84%(1 538/1 572)。21個(gè)市(州)中免疫合格率最高為100.00%，最低為83.33%。

表1 2017年四川省21個(gè)市(州) 高致病性豬藍(lán)耳病免疫抗體檢測(cè)結(jié)果 %

注：編號(hào)1～21代表21個(gè)市(州)

表2 2017年四川省21個(gè)市(州)豬瘟免疫抗體檢測(cè)結(jié)果 %

注：編號(hào)1～21代表21個(gè)市(州)

4 分析討論

(1)抗體檢測(cè)可以評(píng)價(jià)疫苗免疫效果[2]，群體免疫合格率是一個(gè)重要指標(biāo)。2017年我省21個(gè)市(州)高致病性豬藍(lán)耳病、豬瘟免疫抗體的平均合格率均在70%以上，達(dá)到農(nóng)業(yè)部規(guī)定的要求，可對(duì)豬群產(chǎn)生免疫保護(hù)，表明2017年四川省高致病性豬藍(lán)耳病、豬瘟免疫工作均達(dá)到預(yù)期效果，也說(shuō)明養(yǎng)豬場(chǎng)(戶)主防疫主體責(zé)任意識(shí)強(qiáng)、免疫意識(shí)高，重視高致病性豬藍(lán)耳病和豬瘟的疫苗免疫工作。

(2)四川省21個(gè)市(州)高致病性豬藍(lán)耳病抗體合格率為79.44%～100%,其中抗體合格率100%的有3個(gè)，90%～100%有8個(gè)，80%～90%有9個(gè)，70% ～80%有1個(gè)。豬瘟抗體合格率為83.33%～100%，21個(gè)市(州)中抗體合格率100%的有7個(gè)，90%～100%有11個(gè)，80%～90%有3個(gè)?？贵w合格率較低的市(州)應(yīng)加強(qiáng)抗體監(jiān)測(cè)，及時(shí)做好補(bǔ)免工作。

(3)高致病性豬藍(lán)耳病和豬瘟都是我國(guó)中長(zhǎng)期動(dòng)物疫病防治規(guī)劃(2012—2020年)優(yōu)先凈化的動(dòng)物疫病，《規(guī)劃》中明確了到2020年，高致病性豬藍(lán)耳病全國(guó)達(dá)到控制標(biāo)準(zhǔn)，豬瘟進(jìn)一步擴(kuò)大凈化區(qū)域。這兩種疫病取消強(qiáng)制免疫，將有利于各地根據(jù)此病制定區(qū)域性疫病凈化方案[3]。潘孝成等[4]也指出豬瘟強(qiáng)制免疫的取消不代表豬瘟的免疫不重要，應(yīng)該是現(xiàn)階段暫不實(shí)施強(qiáng)制免疫更利于豬瘟的控制和凈化，《國(guó)家豬瘟防治指導(dǎo)意見(2017-2020 年)》的印發(fā)也標(biāo)志著正式將豬瘟免疫凈化付諸行動(dòng)，這是我國(guó)豬瘟防控政策歷史性的重大轉(zhuǎn)變[5]。四川省豬瘟和高致病性豬藍(lán)耳病免疫效果理想，有利于這兩種豬病的控制和凈化。

[1] 中華人民共和國(guó)農(nóng)業(yè)部．中華人民共和國(guó)農(nóng)業(yè)部公告第1125號(hào)[EB]．2008．

[2] 左玉柱.豬場(chǎng)抗體檢測(cè)意義、采樣及結(jié)果分析[J].北方牧業(yè),2017(18):27.

[3] 李赟,蘆俊彥,史新濤,等.豬瘟和高致病性豬藍(lán)耳病退出國(guó)家強(qiáng)制免疫機(jī)制的利與弊[J].當(dāng)代畜牧,2016(27):88-90.

[4] 潘孝成,趙瑞宏,沈?qū)W懷,等.安徽種豬場(chǎng)仔豬豬瘟免疫效果分析[J].養(yǎng)豬,2017(4):102-104.

[5] 王琴.豬瘟防控凈化技術(shù)研究[J].獸醫(yī)導(dǎo)刊,2017(11):29-31.