李成賢 曹洪志
(宜賓職業(yè)技術(shù)學(xué)院,四川宜賓 644003)
糞便檢查是寄生蟲病生前診斷的最基本、最常用的方法。多種寄生蟲如吸蟲、絳蟲、線蟲、棘頭蟲和球蟲等,寄生于畜禽的消化系統(tǒng)或呼吸系統(tǒng),某一發(fā)育階段的病原體,常隨畜禽的糞便排出,因此,檢查糞便發(fā)現(xiàn)有寄生蟲的蟲卵、幼蟲、蟲體或蟲體斷片,可確診畜禽消化系統(tǒng)(包括肝臟)、呼吸系統(tǒng)和泌尿生殖系統(tǒng)的寄生蟲病[1]。畜禽患寄生蟲病后,除少數(shù)呈現(xiàn)典型癥狀外,家禽的多數(shù)寄生蟲病在臨床上僅表現(xiàn)消化機(jī)能障礙、消瘦、貧血、營養(yǎng)不良和發(fā)育受阻、生產(chǎn)性能降低等慢性、消耗性疾病的癥狀,雖不具特異性,但可作為早期發(fā)現(xiàn)疫病的參考。
1.1 試驗(yàn)材料 糞便采集于宜賓巨力農(nóng)業(yè)開發(fā)公司,采集新鮮糞便8份,每份15 g,裝入干凈的一次性口袋內(nèi)分別標(biāo)記清楚,帶回實(shí)驗(yàn)室置于4 ℃待檢。
1.2 試驗(yàn)儀器 試管、試管架、紗布、剪刀、燒杯、顯微鏡、載玻片、蓋玻片和牙簽等。
1.3 試驗(yàn)方法和原理 采用漂浮法進(jìn)行檢測。該法的原理是利用比蟲卵比重大的溶液作為檢查用的漂浮液,使寄生蟲的蟲卵、球蟲卵囊等浮聚于液體表面,取表膜液制片鏡檢,以提高檢出率。該法適用于檢查糞便中的線蟲卵、絳蟲卵和球蟲卵囊。
(1)配制飽和食鹽水:在1 000 mL燒杯中加入適量水,加入過量食鹽攪拌,有少量鹽析出,即為飽和鹽水,取上清液備用。(2)取1 g左右的糞便置于100 mL燒杯中,加入少量飽和鹽水用玻璃棒攪拌混勻,繼續(xù)加入10~20倍的飽和鹽水,攪勻[2]。(3)3層紗布過濾,濾液注入直立的直徑1.5~2.0 cm的平口試管。(4)用滴管補(bǔ)加過濾糞液,滴至液面凸出管口,管口覆以清潔蓋玻片。(5)濾液和蓋玻片接觸,其間不留氣泡,放置30 min。(6)平移此蓋玻片于事先放有一滴甘油水的載玻片上鏡檢。
通過鏡檢圖片對照可以判斷該蟲卵為線蟲。線蟲卵大多數(shù)是卵生的。由于線蟲的種類很多,所以其大小和形狀差別很大。但絕大多數(shù)的蟲卵都是呈橢圓形的,外形對稱,卵膜平滑,少數(shù)有結(jié)節(jié)或凹凸不平。卵殼一般都由三四層膜組成,卵殼內(nèi)有卵細(xì)胞。絕大多數(shù)是無色透明的,少數(shù)是黑褐色的、棕褐色的。如圖1所示為線蟲卵早期分裂期,圖2為線蟲卵晚期分裂期。
圖1 線蟲卵早期分裂期
圖2 線蟲卵晚期分裂期
本試驗(yàn)采用飽和鹽水漂浮法進(jìn)行測定,其原理是應(yīng)用比重較蟲卵大的溶液作為漂浮液,使蟲卵或卵囊等漂浮于液體表面,以便于收集。該法的優(yōu)點(diǎn)是操作簡便,特別是對大多數(shù)的線蟲卵及球蟲卵囊等比重較輕的蟲卵,本辦法具有特別的效果,檢出率很高。因此,在獸醫(yī)預(yù)防和診斷的工作中應(yīng)用十分廣泛。缺點(diǎn)是對比重較大的蟲卵(如吸蟲卵、棘頭蟲卵)的檢出效果很差。
另外,供檢糞便必須是新鮮的,否則因蟲卵發(fā)育或變形而不易鑒別,還必須是該病畜的糞便,有時可由直腸直接采取。糞便應(yīng)在裝糞的容器或紙包上注明號數(shù)或畜名,以免混淆。檢查前應(yīng)先注意觀察糞便的顏色、稠度、氣味、黏液多少、有無血液及飼料消化程度等,以供綜合判斷病性。檢測過程中還應(yīng)注意觀察有無蠅蛆、線蟲或絳蟲節(jié)片等,以免影響試驗(yàn)結(jié)果。而且鏡檢時,所看的視野要有一定順序的移動,以免漏檢視野,造成診斷失誤。
總之,寄生蟲的種類很多,在檢測時根據(jù)情況采取不同的方法,嚴(yán)格做好肉牛養(yǎng)殖中寄生蟲病的預(yù)防工作。
[1]孫濤,包廣玲,胡成棟,等.畜禽糞便內(nèi)蟲卵檢查法[J].獸醫(yī)衛(wèi)生,2016(6):35.
[2]侯宏艷,惠文巧,趙瑞宏,等.山羊糞便寄生蟲卵的檢測[J].安徽農(nóng)業(yè)科學(xué),2014(27):9368-9369,9486.