二氧化碳麻醉對羅非魚有水運(yùn)輸?shù)挠绊?/h1>
2018-05-14 09:58:04管維良
肉類研究 2018年2期
摘 要：將麻醉劑應(yīng)用于羅非魚的有水運(yùn)輸能夠減輕魚類在運(yùn)輸過程中的應(yīng)激反應(yīng)，從而減少其氨氮排放，最終達(dá)到延長運(yùn)輸時(shí)間的目的。本研究使用二氧化碳水溶液作為麻醉劑，并以化學(xué)麻醉劑間氨基苯甲酸乙酯甲磺酸鹽（MS-222）作為陽性對照，比較2 種麻醉方式的優(yōu)劣。結(jié)果表明：羅非魚在pH 6.2、9 mg/L二氧化碳麻醉液和質(zhì)量濃度為20 mg/L的MS-222麻醉液中存活時(shí)間最久，分別為548 min和710 min，且有水?；? h后的復(fù)蘇率均達(dá)100%；羅非魚在相同條件充氧清水中的存活時(shí)間僅為362 min，有水?；? h后的復(fù)蘇率為33%。因此，適宜質(zhì)量濃度的二氧化碳和MS-222麻醉液均能延長羅非魚在有水?；钸^程中的存活時(shí)間。
關(guān)鍵詞：羅非魚；二氧化碳；有水運(yùn)輸；復(fù)蘇率
Abstract： In this study， hyperoxic carbon dioxide solution was used for relieving the hypoxic stress response of tilapia during simulated transportation. Ammonia excretion was restrained by bubbling carbon dioxide or adding tricaine methanesulfonate （MS-222） into oxygenated water， and the effect was concentration dependent. The longest survival time of tilapia was 548 min in carbon dioxide solution （9 mg/L， pH 6.2） and 710 min in MS-222 solution （20 mg/L）， respectively. The survival rate of both groups was 100% in oxygenated water after 4 hours of simulated transportation. In contrast， the survival time of the control group， in which fish were transported with oxygenated water without additive， was 362 min， and the survival rate was only 33%. Therefore， carbon dioxide or MS-222 is an effective sedative for live tilapia transportation.
Keywords： tilapia； carbon dioxide； transportation with water； survival rate
DOI：10.7506/rlyj1001-8123-201802009
中圖分類號：TS254.1 文獻(xiàn)標(biāo)志碼：A 文章編號：1001-8123（2018）02-0052-05
引文格式：
管維良， 陳德慰. 二氧化碳麻醉對羅非魚有水運(yùn)輸?shù)挠绊慬J]. 肉類研究， 2018， 32（2）： 52-56. DOI：10.7506/rlyj1001-8123-201802009. http：//www.rlyj.pub
GUAN Weiliang， CHEN Dewei. Effect of carbon dioxide anesthesia in live tilapia transportation with water[J]. Meat Research， 2018， 32（2）： 52-56. DOI：10.7506/rlyj1001-8123-201802009. http：//www.rlyj.pub
羅非魚受到消費(fèi)者的喜愛，且在我國南方大范圍養(yǎng)殖[1]。魚類在有水運(yùn)輸過程中由于受到擁擠和機(jī)械振動(dòng)的影響會(huì)產(chǎn)生一系列應(yīng)激反應(yīng)，導(dǎo)致其代謝速率加快，增大氧氣的消耗量及氨氮類物質(zhì)的排放量，導(dǎo)致運(yùn)輸過程中的存活率下降。
麻醉劑經(jīng)常被用來減輕運(yùn)輸過程中魚類的應(yīng)激反應(yīng)。早在1984年，F(xiàn)erreira等[2]就對使用苯唑卡因處理羅非魚進(jìn)行研究，結(jié)果表明，處理后的羅非魚在運(yùn)輸過程中不僅減少了1/3的氧氣消耗量，而且也降低了二氧化碳和氨氮的排放量。王利娟等[3]發(fā)現(xiàn)在運(yùn)輸過程中添加間氨基苯甲酸乙酯甲磺酸鹽（MS-222）能夠顯著提高大嘴黑鱸魚24 h模擬運(yùn)輸后的復(fù)蘇率。此外，丁香油也常作為魚類運(yùn)輸過程中的麻醉劑，用以提高運(yùn)輸后的存活率[4]。但是，僅MS-222為美國食品藥品管理局（Food and Drug Administration，F(xiàn)DA）批準(zhǔn)使用的食用魚麻醉劑，且經(jīng)MS-222處理的魚類需暫養(yǎng)21 d才可食用[5]。
目前一些常見氣體在水產(chǎn)行業(yè)已經(jīng)有較為廣泛的應(yīng)用。宰前使用一氧化氮處理羅非魚不僅可以對魚類進(jìn)行麻醉，減輕動(dòng)物在宰殺過程中的痛苦，提高動(dòng)物福利，同時(shí)可以進(jìn)行活體發(fā)色，且發(fā)色自然、顏色保持穩(wěn)定，不易褪色[6-7]。二氧化碳水溶液對于魚類是一種較為理想的麻醉劑已經(jīng)得到證實(shí)，其優(yōu)點(diǎn)在于沒有任何藥物殘留，不會(huì)污染環(huán)境，且價(jià)格低廉[8-9]。陳名帥等[10]發(fā)現(xiàn)使用二氧化碳將魚麻醉后進(jìn)行宰殺可以減輕其應(yīng)激反應(yīng)，提高魚片的品質(zhì)；Guan Weiliang等[11]發(fā)現(xiàn)高氧濃度的二氧化碳水溶液能夠麻醉羅非魚，并且顯著延長其在無水條件下的存活時(shí)間。但是目前使用二氧化碳水溶液作為魚類有水運(yùn)輸過程中的麻醉劑的研究較少。Takeda等[12]通過控制水中二氧化碳和氧氣的濃度達(dá)到了在運(yùn)輸過程中使魚類鎮(zhèn)定的效果。本研究以羅非魚作為研究對象，通過控制水中二氧化碳和氧氣的濃度以達(dá)到將魚輕微麻醉的效果，抑制其代謝速率，延緩水質(zhì)惡化，從而達(dá)到延長?；钸\(yùn)輸時(shí)間的目的。同時(shí)，以化學(xué)麻醉劑MS-222對羅非魚進(jìn)行麻醉作為陽性對照，并對2 種麻醉方式的優(yōu)劣進(jìn)行比較。
1 材料與方法
1.1 材料與試劑
實(shí)驗(yàn)用羅非魚（63 條）購于南寧市五里亭市場，單條質(zhì)量（500±50） g，確保魚的活力充沛，體質(zhì)良好，在（30±2） ℃流動(dòng)清水中暫養(yǎng)2 d。
MS-222、磷酸、硫酸、鹽酸、4-氨基苯磺酰胺、
N-（1-萘基）-乙二胺二鹽酸鹽、亞硝酸鈉、氯仿、高錳酸鉀、草酸鈉、酚酞指示劑、鹽酸、二氯化汞、碘化鉀、氫氧化鉀、酒石酸鉀鈉、硫代硫酸鈉、硫酸鋅、氫氧化鈉及氯化銨（均為分析純） 上海麥克林生化科技有限公司。
1.2 儀器與設(shè)備
TLE204E型分析天平 梅特勒-托利多儀器（上海）有限公司；PHSJ-4F型pH計(jì) 上海雷磁儀器廠；氧氣鋼瓶、二氧化碳鋼瓶、減壓閥 廣西國信氣體研究有限公司；VIS-722型分光光度計(jì) 上海佑科儀器儀表有限公司。
1.3 方法
1.3.1 模擬運(yùn)輸
分別使用二氧化碳和MS-222作為麻醉劑對羅非魚進(jìn)行有水保活實(shí)驗(yàn)。實(shí)驗(yàn)在運(yùn)輸水箱中進(jìn)行，于室溫（23±2） ℃條件下將水箱裝入6 L清水，以1 L/min的流速向水中通入氧氣，當(dāng)氧氣濃度達(dá)到過飽和后停止通氣。
使用二氧化碳作為麻醉劑時(shí)的操作方法如下：繼續(xù)將二氧化碳以0.5 L/min的流速通入運(yùn)輸水箱中，使二氧化碳水溶液的pH值分別達(dá)5.9、6.2、6.5和6.8，當(dāng)pH值達(dá)到設(shè)定值時(shí)停止通氣，分別取水樣檢測其二氧化碳質(zhì)量濃度。游離二氧化碳質(zhì)量濃度參照DZ/T 0064.47—1993《地下水質(zhì)檢驗(yàn)方法 滴定法測定游離二氧化碳》[13]中的直接滴定法測定，測得pH值為5.9、6.2、6.5和6.8的二氧化碳麻醉液的游離二氧化碳質(zhì)量濃度分別為60、37、18、10 mg/L。
使用MS-222作為麻醉劑時(shí)的操作方法如下：分別向不同的運(yùn)輸水箱中加入MS-222，使其質(zhì)量濃度分別為20、25、30 mg/L，并不斷攪拌，使MS-222充分溶解。
將羅非魚從暫養(yǎng)水箱中取出，分別放入裝有不同質(zhì)量濃度二氧化碳麻醉液、MS-222麻醉液及清水的運(yùn)輸水箱，依次記為實(shí)驗(yàn)組、陽性對照組及空白對照組。有水?；钸^程中每隔一段時(shí)間向水中通入氧氣，保持氧氣充足。每個(gè)運(yùn)輸水箱放置3 條羅非魚。
1.3.2 麻醉對水質(zhì)的影響
從模擬運(yùn)輸0 h開始，每隔2 h分別取水樣對其氨氮濃度和亞硝酸鹽濃度進(jìn)行檢測，直到有魚死亡為止。氨氮濃度測定：參照HJ 535—2009《水質(zhì) 氨氮的測定 納氏試劑分光光度法》[14]；亞硝酸鹽氮濃度測定：參照
GB/T 7493—1987《水質(zhì) 亞硝酸鹽氮的測定 分光光度法》[15]。
1.3.3 麻醉對羅非魚存活時(shí)間的影響
觀察羅非魚在有水保活過程中的行為表現(xiàn)，魚鰓連續(xù)30 s內(nèi)沒有活動(dòng)則認(rèn)為該魚死亡，直到所有魚全部死亡。分別記錄各組羅非魚的存活時(shí)間。
1.3.4 麻醉對羅非魚復(fù)蘇率的影響
有水保活4 h后，將魚從運(yùn)輸水箱中取出，放入裝有充氧清水的水箱，觀察魚的行為表現(xiàn)，以能夠恢復(fù)直立游動(dòng)能力為復(fù)蘇標(biāo)準(zhǔn)，記錄各組羅非魚的復(fù)蘇率。
1.4 數(shù)據(jù)處理
實(shí)驗(yàn)均平行測定3 次，結(jié)果用平均值±標(biāo)準(zhǔn)差表示。使用SPSS 19.0軟件對數(shù)據(jù)進(jìn)行處理，用Post hoc Tukeys test對各組數(shù)據(jù)間的差異顯著性進(jìn)行分析（P=0.05）；使用Origin 9.1軟件作圖。
2 結(jié)果與分析
2.1 二氧化碳麻醉對運(yùn)輸水質(zhì)的影響
2.1.1 二氧化碳麻醉對水樣氨氮濃度的影響
水中的氨氮主要來源于魚類排泄出的蛋白質(zhì)代謝產(chǎn)物，非離子態(tài)的氨分子可以直接透過生物膜進(jìn)入魚類體內(nèi)，因此相對于銨離子，非離子氨對魚的毒性更大，長時(shí)間暴露在含氨的水中會(huì)導(dǎo)致魚類死亡。Benli等[16]研究發(fā)現(xiàn)，當(dāng)水中氨氮的質(zhì)量濃度達(dá)0.25 mg/L時(shí)，羅非魚開始死亡；當(dāng)氨氮的質(zhì)量濃度增至0.60 mg/L時(shí)，羅非魚在48 h內(nèi)全部死亡。對于成魚來說，氨氮的半致死質(zhì)量濃度約為0.42 mg/L[17]。
運(yùn)輸密度會(huì)造成魚的應(yīng)激反應(yīng)，使其體內(nèi)的皮質(zhì)醇含量升高[18]，而皮質(zhì)醇會(huì)導(dǎo)致氨氮對魚的毒性增強(qiáng)，從而降低魚對氨氮的耐受程度[19]。因此在本研究中，水樣中的氨氮質(zhì)量濃度接近0.2 mg/L時(shí)，羅非魚即開始出現(xiàn)死亡。二氧化碳和MS-222均可以起到麻醉作用，降低魚在有水?；钸^程中的氨氮排泄量。有水保活8 h后，pH 6.2的二氧化碳麻醉液中氨氮的質(zhì)量濃度顯著高于MS-222質(zhì)量濃度為20 mg/L的麻醉液，說明MS-222對延長羅非魚出現(xiàn)死亡的時(shí)間及抑制氨氮排放的效果更好。
由于大多數(shù)魚類對水中二氧化碳的濃度較為敏感，且水中二氧化碳的濃度較難控制，因此使用二氧化碳水溶液作為活魚運(yùn)輸麻醉劑的報(bào)道較少。郭豐紅[20]使用高氧濃度的二氧化碳麻醉液將鱖魚麻醉后放入低溫充氧清水中進(jìn)行模擬運(yùn)輸實(shí)驗(yàn)，結(jié)果表明，經(jīng)麻醉后鱖魚的存活時(shí)間顯著大于未經(jīng)麻醉的鱖魚。本研究中，麻醉劑濃度越高，其抑制羅非魚氨氮排泄的效果越明顯，這與Park等[5]的研究結(jié)果相似，他們將美洲擬鰈魚置于不同濃度的麻醉液中進(jìn)行模擬運(yùn)輸實(shí)驗(yàn)，結(jié)果表明，美洲擬鰈魚在高濃度麻醉液中的排氨量明顯小于在低濃度麻醉液中的排氨量。
2.1.2 二氧化碳麻醉對水樣亞硝酸鹽濃度的影響
魚類運(yùn)輸過程中水中亞硝酸鹽的主要來源是硝化細(xì)菌在無氧條件下將氨轉(zhuǎn)化為亞硝酸鹽，亞硝酸鹽的主要危害是將魚體內(nèi)的血紅蛋白轉(zhuǎn)化為高鐵血紅蛋白，使其失去攜氧能力，嚴(yán)重時(shí)能夠?qū)е卖~類窒息死亡[21]。趙元鳳等[22]研究發(fā)現(xiàn)，對于羅非魚來說，水中亞硝酸鹽氮質(zhì)量濃度的安全范圍為0.0～2.8 mg/L。由圖2可知，本研究中各組水樣的亞硝酸鹽氮質(zhì)量濃度均未超過此范圍，說明水中的亞硝酸鹽不是導(dǎo)致羅非魚死亡的因素。在有水保活實(shí)驗(yàn)中，各組運(yùn)輸用水中的溶解氧均達(dá)到了過飽和的濃度，因此只有極少數(shù)氨分子被硝化細(xì)菌轉(zhuǎn)化為亞硝酸鹽，各組水樣的亞硝酸鹽氮質(zhì)量濃度差異主要是由氨氮濃度的差異造成的。對于空白對照組水樣，由于其本身氨氮含量較高，因此亞硝酸鹽氮質(zhì)量濃度也處于相對較高的水平；采用較高質(zhì)量濃度二氧化碳麻醉液（pH 5.9）和MS-222麻醉液（30 mg/L）處理的羅非魚由于較強(qiáng)的麻醉效果抑制了其氨氮的排放，因此這2 組水樣的亞硝酸鹽氮質(zhì)量濃度處于相對較低的水平；經(jīng)中、低質(zhì)量濃度二氧化碳麻醉液處理的羅非魚，其運(yùn)輸水中亞硝酸鹽氮的質(zhì)量濃度與空白對照組均無顯著差異
（P>0.05），這與Zhao Jianhua等[23]的研究結(jié)果類似，他們發(fā)現(xiàn)圓口銅魚在30 mg/L的MS-222麻醉液中經(jīng)過14 h的有水模擬運(yùn)輸后，水中亞硝酸鹽氮的質(zhì)量濃度與模擬運(yùn)輸前以及空白對照組均無顯著差異。
2.2 麻醉對模擬運(yùn)輸過程中羅非魚行為的影響
當(dāng)羅非魚從暫養(yǎng)水箱轉(zhuǎn)入有水?；钏浜?，在pH值為5.9和6.2的二氧化碳麻醉液中存在逃逸、掙扎行為，逃逸現(xiàn)象在2 組麻醉液中分別僅持續(xù)4 min和7 min，但在其他幾組麻醉液中均未發(fā)現(xiàn)明顯的掙扎現(xiàn)象。當(dāng)逃逸現(xiàn)象消失后，羅非魚在各組麻醉液中均處于靜止?fàn)顟B(tài)，呼吸均勻；空白對照組羅非魚偶有游動(dòng)。有水?；?0 min后，pH 5.9的二氧化碳麻醉液中的羅非魚開始浮出水面呼吸，之后30～40 min出現(xiàn)魚體側(cè)翻、鰓動(dòng)幅度變大，最終死亡；空白對照組，pH 6.2、6.5、6.8二氧化碳溶液，MS-222質(zhì)量濃度20、30 mg/L麻醉液中的羅非魚在有水保活分別進(jìn)行到240、480、280、270、600、200 min后出現(xiàn)掙扎、跳躍的現(xiàn)象，但無明顯的浮頭現(xiàn)象發(fā)生，各組羅非魚在出現(xiàn)掙扎、跳躍等不規(guī)則現(xiàn)象后均在1 h內(nèi)失去平衡，2 h內(nèi)死亡。
各組羅非魚的行為特點(diǎn)不同，相同行為出現(xiàn)的時(shí)間也不同。羅非魚在較高濃度二氧化碳麻醉液中麻醉初期存在逃逸行為，此結(jié)果與Guan Weiliang等[11]的研究結(jié)果相符，二氧化碳麻醉會(huì)對魚類造成應(yīng)激反應(yīng)，但反應(yīng)不會(huì)長時(shí)間持續(xù)。逃逸行為消失后，魚類進(jìn)入輕微的麻醉狀態(tài)，停止游動(dòng)，代謝變慢。羅非魚在MS-222麻醉液中無明顯的逃逸行為，此結(jié)果與范興[24]的研究結(jié)果類似，他們發(fā)現(xiàn)羅非魚在質(zhì)量濃度為60、100 mg/L的MS-222麻醉液中均無掙扎現(xiàn)象，而本研究中MS-222的質(zhì)量濃度僅為20、30 mg/L。何大仁等[25]指出，在水中溶解氧含量充足的條件下，當(dāng)水中的二氧化碳含量超過魚類的耐受范圍時(shí)，魚類會(huì)感到不適并出現(xiàn)浮頭；水中的二氧化碳含量繼續(xù)升高時(shí)，魚類將失去平衡，不久就會(huì)死亡。在本研究中，對于pH 5.9的二氧化碳麻醉液中的羅非魚，由于其所處環(huán)境中的二氧化碳濃度過高，因此僅90 min就出現(xiàn)浮頭等現(xiàn)象。曲克明等[26]指出，魚類氨氮中毒時(shí)會(huì)表現(xiàn)出較為狂躁的逃逸、掙扎行為，并且?guī)追昼姾蟊銜?huì)死亡。在本研究中，經(jīng)過一段時(shí)間的有水保活后，各組運(yùn)輸水中的氨氮濃度均有所升高，當(dāng)其濃度達(dá)到羅非魚的耐受值時(shí)，羅非魚即表現(xiàn)出氨氮中毒所造成的行為。甘靜雯等[27]指出，高劑量的MS-222能夠在短時(shí)間將斑馬魚深度麻醉，但是藥物會(huì)聚集于內(nèi)臟中，造成魚類產(chǎn)生怪異的游動(dòng)行為并且最終死亡。在本研究中，羅非魚處于30 mg/L的MS-222麻醉液中時(shí)，僅有水?；?00 min后便出現(xiàn)失去平衡的現(xiàn)象。
2.3 麻醉對羅非魚有水保活時(shí)間及復(fù)蘇率的影響
2.3.1 二氧化碳麻醉對羅非魚有水?；顣r(shí)間及復(fù)蘇率的影響
Takeda等[12]研究發(fā)現(xiàn)，使用充氧的二氧化碳水溶液（115 mmHg二氧化碳和400 mmHg氧氣）能夠使鯉魚在運(yùn)輸過程中達(dá)到鎮(zhèn)定效果，但是當(dāng)運(yùn)輸時(shí)間過長時(shí)，魚類呼吸排出的二氧化碳使運(yùn)輸用水中的二氧化碳濃度超過魚類的承受范圍，魚類開始大量死亡。魚類對水中的二氧化碳濃度較為敏感，水中二氧化碳濃度的升高會(huì)對魚類造成初級應(yīng)激反應(yīng)，表現(xiàn)為呼吸頻率和幅度的增大以及血液pH值的降低[28]。在氧氣充足的條件下，水中一定濃度的二氧化碳會(huì)抑制魚類體內(nèi)二氧化碳的排出，當(dāng)二氧化碳在魚體內(nèi)累計(jì)到一定程度時(shí)，魚類會(huì)產(chǎn)生鎮(zhèn)定甚至完全麻醉的效果[29]，減輕其在運(yùn)輸過程中的代謝速率和應(yīng)激反應(yīng)。
魚在封閉運(yùn)輸系統(tǒng)（無循環(huán)水）中的存活時(shí)間受較多因素的影響，本研究是在氧氣過飽和的條件下進(jìn)行，魚不會(huì)因缺氧而死亡，因此水中二氧化碳和氨氮的質(zhì)量濃度差異是造成各組羅非魚存活時(shí)間差異的主要原因。何琳等[30]指出，當(dāng)水中游離二氧化碳的質(zhì)量濃度大于80 mg/L時(shí)，羅非魚會(huì)出現(xiàn)呼吸困難現(xiàn)象。盡管在本研究中pH 5.9的二氧化碳麻醉液（質(zhì)量濃度60 mg/L）對羅非魚氨氮排放的抑制效果最好（圖1），但當(dāng)長時(shí)間處于較高質(zhì)量濃度的二氧化碳水溶液中，羅非魚體內(nèi)的二氧化碳排放被過度抑制，導(dǎo)致其產(chǎn)生高碳酸血癥、血液pH值降低，從而使魚過早死亡[28]。此外，冉春麗[31]指出，淡水魚生長的最適pH值為6.5～8.5，因此當(dāng)羅非魚處于pH 5.9的二氧化碳水溶液中時(shí)，過低的pH值也減少了其保活時(shí)間。有水?；? h后，pH 6.2的二氧化碳麻醉液中的氨氮濃度顯著低于空白對照組和陽性對照組（圖1），且在此之后2 個(gè)對照組均有魚開始死亡。
由表1可知，在二氧化碳麻醉組中，羅非魚在pH 6.2的二氧化碳麻醉液中存活時(shí)間最久，且復(fù)蘇率為100%。郭豐紅[20]以高氧濃度的二氧化碳水溶液麻醉后的鱖魚為研究對象，在4 ℃條件下進(jìn)行有水模擬運(yùn)輸實(shí)驗(yàn)，實(shí)驗(yàn)過程中每天換水1 次，經(jīng)過128 h的有水模擬運(yùn)輸后麻醉組鱖魚的死亡率為0，對照組鱖魚在92 h后全部死亡。在本研究中，麻醉液種類與羅非魚的?；顣r(shí)間有明顯相關(guān)性，空白對照組與pH 6.5和pH 6.8二氧化碳麻醉液中的羅非魚的?；顣r(shí)間均無顯著差異（P>0.05），但復(fù)蘇率卻明顯不同。Rapp等[32]指出，魚類在遭受較強(qiáng)烈應(yīng)激因子刺激后體內(nèi)的生化和生理環(huán)境發(fā)生變化，在環(huán)境應(yīng)激因子消失后一段時(shí)間內(nèi)仍有較高的死亡率。有水?；? h后，各組羅非魚所處的環(huán)境中二氧化碳和氨的質(zhì)量濃度均不相同，因此各組魚的應(yīng)激反應(yīng)程度也不相同，進(jìn)而導(dǎo)致其在充氧清水中的復(fù)蘇率不同。
2.3.2 MS-222麻醉對羅非魚有水?；顣r(shí)間及復(fù)蘇率的影響
適當(dāng)濃度的MS-222可以降低魚的代謝速率，減輕其應(yīng)激反應(yīng)，但是當(dāng)MS-222濃度過高時(shí)會(huì)對魚的神經(jīng)系統(tǒng)造成損傷，使其存活率降低[33]。在本研究中，質(zhì)量濃度為20 mg/L的MS-222麻醉液能夠通過抑制羅非魚的代謝降低其排氨量，從而延緩水質(zhì)惡化，最終延長羅非魚在非流動(dòng)水條件下的存活時(shí)間。目前，已有較多使用MS-222作為麻醉劑延長活魚運(yùn)輸時(shí)間的案例：王利娟[34]使用質(zhì)量濃度為30 mg/L的MS-222麻醉液在20 ℃條件下對大口黑鱸魚進(jìn)行有水模擬運(yùn)輸實(shí)驗(yàn)，結(jié)果表明，模擬運(yùn)輸10 h后魚的復(fù)蘇率仍為100%；張麗[35]使用質(zhì)量濃度為45 mg/L的MS-222麻醉液在11 ℃條件下對大黃魚進(jìn)行有水模擬運(yùn)輸實(shí)驗(yàn)，結(jié)果表明，大黃魚的?；顣r(shí)間達(dá)297 min。雖然使用MS-222麻醉后的魚類能夠在長時(shí)間模擬運(yùn)輸后達(dá)到較高的復(fù)蘇率，但經(jīng)過MS-222處理后的魚需要暫養(yǎng)21 d后才可食用。由表1可知，在本研究中，使用二氧化碳麻醉液處理的羅非魚在復(fù)蘇率為100%的前提下也可以?；?48 min，而且與MS-222麻醉相比，二氧化碳麻醉液處理無任何藥物殘留，經(jīng)處理的魚可以直接食用。
3 結(jié) 論
使用高氧濃度的二氧化碳水溶液作為有水運(yùn)輸?shù)穆樽硪耗軌蛴行б种启~類在運(yùn)輸過程中的氨氮排放量，并且水中的亞硝酸鹽氮濃度也得到有效控制。但是較高濃度的二氧化碳麻醉液（pH 5.9）會(huì)對魚類造成較強(qiáng)烈的應(yīng)激反應(yīng)，并最終造成其?；顣r(shí)間較短。適宜濃度的二氧化碳麻醉液（pH 6.2）能夠有效延長羅非魚的有水?；顣r(shí)間，且與化學(xué)麻醉劑（MS-222）相比無任何有害物質(zhì)殘留，可以應(yīng)用于羅非魚的有水運(yùn)輸。
參考文獻(xiàn)：
[1] 劉雪兵， 張璐， 米海峰， 等. 廣西羅非魚養(yǎng)殖模式概述[J]. 海洋與漁業(yè)（水產(chǎn)前沿）， 2013（12）： 109-111. DOI：10.3969/j.issn.1672-4046.2013.12.033.
[2] FERREIRA J T， SCHOONBEE H J， SMIT G L. The use of benzocaine-hydrochloride as an aid in the transport of fish[J]. Aquaculture， 1984， 42（2）： 169-174. DOI：10.1016/0044-8486（84）90364-8.
[3] 王利娟， 程守坤， 張飲江， 等. MS-222在加州鱸魚模擬運(yùn)輸中的麻醉效果[J]. 上海海洋大學(xué)學(xué)報(bào)， 2015， 24（2）： 235-241.
[4] BALAMURUGAN J， AJITH KUMAR T T， PRAKASH S， et al.
Clove extract： a potential source for stress free transport of fish[J]. Aquaculture， 2016， 454： 171-175. DOI：10.1016/j.aquaculture.2015.12.020.
[5] PARK I S， PARK M O， HUR J W， et al. Anesthetic effects of lidocaine-hydrochloride on water parameters in simulated transport experiment of juvenile winter flounder， Pleuronectes americanus[J]. Aquaculture， 2009， 294（1/2）： 76-79. DOI：10.1016/j.aquaculture.2009.05.011.
[6] WANG Z C， YAN Y Z， NISAR T， et al. Influence of postmortem treatment with nitric oxide on the muscle color and color stability of tilapia （Oreochromis niloticus） fillets[J]. Nitric Oxide， 2017， 9： 1-7. DOI：10.1016/j.niox.2017.09.009.
[7] WANG Zichao， ZHAO Mouming， FANG Zhongxiang， et al. Nitric oxide euthanasia： a potential procedure for improving animal welfare and fillet color of tilapia （Oreochromis niloticus）[J]. Aquaculture International， 2017， 25（5）： 1845-1856. DOI：10.1007/s10499-017-0162-x.
[8] 金一春， 胡萍華， 曲學(xué)偉， 等. 二氧化碳麻醉對白斑狗魚的影響[J]. 湖南農(nóng)業(yè)科學(xué)， 2009（12）： 138-140. DOI：10.16498/j.cnki.hnnykx.2009.12.034.
[9] OBERG E W， PEREZ K O， FUIMAN L A. Carbon dioxide is an effective anesthetic for multiple marine fish species[J]. Fisheries Research， 2015， 165： 22-27. DOI：10.1016/j.fishres.2014.12.019.
[10] 陳名帥， 范興， 陸玉芹， 等. 宰前二氧化碳麻醉對羅非魚肉品質(zhì)影響的研究[J]. 現(xiàn)代食品科技， 2014（4）： 226-232. DOI：10.1016/j.fishres.2014.12.019.
[11] GUAN Weiliang， ZHAO Mouming， LIU Tiantian， et al. Cooling combined with hyperoxic CO2 anesthesia is effective in improving the air exposure duration of tilapia[J]. Scientific Reports， 2017， 7（1）： 14016. DOI：10.1038/s41598-017-14212-3.
[12] TAKEDA T， ITAZAWA Y. Possibility of applying anesthesia by carbon dioxide in the transportation of live fish[J]. Nippon Suisan Gakkaishi， 1983， 49： 725-731. DOI：10.2331/suisan.49.725.
[13] 中華人民共和國地質(zhì)礦產(chǎn)部天津市中心實(shí)驗(yàn)室. 地下水質(zhì)檢驗(yàn)方法 滴定法測定游離二氧化碳： DZ/T 0064.47—1993[S]. 北京： 中國標(biāo)準(zhǔn)出版社， 1993.
[14] 沈陽市環(huán)境監(jiān)測中心站. 水質(zhì) 氨氮的測定 納氏試劑分光光度法： HJ 535—2009[S]. 北京： 中國環(huán)境科學(xué)出版社， 2009.
[15] 湖北省環(huán)境監(jiān)測中心站. 水質(zhì) 亞硝酸鹽氮的測定 分光光度法：
GB/T 7493 —1987[S]. 北京： 中國標(biāo)準(zhǔn)出版社， 1987.
[16] BENL? A ? K， K?KSAL G. The acute toxicity of ammonia on tilapia （Oreochromis niloticus L.） larvae and fingerlings[J]. Turkish Journal of Veterinary and Animal Sciences， 2005， 29（2）： 339-344.
[17] BENLI A ? K， K?KSAL G， ?ZKUL A. Sublethal ammonia exposure of Nile tilapia （Oreochromis niloticus L.）： effects on gill， liver and kidney histology[J]. Chemosphere， 2008， 72（9）： 1355-1358. DOI：10.1016/j.chemosphere.2008.04.037.
[18] PAVLIDIS M， ANGELLOTTI L， PAPANDROULAKIS N， et al. Evaluation of transportation procedures on water quality and fry performance in red porgy （Pagrus pagrus） fry[J]. Aquaculture， 2003， 218（1/4）： 187-202. DOI：10.1016/S0044-8486（02）00314-9.
[19] RANDALL D J， TSUI T K N. Ammonia toxicity in fish[J]. Marine Pollution Bulletin， 2002， 45（1/12）： 17-23. DOI：10.1016/S0025-326X（02）00227-8.
[20] 郭豐紅. 鱖魚?；钸\(yùn)輸?shù)难芯縖D]. 上海： 上海海洋大學(xué)， 2010： 28-29.
[21] LEWIS W M， MORRIS D P. Toxicity of nitrite to fish： a review[J]. Transactions of the American Fisheries Society， 1986， 115（2）： 183-195.
DOI：10.1577/1548-8659（1986）115<183：TONTF>2.0.CO；2.
[22] 趙元鳳， 祝國芹， 呂景才. 亞硝酸鹽對尼羅羅非魚的毒性及其機(jī)理的研究[J]. 大連水產(chǎn)學(xué)院學(xué)報(bào)， 1991（1）： 62-65. DOI：10.16535/j.cnki.dlhyxb.1991.01.010.
[23] ZHAO Jianhua， ZHU Yongjiu， HE Yongfeng， et al. Effects of temperature reduction and MS-222 on water quality and blood biochemistry in simulated transport experiment of largemouth bronze gudgeon， Coreius guichenoti[J]. Journal of the World Aquaculture Society， 2014， 45（5）： 493-507. DOI：10.1111/jwas.12147.
[24] 范興. 麻醉對羅非魚和金鯧魚離水保活的影響[D]. 南寧： 廣西大學(xué)， 2014： 22-23.
[25] 何大仁， 徐厚才. 魚類行為學(xué)[M]. 廈門： 廈門大學(xué)出版社， 1998.
[26] 曲克明， 徐勇， 馬紹賽， 等. 不同溶解氧條件下亞硝酸鹽和非離子氨對大菱鲆的急性毒性效應(yīng)[J]. 海洋水產(chǎn)研究， 2007， 28（4）： 83-88. DOI：10.3969/j.issn.1000-7075.2007.04.014.
[27] 甘靜雯， 邱紹揚(yáng)， 許忠能， 等. 麻醉劑MS-222對斑馬魚行為的影響[J]. 生態(tài)科學(xué)， 2006（3）： 236-239. DOI：10.3969/j.issn.1008-8873.2006.03.011.
[28] TANG S， THORARENSEN H， BRAUNER C J， et al. Modeling the accumulation of CO2 during high density， re-circulating transport of adult Atlantic salmon， Salmo salar， from observations aboard a
sea-going commercial live-haul vessel[J]. Aquaculture， 2009， 296（1/2）： 102-109. DOI：10.1016/j.aquaculture.2009.07.020.
[29] ERIKSON U. Assessment of different stunning methods and recovery of farmed Atlantic salmon （Salmo salar）： isoeugenol， nitrogen and three levels of carbon dioxide[J]. Animal Welfare， 2011， 20（3）： 365-375.
[30] 何琳， 江敏， 馬允， 等. 羅非魚在保活運(yùn)輸中關(guān)鍵因子調(diào)控技術(shù)研究[J]. 湖南農(nóng)業(yè)科學(xué)， 2011（13）： 151-154. DOI：10.3969/j.issn.1006-060X.2011.13.045.
[31] 冉春麗. 羅非魚養(yǎng)殖池塘水質(zhì)調(diào)控技術(shù)[J]. 中國水產(chǎn)， 2013（11）： 48-50.
DOI：10.3969/j.issn.1002-6681.2013.11.021.
[32] RAPP T， HALLERMANN J， COOKE S J， et al. Consequences of air exposure on the physiology and behavior of caught-and-released common carp in the laboratory and under natural conditions[J]. North American Journal of Fisheries Management， 2014， 34（2）： 232-246. DOI：10.1080/02755947.2013.855279.
[33] 柳旭東， 王際英， 張利民， 等. 麻醉劑MS-222及其麻醉效果的影響因素[J]. 水產(chǎn)科技情報(bào)， 2009（2）： 56-59. DOI：10.3969/j.issn.1001-1994.2009.02.001.
[34] 王利娟. 大口黑鱸保活運(yùn)輸?shù)难芯縖D]. 上海： 上海海洋大學(xué)， 2015： 32-33.
[35] 張麗. 大黃魚保活運(yùn)輸及冰溫保鮮的研究[D]. 上海： 上海海洋大學(xué)， 2010： 40-41.
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摘 要：將麻醉劑應(yīng)用于羅非魚的有水運(yùn)輸能夠減輕魚類在運(yùn)輸過程中的應(yīng)激反應(yīng)，從而減少其氨氮排放，最終達(dá)到延長運(yùn)輸時(shí)間的目的。本研究使用二氧化碳水溶液作為麻醉劑，并以化學(xué)麻醉劑間氨基苯甲酸乙酯甲磺酸鹽（MS-222）作為陽性對照，比較2 種麻醉方式的優(yōu)劣。結(jié)果表明：羅非魚在pH 6.2、9 mg/L二氧化碳麻醉液和質(zhì)量濃度為20 mg/L的MS-222麻醉液中存活時(shí)間最久，分別為548 min和710 min，且有水?；? h后的復(fù)蘇率均達(dá)100%；羅非魚在相同條件充氧清水中的存活時(shí)間僅為362 min，有水?；? h后的復(fù)蘇率為33%。因此，適宜質(zhì)量濃度的二氧化碳和MS-222麻醉液均能延長羅非魚在有水?；钸^程中的存活時(shí)間。
關(guān)鍵詞：羅非魚；二氧化碳；有水運(yùn)輸；復(fù)蘇率
Abstract： In this study， hyperoxic carbon dioxide solution was used for relieving the hypoxic stress response of tilapia during simulated transportation. Ammonia excretion was restrained by bubbling carbon dioxide or adding tricaine methanesulfonate （MS-222） into oxygenated water， and the effect was concentration dependent. The longest survival time of tilapia was 548 min in carbon dioxide solution （9 mg/L， pH 6.2） and 710 min in MS-222 solution （20 mg/L）， respectively. The survival rate of both groups was 100% in oxygenated water after 4 hours of simulated transportation. In contrast， the survival time of the control group， in which fish were transported with oxygenated water without additive， was 362 min， and the survival rate was only 33%. Therefore， carbon dioxide or MS-222 is an effective sedative for live tilapia transportation.
Keywords： tilapia； carbon dioxide； transportation with water； survival rate
DOI：10.7506/rlyj1001-8123-201802009
中圖分類號：TS254.1 文獻(xiàn)標(biāo)志碼：A 文章編號：1001-8123（2018）02-0052-05
引文格式：
管維良， 陳德慰. 二氧化碳麻醉對羅非魚有水運(yùn)輸?shù)挠绊慬J]. 肉類研究， 2018， 32（2）： 52-56. DOI：10.7506/rlyj1001-8123-201802009. http：//www.rlyj.pub
GUAN Weiliang， CHEN Dewei. Effect of carbon dioxide anesthesia in live tilapia transportation with water[J]. Meat Research， 2018， 32（2）： 52-56. DOI：10.7506/rlyj1001-8123-201802009. http：//www.rlyj.pub
羅非魚受到消費(fèi)者的喜愛，且在我國南方大范圍養(yǎng)殖[1]。魚類在有水運(yùn)輸過程中由于受到擁擠和機(jī)械振動(dòng)的影響會(huì)產(chǎn)生一系列應(yīng)激反應(yīng)，導(dǎo)致其代謝速率加快，增大氧氣的消耗量及氨氮類物質(zhì)的排放量，導(dǎo)致運(yùn)輸過程中的存活率下降。
麻醉劑經(jīng)常被用來減輕運(yùn)輸過程中魚類的應(yīng)激反應(yīng)。早在1984年，F(xiàn)erreira等[2]就對使用苯唑卡因處理羅非魚進(jìn)行研究，結(jié)果表明，處理后的羅非魚在運(yùn)輸過程中不僅減少了1/3的氧氣消耗量，而且也降低了二氧化碳和氨氮的排放量。王利娟等[3]發(fā)現(xiàn)在運(yùn)輸過程中添加間氨基苯甲酸乙酯甲磺酸鹽（MS-222）能夠顯著提高大嘴黑鱸魚24 h模擬運(yùn)輸后的復(fù)蘇率。此外，丁香油也常作為魚類運(yùn)輸過程中的麻醉劑，用以提高運(yùn)輸后的存活率[4]。但是，僅MS-222為美國食品藥品管理局（Food and Drug Administration，F(xiàn)DA）批準(zhǔn)使用的食用魚麻醉劑，且經(jīng)MS-222處理的魚類需暫養(yǎng)21 d才可食用[5]。
目前一些常見氣體在水產(chǎn)行業(yè)已經(jīng)有較為廣泛的應(yīng)用。宰前使用一氧化氮處理羅非魚不僅可以對魚類進(jìn)行麻醉，減輕動(dòng)物在宰殺過程中的痛苦，提高動(dòng)物福利，同時(shí)可以進(jìn)行活體發(fā)色，且發(fā)色自然、顏色保持穩(wěn)定，不易褪色[6-7]。二氧化碳水溶液對于魚類是一種較為理想的麻醉劑已經(jīng)得到證實(shí)，其優(yōu)點(diǎn)在于沒有任何藥物殘留，不會(huì)污染環(huán)境，且價(jià)格低廉[8-9]。陳名帥等[10]發(fā)現(xiàn)使用二氧化碳將魚麻醉后進(jìn)行宰殺可以減輕其應(yīng)激反應(yīng)，提高魚片的品質(zhì)；Guan Weiliang等[11]發(fā)現(xiàn)高氧濃度的二氧化碳水溶液能夠麻醉羅非魚，并且顯著延長其在無水條件下的存活時(shí)間。但是目前使用二氧化碳水溶液作為魚類有水運(yùn)輸過程中的麻醉劑的研究較少。Takeda等[12]通過控制水中二氧化碳和氧氣的濃度達(dá)到了在運(yùn)輸過程中使魚類鎮(zhèn)定的效果。本研究以羅非魚作為研究對象，通過控制水中二氧化碳和氧氣的濃度以達(dá)到將魚輕微麻醉的效果，抑制其代謝速率，延緩水質(zhì)惡化，從而達(dá)到延長?；钸\(yùn)輸時(shí)間的目的。同時(shí)，以化學(xué)麻醉劑MS-222對羅非魚進(jìn)行麻醉作為陽性對照，并對2 種麻醉方式的優(yōu)劣進(jìn)行比較。
1 材料與方法
1.1 材料與試劑
實(shí)驗(yàn)用羅非魚（63 條）購于南寧市五里亭市場，單條質(zhì)量（500±50） g，確保魚的活力充沛，體質(zhì)良好，在（30±2） ℃流動(dòng)清水中暫養(yǎng)2 d。
MS-222、磷酸、硫酸、鹽酸、4-氨基苯磺酰胺、
N-（1-萘基）-乙二胺二鹽酸鹽、亞硝酸鈉、氯仿、高錳酸鉀、草酸鈉、酚酞指示劑、鹽酸、二氯化汞、碘化鉀、氫氧化鉀、酒石酸鉀鈉、硫代硫酸鈉、硫酸鋅、氫氧化鈉及氯化銨（均為分析純） 上海麥克林生化科技有限公司。
1.2 儀器與設(shè)備
TLE204E型分析天平 梅特勒-托利多儀器（上海）有限公司；PHSJ-4F型pH計(jì) 上海雷磁儀器廠；氧氣鋼瓶、二氧化碳鋼瓶、減壓閥 廣西國信氣體研究有限公司；VIS-722型分光光度計(jì) 上海佑科儀器儀表有限公司。
1.3 方法
1.3.1 模擬運(yùn)輸
分別使用二氧化碳和MS-222作為麻醉劑對羅非魚進(jìn)行有水保活實(shí)驗(yàn)。實(shí)驗(yàn)在運(yùn)輸水箱中進(jìn)行，于室溫（23±2） ℃條件下將水箱裝入6 L清水，以1 L/min的流速向水中通入氧氣，當(dāng)氧氣濃度達(dá)到過飽和后停止通氣。
使用二氧化碳作為麻醉劑時(shí)的操作方法如下：繼續(xù)將二氧化碳以0.5 L/min的流速通入運(yùn)輸水箱中，使二氧化碳水溶液的pH值分別達(dá)5.9、6.2、6.5和6.8，當(dāng)pH值達(dá)到設(shè)定值時(shí)停止通氣，分別取水樣檢測其二氧化碳質(zhì)量濃度。游離二氧化碳質(zhì)量濃度參照DZ/T 0064.47—1993《地下水質(zhì)檢驗(yàn)方法 滴定法測定游離二氧化碳》[13]中的直接滴定法測定，測得pH值為5.9、6.2、6.5和6.8的二氧化碳麻醉液的游離二氧化碳質(zhì)量濃度分別為60、37、18、10 mg/L。
使用MS-222作為麻醉劑時(shí)的操作方法如下：分別向不同的運(yùn)輸水箱中加入MS-222，使其質(zhì)量濃度分別為20、25、30 mg/L，并不斷攪拌，使MS-222充分溶解。
將羅非魚從暫養(yǎng)水箱中取出，分別放入裝有不同質(zhì)量濃度二氧化碳麻醉液、MS-222麻醉液及清水的運(yùn)輸水箱，依次記為實(shí)驗(yàn)組、陽性對照組及空白對照組。有水?；钸^程中每隔一段時(shí)間向水中通入氧氣，保持氧氣充足。每個(gè)運(yùn)輸水箱放置3 條羅非魚。
1.3.2 麻醉對水質(zhì)的影響
從模擬運(yùn)輸0 h開始，每隔2 h分別取水樣對其氨氮濃度和亞硝酸鹽濃度進(jìn)行檢測，直到有魚死亡為止。氨氮濃度測定：參照HJ 535—2009《水質(zhì) 氨氮的測定 納氏試劑分光光度法》[14]；亞硝酸鹽氮濃度測定：參照
GB/T 7493—1987《水質(zhì) 亞硝酸鹽氮的測定 分光光度法》[15]。
1.3.3 麻醉對羅非魚存活時(shí)間的影響
觀察羅非魚在有水保活過程中的行為表現(xiàn)，魚鰓連續(xù)30 s內(nèi)沒有活動(dòng)則認(rèn)為該魚死亡，直到所有魚全部死亡。分別記錄各組羅非魚的存活時(shí)間。
1.3.4 麻醉對羅非魚復(fù)蘇率的影響
有水保活4 h后，將魚從運(yùn)輸水箱中取出，放入裝有充氧清水的水箱，觀察魚的行為表現(xiàn)，以能夠恢復(fù)直立游動(dòng)能力為復(fù)蘇標(biāo)準(zhǔn)，記錄各組羅非魚的復(fù)蘇率。
1.4 數(shù)據(jù)處理
實(shí)驗(yàn)均平行測定3 次，結(jié)果用平均值±標(biāo)準(zhǔn)差表示。使用SPSS 19.0軟件對數(shù)據(jù)進(jìn)行處理，用Post hoc Tukeys test對各組數(shù)據(jù)間的差異顯著性進(jìn)行分析（P=0.05）；使用Origin 9.1軟件作圖。
2 結(jié)果與分析
2.1 二氧化碳麻醉對運(yùn)輸水質(zhì)的影響
2.1.1 二氧化碳麻醉對水樣氨氮濃度的影響
水中的氨氮主要來源于魚類排泄出的蛋白質(zhì)代謝產(chǎn)物，非離子態(tài)的氨分子可以直接透過生物膜進(jìn)入魚類體內(nèi)，因此相對于銨離子，非離子氨對魚的毒性更大，長時(shí)間暴露在含氨的水中會(huì)導(dǎo)致魚類死亡。Benli等[16]研究發(fā)現(xiàn)，當(dāng)水中氨氮的質(zhì)量濃度達(dá)0.25 mg/L時(shí)，羅非魚開始死亡；當(dāng)氨氮的質(zhì)量濃度增至0.60 mg/L時(shí)，羅非魚在48 h內(nèi)全部死亡。對于成魚來說，氨氮的半致死質(zhì)量濃度約為0.42 mg/L[17]。
運(yùn)輸密度會(huì)造成魚的應(yīng)激反應(yīng)，使其體內(nèi)的皮質(zhì)醇含量升高[18]，而皮質(zhì)醇會(huì)導(dǎo)致氨氮對魚的毒性增強(qiáng)，從而降低魚對氨氮的耐受程度[19]。因此在本研究中，水樣中的氨氮質(zhì)量濃度接近0.2 mg/L時(shí)，羅非魚即開始出現(xiàn)死亡。二氧化碳和MS-222均可以起到麻醉作用，降低魚在有水?；钸^程中的氨氮排泄量。有水保活8 h后，pH 6.2的二氧化碳麻醉液中氨氮的質(zhì)量濃度顯著高于MS-222質(zhì)量濃度為20 mg/L的麻醉液，說明MS-222對延長羅非魚出現(xiàn)死亡的時(shí)間及抑制氨氮排放的效果更好。
由于大多數(shù)魚類對水中二氧化碳的濃度較為敏感，且水中二氧化碳的濃度較難控制，因此使用二氧化碳水溶液作為活魚運(yùn)輸麻醉劑的報(bào)道較少。郭豐紅[20]使用高氧濃度的二氧化碳麻醉液將鱖魚麻醉后放入低溫充氧清水中進(jìn)行模擬運(yùn)輸實(shí)驗(yàn)，結(jié)果表明，經(jīng)麻醉后鱖魚的存活時(shí)間顯著大于未經(jīng)麻醉的鱖魚。本研究中，麻醉劑濃度越高，其抑制羅非魚氨氮排泄的效果越明顯，這與Park等[5]的研究結(jié)果相似，他們將美洲擬鰈魚置于不同濃度的麻醉液中進(jìn)行模擬運(yùn)輸實(shí)驗(yàn)，結(jié)果表明，美洲擬鰈魚在高濃度麻醉液中的排氨量明顯小于在低濃度麻醉液中的排氨量。
2.1.2 二氧化碳麻醉對水樣亞硝酸鹽濃度的影響
魚類運(yùn)輸過程中水中亞硝酸鹽的主要來源是硝化細(xì)菌在無氧條件下將氨轉(zhuǎn)化為亞硝酸鹽，亞硝酸鹽的主要危害是將魚體內(nèi)的血紅蛋白轉(zhuǎn)化為高鐵血紅蛋白，使其失去攜氧能力，嚴(yán)重時(shí)能夠?qū)е卖~類窒息死亡[21]。趙元鳳等[22]研究發(fā)現(xiàn)，對于羅非魚來說，水中亞硝酸鹽氮質(zhì)量濃度的安全范圍為0.0～2.8 mg/L。由圖2可知，本研究中各組水樣的亞硝酸鹽氮質(zhì)量濃度均未超過此范圍，說明水中的亞硝酸鹽不是導(dǎo)致羅非魚死亡的因素。在有水保活實(shí)驗(yàn)中，各組運(yùn)輸用水中的溶解氧均達(dá)到了過飽和的濃度，因此只有極少數(shù)氨分子被硝化細(xì)菌轉(zhuǎn)化為亞硝酸鹽，各組水樣的亞硝酸鹽氮質(zhì)量濃度差異主要是由氨氮濃度的差異造成的。對于空白對照組水樣，由于其本身氨氮含量較高，因此亞硝酸鹽氮質(zhì)量濃度也處于相對較高的水平；采用較高質(zhì)量濃度二氧化碳麻醉液（pH 5.9）和MS-222麻醉液（30 mg/L）處理的羅非魚由于較強(qiáng)的麻醉效果抑制了其氨氮的排放，因此這2 組水樣的亞硝酸鹽氮質(zhì)量濃度處于相對較低的水平；經(jīng)中、低質(zhì)量濃度二氧化碳麻醉液處理的羅非魚，其運(yùn)輸水中亞硝酸鹽氮的質(zhì)量濃度與空白對照組均無顯著差異
（P>0.05），這與Zhao Jianhua等[23]的研究結(jié)果類似，他們發(fā)現(xiàn)圓口銅魚在30 mg/L的MS-222麻醉液中經(jīng)過14 h的有水模擬運(yùn)輸后，水中亞硝酸鹽氮的質(zhì)量濃度與模擬運(yùn)輸前以及空白對照組均無顯著差異。
2.2 麻醉對模擬運(yùn)輸過程中羅非魚行為的影響
當(dāng)羅非魚從暫養(yǎng)水箱轉(zhuǎn)入有水?；钏浜?，在pH值為5.9和6.2的二氧化碳麻醉液中存在逃逸、掙扎行為，逃逸現(xiàn)象在2 組麻醉液中分別僅持續(xù)4 min和7 min，但在其他幾組麻醉液中均未發(fā)現(xiàn)明顯的掙扎現(xiàn)象。當(dāng)逃逸現(xiàn)象消失后，羅非魚在各組麻醉液中均處于靜止?fàn)顟B(tài)，呼吸均勻；空白對照組羅非魚偶有游動(dòng)。有水?；?0 min后，pH 5.9的二氧化碳麻醉液中的羅非魚開始浮出水面呼吸，之后30～40 min出現(xiàn)魚體側(cè)翻、鰓動(dòng)幅度變大，最終死亡；空白對照組，pH 6.2、6.5、6.8二氧化碳溶液，MS-222質(zhì)量濃度20、30 mg/L麻醉液中的羅非魚在有水保活分別進(jìn)行到240、480、280、270、600、200 min后出現(xiàn)掙扎、跳躍的現(xiàn)象，但無明顯的浮頭現(xiàn)象發(fā)生，各組羅非魚在出現(xiàn)掙扎、跳躍等不規(guī)則現(xiàn)象后均在1 h內(nèi)失去平衡，2 h內(nèi)死亡。
各組羅非魚的行為特點(diǎn)不同，相同行為出現(xiàn)的時(shí)間也不同。羅非魚在較高濃度二氧化碳麻醉液中麻醉初期存在逃逸行為，此結(jié)果與Guan Weiliang等[11]的研究結(jié)果相符，二氧化碳麻醉會(huì)對魚類造成應(yīng)激反應(yīng)，但反應(yīng)不會(huì)長時(shí)間持續(xù)。逃逸行為消失后，魚類進(jìn)入輕微的麻醉狀態(tài)，停止游動(dòng)，代謝變慢。羅非魚在MS-222麻醉液中無明顯的逃逸行為，此結(jié)果與范興[24]的研究結(jié)果類似，他們發(fā)現(xiàn)羅非魚在質(zhì)量濃度為60、100 mg/L的MS-222麻醉液中均無掙扎現(xiàn)象，而本研究中MS-222的質(zhì)量濃度僅為20、30 mg/L。何大仁等[25]指出，在水中溶解氧含量充足的條件下，當(dāng)水中的二氧化碳含量超過魚類的耐受范圍時(shí)，魚類會(huì)感到不適并出現(xiàn)浮頭；水中的二氧化碳含量繼續(xù)升高時(shí)，魚類將失去平衡，不久就會(huì)死亡。在本研究中，對于pH 5.9的二氧化碳麻醉液中的羅非魚，由于其所處環(huán)境中的二氧化碳濃度過高，因此僅90 min就出現(xiàn)浮頭等現(xiàn)象。曲克明等[26]指出，魚類氨氮中毒時(shí)會(huì)表現(xiàn)出較為狂躁的逃逸、掙扎行為，并且?guī)追昼姾蟊銜?huì)死亡。在本研究中，經(jīng)過一段時(shí)間的有水保活后，各組運(yùn)輸水中的氨氮濃度均有所升高，當(dāng)其濃度達(dá)到羅非魚的耐受值時(shí)，羅非魚即表現(xiàn)出氨氮中毒所造成的行為。甘靜雯等[27]指出，高劑量的MS-222能夠在短時(shí)間將斑馬魚深度麻醉，但是藥物會(huì)聚集于內(nèi)臟中，造成魚類產(chǎn)生怪異的游動(dòng)行為并且最終死亡。在本研究中，羅非魚處于30 mg/L的MS-222麻醉液中時(shí)，僅有水?；?00 min后便出現(xiàn)失去平衡的現(xiàn)象。
2.3 麻醉對羅非魚有水保活時(shí)間及復(fù)蘇率的影響
2.3.1 二氧化碳麻醉對羅非魚有水?；顣r(shí)間及復(fù)蘇率的影響
Takeda等[12]研究發(fā)現(xiàn)，使用充氧的二氧化碳水溶液（115 mmHg二氧化碳和400 mmHg氧氣）能夠使鯉魚在運(yùn)輸過程中達(dá)到鎮(zhèn)定效果，但是當(dāng)運(yùn)輸時(shí)間過長時(shí)，魚類呼吸排出的二氧化碳使運(yùn)輸用水中的二氧化碳濃度超過魚類的承受范圍，魚類開始大量死亡。魚類對水中的二氧化碳濃度較為敏感，水中二氧化碳濃度的升高會(huì)對魚類造成初級應(yīng)激反應(yīng)，表現(xiàn)為呼吸頻率和幅度的增大以及血液pH值的降低[28]。在氧氣充足的條件下，水中一定濃度的二氧化碳會(huì)抑制魚類體內(nèi)二氧化碳的排出，當(dāng)二氧化碳在魚體內(nèi)累計(jì)到一定程度時(shí)，魚類會(huì)產(chǎn)生鎮(zhèn)定甚至完全麻醉的效果[29]，減輕其在運(yùn)輸過程中的代謝速率和應(yīng)激反應(yīng)。
魚在封閉運(yùn)輸系統(tǒng)（無循環(huán)水）中的存活時(shí)間受較多因素的影響，本研究是在氧氣過飽和的條件下進(jìn)行，魚不會(huì)因缺氧而死亡，因此水中二氧化碳和氨氮的質(zhì)量濃度差異是造成各組羅非魚存活時(shí)間差異的主要原因。何琳等[30]指出，當(dāng)水中游離二氧化碳的質(zhì)量濃度大于80 mg/L時(shí)，羅非魚會(huì)出現(xiàn)呼吸困難現(xiàn)象。盡管在本研究中pH 5.9的二氧化碳麻醉液（質(zhì)量濃度60 mg/L）對羅非魚氨氮排放的抑制效果最好（圖1），但當(dāng)長時(shí)間處于較高質(zhì)量濃度的二氧化碳水溶液中，羅非魚體內(nèi)的二氧化碳排放被過度抑制，導(dǎo)致其產(chǎn)生高碳酸血癥、血液pH值降低，從而使魚過早死亡[28]。此外，冉春麗[31]指出，淡水魚生長的最適pH值為6.5～8.5，因此當(dāng)羅非魚處于pH 5.9的二氧化碳水溶液中時(shí)，過低的pH值也減少了其保活時(shí)間。有水?；? h后，pH 6.2的二氧化碳麻醉液中的氨氮濃度顯著低于空白對照組和陽性對照組（圖1），且在此之后2 個(gè)對照組均有魚開始死亡。
由表1可知，在二氧化碳麻醉組中，羅非魚在pH 6.2的二氧化碳麻醉液中存活時(shí)間最久，且復(fù)蘇率為100%。郭豐紅[20]以高氧濃度的二氧化碳水溶液麻醉后的鱖魚為研究對象，在4 ℃條件下進(jìn)行有水模擬運(yùn)輸實(shí)驗(yàn)，實(shí)驗(yàn)過程中每天換水1 次，經(jīng)過128 h的有水模擬運(yùn)輸后麻醉組鱖魚的死亡率為0，對照組鱖魚在92 h后全部死亡。在本研究中，麻醉液種類與羅非魚的?；顣r(shí)間有明顯相關(guān)性，空白對照組與pH 6.5和pH 6.8二氧化碳麻醉液中的羅非魚的?；顣r(shí)間均無顯著差異（P>0.05），但復(fù)蘇率卻明顯不同。Rapp等[32]指出，魚類在遭受較強(qiáng)烈應(yīng)激因子刺激后體內(nèi)的生化和生理環(huán)境發(fā)生變化，在環(huán)境應(yīng)激因子消失后一段時(shí)間內(nèi)仍有較高的死亡率。有水?；? h后，各組羅非魚所處的環(huán)境中二氧化碳和氨的質(zhì)量濃度均不相同，因此各組魚的應(yīng)激反應(yīng)程度也不相同，進(jìn)而導(dǎo)致其在充氧清水中的復(fù)蘇率不同。
2.3.2 MS-222麻醉對羅非魚有水?；顣r(shí)間及復(fù)蘇率的影響
適當(dāng)濃度的MS-222可以降低魚的代謝速率，減輕其應(yīng)激反應(yīng)，但是當(dāng)MS-222濃度過高時(shí)會(huì)對魚的神經(jīng)系統(tǒng)造成損傷，使其存活率降低[33]。在本研究中，質(zhì)量濃度為20 mg/L的MS-222麻醉液能夠通過抑制羅非魚的代謝降低其排氨量，從而延緩水質(zhì)惡化，最終延長羅非魚在非流動(dòng)水條件下的存活時(shí)間。目前，已有較多使用MS-222作為麻醉劑延長活魚運(yùn)輸時(shí)間的案例：王利娟[34]使用質(zhì)量濃度為30 mg/L的MS-222麻醉液在20 ℃條件下對大口黑鱸魚進(jìn)行有水模擬運(yùn)輸實(shí)驗(yàn)，結(jié)果表明，模擬運(yùn)輸10 h后魚的復(fù)蘇率仍為100%；張麗[35]使用質(zhì)量濃度為45 mg/L的MS-222麻醉液在11 ℃條件下對大黃魚進(jìn)行有水模擬運(yùn)輸實(shí)驗(yàn)，結(jié)果表明，大黃魚的?；顣r(shí)間達(dá)297 min。雖然使用MS-222麻醉后的魚類能夠在長時(shí)間模擬運(yùn)輸后達(dá)到較高的復(fù)蘇率，但經(jīng)過MS-222處理后的魚需要暫養(yǎng)21 d后才可食用。由表1可知，在本研究中，使用二氧化碳麻醉液處理的羅非魚在復(fù)蘇率為100%的前提下也可以?；?48 min，而且與MS-222麻醉相比，二氧化碳麻醉液處理無任何藥物殘留，經(jīng)處理的魚可以直接食用。
3 結(jié) 論
使用高氧濃度的二氧化碳水溶液作為有水運(yùn)輸?shù)穆樽硪耗軌蛴行б种启~類在運(yùn)輸過程中的氨氮排放量，并且水中的亞硝酸鹽氮濃度也得到有效控制。但是較高濃度的二氧化碳麻醉液（pH 5.9）會(huì)對魚類造成較強(qiáng)烈的應(yīng)激反應(yīng)，并最終造成其?；顣r(shí)間較短。適宜濃度的二氧化碳麻醉液（pH 6.2）能夠有效延長羅非魚的有水?；顣r(shí)間，且與化學(xué)麻醉劑（MS-222）相比無任何有害物質(zhì)殘留，可以應(yīng)用于羅非魚的有水運(yùn)輸。
參考文獻(xiàn)：
[1] 劉雪兵， 張璐， 米海峰， 等. 廣西羅非魚養(yǎng)殖模式概述[J]. 海洋與漁業(yè)（水產(chǎn)前沿）， 2013（12）： 109-111. DOI：10.3969/j.issn.1672-4046.2013.12.033.
[2] FERREIRA J T， SCHOONBEE H J， SMIT G L. The use of benzocaine-hydrochloride as an aid in the transport of fish[J]. Aquaculture， 1984， 42（2）： 169-174. DOI：10.1016/0044-8486（84）90364-8.
[3] 王利娟， 程守坤， 張飲江， 等. MS-222在加州鱸魚模擬運(yùn)輸中的麻醉效果[J]. 上海海洋大學(xué)學(xué)報(bào)， 2015， 24（2）： 235-241.
[4] BALAMURUGAN J， AJITH KUMAR T T， PRAKASH S， et al.
Clove extract： a potential source for stress free transport of fish[J]. Aquaculture， 2016， 454： 171-175. DOI：10.1016/j.aquaculture.2015.12.020.
[5] PARK I S， PARK M O， HUR J W， et al. Anesthetic effects of lidocaine-hydrochloride on water parameters in simulated transport experiment of juvenile winter flounder， Pleuronectes americanus[J]. Aquaculture， 2009， 294（1/2）： 76-79. DOI：10.1016/j.aquaculture.2009.05.011.
[6] WANG Z C， YAN Y Z， NISAR T， et al. Influence of postmortem treatment with nitric oxide on the muscle color and color stability of tilapia （Oreochromis niloticus） fillets[J]. Nitric Oxide， 2017， 9： 1-7. DOI：10.1016/j.niox.2017.09.009.
[7] WANG Zichao， ZHAO Mouming， FANG Zhongxiang， et al. Nitric oxide euthanasia： a potential procedure for improving animal welfare and fillet color of tilapia （Oreochromis niloticus）[J]. Aquaculture International， 2017， 25（5）： 1845-1856. DOI：10.1007/s10499-017-0162-x.
[8] 金一春， 胡萍華， 曲學(xué)偉， 等. 二氧化碳麻醉對白斑狗魚的影響[J]. 湖南農(nóng)業(yè)科學(xué)， 2009（12）： 138-140. DOI：10.16498/j.cnki.hnnykx.2009.12.034.
[9] OBERG E W， PEREZ K O， FUIMAN L A. Carbon dioxide is an effective anesthetic for multiple marine fish species[J]. Fisheries Research， 2015， 165： 22-27. DOI：10.1016/j.fishres.2014.12.019.
[10] 陳名帥， 范興， 陸玉芹， 等. 宰前二氧化碳麻醉對羅非魚肉品質(zhì)影響的研究[J]. 現(xiàn)代食品科技， 2014（4）： 226-232. DOI：10.1016/j.fishres.2014.12.019.
[11] GUAN Weiliang， ZHAO Mouming， LIU Tiantian， et al. Cooling combined with hyperoxic CO2 anesthesia is effective in improving the air exposure duration of tilapia[J]. Scientific Reports， 2017， 7（1）： 14016. DOI：10.1038/s41598-017-14212-3.
[12] TAKEDA T， ITAZAWA Y. Possibility of applying anesthesia by carbon dioxide in the transportation of live fish[J]. Nippon Suisan Gakkaishi， 1983， 49： 725-731. DOI：10.2331/suisan.49.725.
[13] 中華人民共和國地質(zhì)礦產(chǎn)部天津市中心實(shí)驗(yàn)室. 地下水質(zhì)檢驗(yàn)方法 滴定法測定游離二氧化碳： DZ/T 0064.47—1993[S]. 北京： 中國標(biāo)準(zhǔn)出版社， 1993.
[14] 沈陽市環(huán)境監(jiān)測中心站. 水質(zhì) 氨氮的測定 納氏試劑分光光度法： HJ 535—2009[S]. 北京： 中國環(huán)境科學(xué)出版社， 2009.
[15] 湖北省環(huán)境監(jiān)測中心站. 水質(zhì) 亞硝酸鹽氮的測定 分光光度法：
GB/T 7493 —1987[S]. 北京： 中國標(biāo)準(zhǔn)出版社， 1987.
[16] BENL? A ? K， K?KSAL G. The acute toxicity of ammonia on tilapia （Oreochromis niloticus L.） larvae and fingerlings[J]. Turkish Journal of Veterinary and Animal Sciences， 2005， 29（2）： 339-344.
[17] BENLI A ? K， K?KSAL G， ?ZKUL A. Sublethal ammonia exposure of Nile tilapia （Oreochromis niloticus L.）： effects on gill， liver and kidney histology[J]. Chemosphere， 2008， 72（9）： 1355-1358. DOI：10.1016/j.chemosphere.2008.04.037.
[18] PAVLIDIS M， ANGELLOTTI L， PAPANDROULAKIS N， et al. Evaluation of transportation procedures on water quality and fry performance in red porgy （Pagrus pagrus） fry[J]. Aquaculture， 2003， 218（1/4）： 187-202. DOI：10.1016/S0044-8486（02）00314-9.
[19] RANDALL D J， TSUI T K N. Ammonia toxicity in fish[J]. Marine Pollution Bulletin， 2002， 45（1/12）： 17-23. DOI：10.1016/S0025-326X（02）00227-8.
[20] 郭豐紅. 鱖魚?；钸\(yùn)輸?shù)难芯縖D]. 上海： 上海海洋大學(xué)， 2010： 28-29.
[21] LEWIS W M， MORRIS D P. Toxicity of nitrite to fish： a review[J]. Transactions of the American Fisheries Society， 1986， 115（2）： 183-195.
DOI：10.1577/1548-8659（1986）115<183：TONTF>2.0.CO；2.
[22] 趙元鳳， 祝國芹， 呂景才. 亞硝酸鹽對尼羅羅非魚的毒性及其機(jī)理的研究[J]. 大連水產(chǎn)學(xué)院學(xué)報(bào)， 1991（1）： 62-65. DOI：10.16535/j.cnki.dlhyxb.1991.01.010.
[23] ZHAO Jianhua， ZHU Yongjiu， HE Yongfeng， et al. Effects of temperature reduction and MS-222 on water quality and blood biochemistry in simulated transport experiment of largemouth bronze gudgeon， Coreius guichenoti[J]. Journal of the World Aquaculture Society， 2014， 45（5）： 493-507. DOI：10.1111/jwas.12147.
[24] 范興. 麻醉對羅非魚和金鯧魚離水保活的影響[D]. 南寧： 廣西大學(xué)， 2014： 22-23.
[25] 何大仁， 徐厚才. 魚類行為學(xué)[M]. 廈門： 廈門大學(xué)出版社， 1998.
[26] 曲克明， 徐勇， 馬紹賽， 等. 不同溶解氧條件下亞硝酸鹽和非離子氨對大菱鲆的急性毒性效應(yīng)[J]. 海洋水產(chǎn)研究， 2007， 28（4）： 83-88. DOI：10.3969/j.issn.1000-7075.2007.04.014.
[27] 甘靜雯， 邱紹揚(yáng)， 許忠能， 等. 麻醉劑MS-222對斑馬魚行為的影響[J]. 生態(tài)科學(xué)， 2006（3）： 236-239. DOI：10.3969/j.issn.1008-8873.2006.03.011.
[28] TANG S， THORARENSEN H， BRAUNER C J， et al. Modeling the accumulation of CO2 during high density， re-circulating transport of adult Atlantic salmon， Salmo salar， from observations aboard a
sea-going commercial live-haul vessel[J]. Aquaculture， 2009， 296（1/2）： 102-109. DOI：10.1016/j.aquaculture.2009.07.020.
[29] ERIKSON U. Assessment of different stunning methods and recovery of farmed Atlantic salmon （Salmo salar）： isoeugenol， nitrogen and three levels of carbon dioxide[J]. Animal Welfare， 2011， 20（3）： 365-375.
[30] 何琳， 江敏， 馬允， 等. 羅非魚在保活運(yùn)輸中關(guān)鍵因子調(diào)控技術(shù)研究[J]. 湖南農(nóng)業(yè)科學(xué)， 2011（13）： 151-154. DOI：10.3969/j.issn.1006-060X.2011.13.045.
[31] 冉春麗. 羅非魚養(yǎng)殖池塘水質(zhì)調(diào)控技術(shù)[J]. 中國水產(chǎn)， 2013（11）： 48-50.
DOI：10.3969/j.issn.1002-6681.2013.11.021.
[32] RAPP T， HALLERMANN J， COOKE S J， et al. Consequences of air exposure on the physiology and behavior of caught-and-released common carp in the laboratory and under natural conditions[J]. North American Journal of Fisheries Management， 2014， 34（2）： 232-246. DOI：10.1080/02755947.2013.855279.
[33] 柳旭東， 王際英， 張利民， 等. 麻醉劑MS-222及其麻醉效果的影響因素[J]. 水產(chǎn)科技情報(bào)， 2009（2）： 56-59. DOI：10.3969/j.issn.1001-1994.2009.02.001.
[34] 王利娟. 大口黑鱸保活運(yùn)輸?shù)难芯縖D]. 上海： 上海海洋大學(xué)， 2015： 32-33.
[35] 張麗. 大黃魚保活運(yùn)輸及冰溫保鮮的研究[D]. 上海： 上海海洋大學(xué)， 2010： 40-41.
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