血清PA、TBA、GGT和ALP聯(lián)合檢測對肝臟疾病診斷的臨床意義分析

丁慧紅，楊 一△，謝曉君，胡 蓉，皮艷霞，馮國蓮，管旋羽，劉家霞

(貴州省六盤水市水鋼總醫(yī)院：1.檢驗(yàn)科；2.消化科 553000)

肝臟作為人體內(nèi)的重要器官之一，參與著機(jī)體內(nèi)眾多的生化反應(yīng)和新陳代謝活動，該器官的各種生物學(xué)變化對生理系統(tǒng)及機(jī)體整體的代謝水平均產(chǎn)生顯著影響[1]。因此，借助臨床檢測手段盡早地對肝臟疾病進(jìn)行全面準(zhǔn)確診斷可縮短病程、提高疾病治愈概率、減輕患者痛苦。本研究通過對肝病患者和健康人群血清中的前清蛋白(PA)，總膽汁酸(TBA)，γ-谷氨酰轉(zhuǎn)肽酶(GGT)和堿性磷酸酶(ALP)的檢測和分析，探討這4種生化標(biāo)志物聯(lián)合檢測對肝臟疾病診斷的價值和意義。

1 資料與方法

1.1一般資料 選擇本院2015年11月至2017年11月收治的296例住院肝病患者，其中男184例，女112例，年齡21～78歲，平均53.6歲。分為病毒性肝炎組(VH組，n=117)、肝硬化組(HC組，n=84)和原發(fā)性肝癌組(PH組，n=95)。另外選取相同時間段的健康成年人(NC組)125例，其中男78例，女47例，年齡19～82歲，平均52.9歲，均來源于本院正常體檢的健康人群，無肝腎疾病史，經(jīng)生化檢測儀測定分析肝腎功能、血脂、心肌酶等指標(biāo)均正常。本研究已經(jīng)本院倫理委員會審核同意，試驗(yàn)中的所有受試對象均簽署了知情同意書，兩組年齡、性別、身高、體質(zhì)量等方面比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)，具有可比性。

1.2方法 各受試者均于清晨空腹抽取3～4 mL靜脈血，離心(4500 r/min,8 min)后留取上層血清，即刻送檢，1 h內(nèi)完成檢測，以避免標(biāo)本溶血。檢測項(xiàng)目包括血清PA、TBA、GGT和ALP。全部4種生化指標(biāo)均由邁瑞B(yǎng)S2000M型全自動生化分析儀(中國深圳)檢測，試劑和校準(zhǔn)品來自于重慶中元生物技術(shù)有限公司，其中TBA采用循環(huán)酶法測定，GGT和ALP采用速率法測定，PA采用免疫比濁法。各檢測指標(biāo)的正常參考范圍如下：PA 150～400 mg/L，TBA 0～12 μmol/L，GGT 11～50 U/L，ALP 0～500 U/L。

2 結(jié) 果

2.14種生化指標(biāo)檢測結(jié)果比較 各組血清樣本檢測結(jié)果如表1所示：VH、HC和PH組中TBA、GGT和ALP的檢測結(jié)果均明顯高于NC組，而3組樣本中PA水平則明顯低于NC組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。

2.2各組樣本檢出率比較 各組血清樣本中4種生化指標(biāo)檢出率和聯(lián)合檢出率如表2所示，4種檢測指標(biāo)在VH、HC和PH組中陽性檢出率均明顯高于NC組(P<0.01)。在同一組樣本范圍內(nèi)，4種指標(biāo)的聯(lián)合檢出率均明顯高于各自單獨(dú)檢出率，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。

2.34種指標(biāo)的診斷效能評估 4種指標(biāo)及其聯(lián)合檢測對病毒性肝炎、肝硬化和原發(fā)性肝癌的診斷效能分別如表3～5所示。聯(lián)合檢測的靈敏度均明顯高于各自單獨(dú)靈敏度(P<0.05)；除病毒性肝炎中的GGT外，聯(lián)合檢測的陰性預(yù)測值均明顯高于各指標(biāo)的陰性預(yù)測值(P<0.05)；聯(lián)合檢測的特異度明顯降低(P<0.01)；陽性預(yù)測值基本無明顯變化。

表1 4組血清樣本生化指標(biāo)檢測結(jié)果

a：P<0.05；b：P<0.01，與NC組比較

表2 4組血清樣本中各生化指標(biāo)檢出率[n(%)]

a：P<0.01，與NC組比較；b：P<0.05，c：P<0.01，與聯(lián)合檢測比較

表3 4種指標(biāo)對病毒性肝炎的診斷效能(%)

a：P<0.05；b：P<0.01，與聯(lián)合檢測比較

表4 4種指標(biāo)對肝硬化的診斷效能(%)

a：P<0.05；b：P<0.01，與聯(lián)合檢測比較

表5 4種指標(biāo)對原發(fā)性肝癌的診斷效能(%)

a：P<0.01，與聯(lián)合檢測比較

3 討 論

肝臟作為人體新陳代謝和排異解毒的重要器官，其內(nèi)部發(fā)生的病理學(xué)或病理生理學(xué)變化往往會導(dǎo)致機(jī)體血液中多種肝功能指標(biāo)的水平異常，因此，在臨床檢驗(yàn)工作中經(jīng)常通過采集外周靜脈血檢測敏感生化指標(biāo)而為肝臟疾病的確診和分型提供重要依據(jù)[2]。

肝臟組織合成和分泌的PA在血液中發(fā)揮重要的物質(zhì)運(yùn)輸和免疫調(diào)節(jié)作用，并與機(jī)體內(nèi)多種生理或病理狀態(tài)有著密切關(guān)系[3]。由于PA能夠在一定水平上反應(yīng)肝臟的生理狀態(tài)和生物學(xué)功能，故在臨床上被廣泛應(yīng)用于肝臟疾病的檢驗(yàn)和診斷[4]。由于PA在機(jī)體內(nèi)半衰期長且相對分子質(zhì)量較大[5]，因此成為可提示肝臟損傷的更為敏感和快捷的生化指標(biāo)，但也正是此種原因?qū)е略撐镔|(zhì)對慢性肝炎或持續(xù)性肝臟疾病診斷的特異度不佳。膽汁酸是膽固醇代謝的終產(chǎn)物，在肝臟中生成，存儲于膽囊，參與腸道的物質(zhì)消化和吸收功能，而后通過肝腸循環(huán)返回肝臟，因此通常情況下正常機(jī)體血液中TBA的水平是比較低的，其新陳代謝和生理水平與肝臟功能狀態(tài)有很大的關(guān)系[6]。當(dāng)肝細(xì)胞和肝內(nèi)管道由于炎癥、腫瘤等侵襲而受到明顯損傷時，肝臟對膽汁酸的重吸收能力下降，過多的膽汁酸被釋放入血以致外周血中的該物質(zhì)濃度異常升高[7]，由此可見膽汁酸是顯示肝組織損傷和肝內(nèi)管道堵塞的較好指標(biāo)[8]。另有研究報道，在肝炎和肝硬化疾病中，總膽紅素、谷丙轉(zhuǎn)氨酶、谷草轉(zhuǎn)氨酶等項(xiàng)目的敏感度明顯低于PA和膽汁酸[9]。因此本研究選擇了血清PA和TBA水平作為分析和評估肝功能損傷程度的指標(biāo)，以期為肝炎、肝硬化和肝臟腫瘤的臨床診斷提供一定的參考。

人體內(nèi)的GGT和ALP廣泛分布于多種組織和器官中，血液中的GGT主要來源于肝臟，在胞質(zhì)的線粒體中合成，該物質(zhì)為γ-谷氨酰循環(huán)的限速酶之一[10]，在機(jī)體內(nèi)參與著多種生物學(xué)反應(yīng)。有研究報道，在肝膽疾病，特別是嚴(yán)重的肝實(shí)質(zhì)損傷、管道梗阻和肝臟腫瘤中，GGT檢測的陽性檢出率較高[11-12]，但在肝硬化和慢性肝炎等普通患者血清中該指標(biāo)水平可能不會出現(xiàn)明顯異常，而在肝癌和彌散性肝炎等嚴(yán)重肝損傷時GGT則會顯著升高[13]。ALP是一種二聚體蛋白質(zhì)酶，由4種不同基因編碼的蛋白亞基構(gòu)成了6種的同工酶形式，且各自分布于不同的器官組織中[14]，在堿性條件下該酶催化底物脫磷酸化，發(fā)揮相應(yīng)的生物學(xué)作用。正常情況下血清ALP水平保持較低水平，當(dāng)肝臟出現(xiàn)異常，肝內(nèi)管道或膽管堵塞導(dǎo)致其無法排入腸道而分泌入血[15]，血清ALP水平明顯升高，因此ALP水平也是評估肝臟損傷的重要指標(biāo)[16]。在肝炎、肝硬化、腫瘤等肝臟疾病中血清ALP水平均明顯升高，但3種疾病間無明顯差異，可見總ALP水平檢測對肝臟疾病診斷的特異度較差[17]。需對ALP進(jìn)行同工酶分型和測定，或結(jié)合其他肝功能標(biāo)志物水平進(jìn)行分析。鑒于PA、TBA、GGT和ALP 4種指標(biāo)在診斷中優(yōu)缺點(diǎn)和各自特點(diǎn)，其結(jié)合使用有利于優(yōu)勢互補(bǔ)，彌補(bǔ)缺陷，提高檢測的敏感性和準(zhǔn)確率。同時，4種物質(zhì)作為肝功能的常規(guī)項(xiàng)目，獲取和檢測操作均比較方便，因此本研究選擇PA等4種指標(biāo)聯(lián)合檢測以評估其在病毒性肝炎、肝硬化和原發(fā)性肝癌中的診斷效能。

從本研究結(jié)果可以看出，VH、HC和PH組中TBA、GGT和ALP的檢測結(jié)果均顯著高于NC組，而3組樣本中PA水平則明顯低于NC組。在同一組樣本范圍內(nèi)，4種指標(biāo)聯(lián)合檢測的陽性率均顯著高于各自單獨(dú)的陽性率，這提示4種指標(biāo)聯(lián)合的檢測方法能夠明顯提高3種肝臟疾病的檢出率。聯(lián)合檢測的靈敏度和陰性預(yù)測值明顯高于各指標(biāo)單獨(dú)檢測水平；但聯(lián)合檢測的特異度明顯降低，陽性預(yù)測值基本無明顯變化。由此可見，除檢出率之外，聯(lián)合檢測方法預(yù)測檢測結(jié)果為陰性的患者的準(zhǔn)確性明顯升高，進(jìn)而能夠明顯降低陰性檢測結(jié)果人群的漏診率。另外，檢測結(jié)果為陽性患者聯(lián)合檢測的真陽性的預(yù)測準(zhǔn)確率無明顯變化，但其特異度明顯降低，這是由于本研究在計算聯(lián)合檢測的特異度時，將出現(xiàn)1種及以上指標(biāo)異常的血清均歸類為陽性標(biāo)本，4種指標(biāo)的異常水準(zhǔn)設(shè)置均相對較低，這就明顯提高了統(tǒng)計結(jié)果的假陽性率。因此在3種肝臟疾病臨床診斷中，對待4種指標(biāo)聯(lián)合檢測出現(xiàn)陽性的患者，建議考慮陽性指標(biāo)的數(shù)量和異常程度，因?yàn)楦窝住⒏斡不驮l(fā)性肝癌的同一標(biāo)志物水平也可能有較大差異，甚至出現(xiàn)部分患者指標(biāo)保持正常的現(xiàn)象；同時，必要時也可結(jié)合其他肝功能指標(biāo)及超聲學(xué)和影像學(xué)結(jié)果加以診斷和鑒別診斷。

近年來，國內(nèi)許多課題組對數(shù)種血清生化標(biāo)志物聯(lián)合篩查肝臟疾病都進(jìn)行了探索和分析，并取得了顯著的研究成果。研究組選擇的大多為谷丙轉(zhuǎn)氨酶、谷草轉(zhuǎn)氨酶、膽紅素、GGT、ALP等常規(guī)肝功能指標(biāo)[11-14]，或者高爾基體糖蛋白、巖藻糖苷酶、甲胎蛋白異構(gòu)體等新型檢測指標(biāo)[18-19]，這些標(biāo)志物聯(lián)合檢測在3種肝臟疾病診斷方面發(fā)揮了重要作用，但也普遍存在著診斷敏感性不高，檢測方法復(fù)雜、繁瑣或反應(yīng)機(jī)體異常狀態(tài)不夠全面等缺陷[20]。本研究選擇PA、TBA、GGT和ALP作為聯(lián)合檢測指標(biāo)，在近年來的研究中較為少見，相比之下該組合的陽性檢出率較高，組合指標(biāo)反映與肝臟有關(guān)的多種器官系統(tǒng)的生理學(xué)和病理學(xué)狀態(tài)，且各指標(biāo)作為常規(guī)肝功能檢測和正常體檢項(xiàng)目，容易獲得。

綜上所述，PA、TBA、GGT和ALP作為常規(guī)的肝功能指標(biāo)，其聯(lián)合檢測在病毒性肝炎、肝硬化和原發(fā)性肝癌等疾病早期篩查和臨床確診及肝功能狀態(tài)評估等方面均具有重要意義。但是鑒于本研究收集的標(biāo)本數(shù)量有限，所得結(jié)果與真實(shí)值之間可能存在一定的誤差，本課題組下一步工作將增加標(biāo)本收集數(shù)量，進(jìn)一步探討聯(lián)合檢測整體的陽性判斷閾值和特異性。

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