張德花 孫鑫澤 賈洪偉
(吉林省食品藥品安全風(fēng)險檢驗(yàn)監(jiān)測評估(中心)有限公司,吉林長春 130000)
板栗殼具有降逆、止血作用,藥性平、甘、澀,主治鼻衄、反胃、便血等癥。板栗殼乙酸乙酯、乙醇以及正丁醇可有效抑制α-葡萄糖苷酶活性、抗菌以及抗氧化作用[1],結(jié)果如下。
選取云南15個產(chǎn)地板栗樣本,同時選用98.9%純度沒食子酸、96.6%綠原酸、90.5%蘆丁作為對照品。
將板栗殼切片并采用梯度洗脫法進(jìn)行制片。
(1)色譜條件:采用反相高效液相色譜法,制作流動相采用乙腈-水和甲醇-水,檢測波長280 nm,流速1 mL/min,進(jìn)樣體積 10μL,保持柱溫 30℃[2]。
(2)對照品制備液:稱重適量對照品融于甲醇溶液,將其制成53.48、66.02、49.52 μg/ML質(zhì)量濃度的制備液。
(3)供試品制備液:取板栗殼粉末0.2 g,分別逐次加入30 mL甲醇和乙醇稀釋液,超聲震蕩后靜置45 min[3]。
稱取6份板栗殼粉0.2 g,分別滴入對照組制備液,通過0.22 μm濾過微孔濾膜,萃取率過夜,并根據(jù)色譜檢測條件計(jì)算回收率其中沒食子酸、綠原酸、蘆丁回收率分別為93.1%、89.3%、82.6%,RSD分別為6.2%、6.39%、6.43%。分析不同產(chǎn)地沒食子酸、綠原酸以及蘆丁含量,見表1。分析不同產(chǎn)地沒食子酸、綠原酸以及蘆丁RSD占比,見表2。
采用反相高效液相色譜法對板栗殼進(jìn)行樣本材料梯度洗脫法,詳細(xì)操作如下:將切片樣采用標(biāo)準(zhǔn)流程制片,制片后將其依次放置在二甲苯-無水乙醇、95%、80%、70%乙醇各15 min,并采用番紅染色和95%、無水乙醇(兩次)、二甲苯(兩次)清除固綠,放置在纖維鏡下觀看細(xì)胞形態(tài)特征,檢測樣本中沒食子酸、綠原酸以及蘆丁含量[4]。結(jié)果顯示,板栗殼切片樣本中沒食子酸、綠原酸以及蘆丁含量在測定范圍內(nèi)呈現(xiàn)線性良好關(guān)系,而板栗殼中分析的成分對于今后臨床用藥提供參考和提取依據(jù)。綜上所述,此方法檢驗(yàn)樣本具有含量精準(zhǔn)、操作簡單,以及專屬性強(qiáng)等優(yōu)點(diǎn)。
表1 分析不同產(chǎn)地沒食子酸、綠原酸以及蘆丁含量 (±s,mg/g)
表1 分析不同產(chǎn)地沒食子酸、綠原酸以及蘆丁含量 (±s,mg/g)
樣品產(chǎn)地 稱樣量(g) 沒食子酸 綠原酸 蘆丁玉溪易門曲靖陸良會澤者海昭通永善宜威板橋大理劍川彌勒昆明保山楚雄0.2009 0.2003 0.2008 0.2006 0.2002 0.2005 0.2002 0.2002 0.2001 0.2001 0.359±0.004 0.337±0.005 0.359±0.011 0.340±0.006 0.355±0.008 0.351±0.002 0.342±0.003 0.349±0.002 0.354±0.009 0.329±0.002 0.140±0.005 0.139±0.002 0.137±0.007 0.135±0.005 0.128±0.005 0.138±0.002 0.134±0.009 0.130±0.003 0.142±0.006 0.138±0.007 0.205±0.006 0.206±0.005 0.203±0.003 0.198±0.004 0.202±0.009 0.189±0.006 0.195±0.005 0.179±0.003 0.212±0.006 0.229±0.005
表2 分析不同產(chǎn)地沒食子酸、綠原酸以及蘆丁RSD占比(%)
[1] 蘇麗娜,王小慶.板栗殼生藥研究及有效成分沒食子酸、綠原酸、蘆丁含量測定[J].食品工業(yè)科技,2016,37(21):323-328.
[2] 蘇麗娜,張國英,鄧穎慧.板栗殼中沒食子酸及綠原酸含量的高效液相色譜法同時測定[J].時珍國醫(yī)國藥,2016,27(7):1607-1609.
[3] 張琳,汪軒,邢婧,等.HPLC-DAD同時測定左歸丸藥液中沒食子酸、原兒茶酸、綠原酸、馬錢苷、阿魏酸含量[J].藥物分析雜志,2016,36(8):1364-1369.
[4] 左曉霜,陳平,張建博,等.RP-HPLC法測定不同pH條件下藏藥余甘子干果中柯里拉京、沒食子酸、綠原酸、咖啡酸的含量變化[J].中國民族醫(yī)藥雜志,2016,22(5):44-48.