馬倩倩

(安徽農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物科技學(xué)院，安徽 合肥 230036)

宛曉春

(安徽農(nóng)業(yè)大學(xué)茶與食品科技學(xué)院，農(nóng)業(yè)部茶葉生物技術(shù)重點(diǎn)開放實(shí)驗(yàn)室，安徽 合肥 230036)

楊嚴(yán)鷗,岳鼎鼎,王孝宇

安徽農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物科技學(xué)院，安徽 合肥 230036)

我國是茶葉生產(chǎn)大國，商品茶葉主要品種為綠茶與紅茶。綠茶經(jīng)殺青、整形、烘干等典型工藝制作而成,茶多酚是綠茶的重要成分，在綠茶中約占茶葉干重的30%[1]。紅茶是發(fā)酵茶,經(jīng)萎凋、揉捻、發(fā)酵、干燥等一系列工藝過程制成，其中的茶多酚經(jīng)氧化后形成茶色素，因此紅茶的重要成分是茶色素[2]。目前關(guān)于茶葉在水產(chǎn)養(yǎng)殖中的應(yīng)用研究不多，而且這些研究基本以綠茶為主[3～5]，由于綠茶與紅茶的成分差異較大，因此對(duì)紅茶作用的研究很有必要。本研究選擇我國重要的養(yǎng)殖品種草魚為試驗(yàn)魚，探討紅茶對(duì)草魚代謝酶活性的影響，以為開發(fā)茶葉在魚類健康養(yǎng)殖中的應(yīng)用提供參考。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

試驗(yàn)魚取自安徽合肥巢湖三珍養(yǎng)殖場，運(yùn)回后采用2%食鹽水消毒，實(shí)驗(yàn)室循環(huán)水水族箱內(nèi)暫養(yǎng)2周，暫養(yǎng)期間投喂基礎(chǔ)飼料。

基礎(chǔ)飼料自行配制，具體配方參見文獻(xiàn)[6]。試驗(yàn)飼料則在基礎(chǔ)飼料中加入紅茶(普洱茶)，具體做法是時(shí)選取紅茶加工后產(chǎn)生的下腳料磨成粉，過60目篩，再將茶粉按不同添加量與各種粉狀飼料原料混勻，以飼料機(jī)制成粒徑1.5mm顆粒飼料，65℃烘干后于-20℃保存?zhèn)溆谩?/p>

1.2 試驗(yàn)方法

試驗(yàn)飼料包括6種，紅茶含量分別為0%(對(duì)照組)、0.075%、0.15%、0.30%、0.60%和1.20%，每種飼料設(shè)3個(gè)重復(fù)。試驗(yàn)開始前，將魚饑餓24h后隨機(jī)取樣稱重，每箱初始平均體重為(5.5±0.5)g/尾，每箱放25尾。試驗(yàn)持續(xù)56d，每天9:00和15:00各投適量飼料1次，1h后回收殘餌，70℃烘干，用以矯正攝食量。

循環(huán)水養(yǎng)魚系統(tǒng)主要為18只塑料水族箱(規(guī)格60cm×60cm×65cm，有效水體180L)，每缸進(jìn)水速度為3L/min。中央凈水系統(tǒng)主要使用沸石、活性炭、培菌球、珊瑚石與生物棉作為濾材。試驗(yàn)期間水體總氨氮含量低于(0.11±0.02)mg/L，溶氧高于6mg/L，pH 7.3±0.1，電熱棒與空調(diào)控制水溫為(28±2)℃，日光燈照明時(shí)間為07:00～19:00，瞬時(shí)開斷。

試驗(yàn)結(jié)束時(shí)，魚饑餓24h后每箱隨機(jī)取7尾，冰盤解剖取部分肝胰臟，等量混合后置于液氮罐保存。肝臟酶活指標(biāo)的測定采用上海將來生物試劑公司試劑盒，具體方法參見試劑盒說明書。

1.3 數(shù)據(jù)分析

描述性統(tǒng)計(jì)值用平均值±標(biāo)準(zhǔn)差表示。用單因素方差分析(ANOVA)后進(jìn)行組間差異的多重比較(Duncan’s procedure)。顯著性水平設(shè)置為α=0.05,統(tǒng)計(jì)軟件為SPSS 16.0。

2 結(jié)果與分析

2.1 紅茶對(duì)草魚肝臟轉(zhuǎn)氨酶等指標(biāo)的影響

養(yǎng)殖試驗(yàn)結(jié)束時(shí)，總體試驗(yàn)魚死亡率小于2%，各試驗(yàn)組間無顯著差異(P>0.05)，不影響試驗(yàn)結(jié)果分析,各紅茶添加組生長無顯著差異。由表1可知，紅茶添加組的γ-谷氨酰轉(zhuǎn)肽酶、谷丙轉(zhuǎn)氨酶與谷草轉(zhuǎn)氨酶活性均顯著低于對(duì)照組(P<0.05)，乳酸脫氫酶與堿性磷酸酶活性呈拋物線趨勢變化，在0.30%組顯著最高(P<0.05)，乳酸脫氫酶在1.20%組時(shí)下跌至顯著低于對(duì)照組的水平(P<0.05)。

表1 不同紅茶添加量下的草魚肝臟轉(zhuǎn)氨酶等的活性測定結(jié)果

注：同行數(shù)據(jù)上標(biāo)字母不同表示有顯著差異(P<0.05),表2同。

2.2 紅茶對(duì)草魚脂肪代謝酶等指標(biāo)的影響

由表2可知，隨著飼料中紅茶添加量增加，試驗(yàn)組脂肪酸合成酶活性有下降趨勢，但無顯著差異(P>0.05)，脂蛋白脂酶活性、肝脂酶活性以及總脂酶活性均比對(duì)照組顯著下降(P<0.05)，添加量越高，下降幅度越大。

表2 不同紅茶添加量下的草魚脂肪代謝酶等的活性測定結(jié)果

3 討論

研究顯示，肝臟γ-谷氨酰轉(zhuǎn)肽酶的活性呈中度升高或者高度升高時(shí)，表明肝臟功能異常[7]。Burrells等[8]也指出，當(dāng)飼料植物蛋白含量提高時(shí)，虹鱒的肝臟受到損傷，γ-谷氨酰轉(zhuǎn)肽酶的活性上升。本研究中，紅茶導(dǎo)致γ-谷氨酰轉(zhuǎn)肽酶活性顯著下降，可能是對(duì)照組的活性值本身處于相對(duì)較高的狀態(tài)，紅茶導(dǎo)致的酶活性下降是對(duì)肝臟的一種保護(hù)。同樣，較高的谷丙轉(zhuǎn)氨酶和谷草轉(zhuǎn)氨酶活性也表示肝臟受到損害[9,10]。本研究中，紅茶導(dǎo)致轉(zhuǎn)氨酶活性顯著下降，這可能與紅茶對(duì)肝臟的保護(hù)作用有關(guān)[6]。

脂蛋白脂酶是甘油三酯降解的限速酶，參加各種脂蛋白的代謝[11]，肝脂酶主要參與高密度脂蛋白的代謝[12]。本研究中，紅茶導(dǎo)致脂蛋白脂酶與肝脂酶的活性顯著下降(P<0.05)，總脂酶(脂蛋白脂酶與肝脂酶的合稱)也呈相似的變化趨勢，紅茶組的脂肪酸合成酶呈下降趨勢，這可能表明紅茶對(duì)脂肪代謝有抑制作用。