孫秀濤，吳 杰，李 朝，何克燦，王 薇，鄒豐才，萬寶云

（1. 紅河州動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心，云南蒙自 661199；2. 云南農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物醫(yī)學(xué)院，云南昆明 650201；3. 易門縣農(nóng)業(yè)局，云南易門 651100）

馬梨形蟲?。‥quine piroplasmosis，EP）是通過蜱傳播的一種血液原蟲病，由駑巴貝斯蟲（Babesia caballi）和馬泰勒蟲（Theileria equi）寄生于馬屬動(dòng)物紅細(xì)胞內(nèi)所引起[1]。動(dòng)物感染后，會(huì)出現(xiàn)體溫升高、抑郁、出血和呼吸困難等癥狀[2-3]，一旦治療不及時(shí)，則會(huì)發(fā)生死亡，給養(yǎng)馬業(yè)帶來嚴(yán)重影響。

據(jù)報(bào)道[4-8]，青海、甘肅、黑龍江、吉林、新疆等地區(qū)均有馬梨形蟲病流行。馬、騾、驢作為云南省農(nóng)村或山區(qū)主要的運(yùn)輸工具，目前存欄約72.7萬匹，多為散養(yǎng)。云南省紅河州地處中越邊境，存在該病病原的中間宿主——蜱[9]。由于當(dāng)?shù)貧夂虮容^濕熱，特別有利于蜱等節(jié)肢動(dòng)物繁殖。當(dāng)?shù)鼐用衲壳吧形匆庾R到蜱蟲的危害，幾乎沒有采取滅蜱措施，進(jìn)而增加了馬屬動(dòng)物感染的概率。目前尚未見紅河州馬梨形蟲病流行的報(bào)道。為了解紅河州馬梨形蟲病流行情況，開展了本次血清學(xué)調(diào)查。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 血清 2017年1—2月，在云南省紅河州瀘西縣、彌勒市、個(gè)舊市、開遠(yuǎn)市4個(gè)地區(qū)27個(gè)鄉(xiāng)（鎮(zhèn)），采用抽樣調(diào)查方法，分別采集農(nóng)戶散養(yǎng)的馬屬動(dòng)物血樣108、166、132、56份，共462份樣品，?80 ℃凍存待檢。

1.1.2 試劑盒 馬巴貝斯蟲抗體（BabesiosisAb）酶聯(lián)免疫分析試劑盒：上海酶聯(lián)生物科技有限公司。

1.2 方法

1.2.1 ELISA雙抗原夾心法檢測抗體 根據(jù)馬巴貝斯蟲抗體酶聯(lián)免疫分析試劑盒使用說明書操作。將空白孔調(diào)零，在試驗(yàn)有效性成立的情況下（陽性對照平均值≥1.0，陰性對照平均值≤2.0），測定酶標(biāo)儀450 nm波長處吸光度（OD值），并與臨界值（CUT OFF=陰性對照空平均值+0.15）相比較，從而判定標(biāo)本中馬梨形蟲病抗體存在與否。即OD＞ CUT OFF，為巴貝斯蟲抗體陽性，反之則為陰性。1.2.2 數(shù)據(jù)分析 采用SPSS 22.0軟件，通過單因素方差分析方法，探究地區(qū)、年齡對騾、馬、驢梨形蟲病抗體陽性率的影響。以P＜0.05時(shí)為顯著差異，具 有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 不同地區(qū)馬屬動(dòng)物血清抗體檢測

462份馬血清樣本中，共檢出4份陽性，平均樣本陽性率為0.87%（4/462）。其中：個(gè)舊市檢出1份陽性，陽性率為2.27%（1/166）；彌勒市檢出3份陽性，陽性率為0.60%（3/132）。其余地方未檢測出陽性。各地區(qū)間抗體陽性率沒有明顯差異（P＞0.05）。具體結(jié)果見表1。

2.2 不同年齡馬屬動(dòng)物血清抗體檢測

表1 不同地區(qū)馬梨形蟲病抗體檢測結(jié)果

被檢馬屬動(dòng)物血清中，1～7歲136份，7～13歲222份，13～27歲104份。僅從7～13歲馬屬動(dòng)物中檢測出4份陽性，其余年齡段未檢出，各年齡段間差異不顯著（P＞0.05）。具體結(jié)果見表2。

表2 不同年齡段馬屬動(dòng)物馬梨形蟲病抗體檢測結(jié)果

2.3 不同種類馬屬動(dòng)物血清抗體檢測

被檢馬屬動(dòng)物血清中，騾384份、馬76份、驢2份，僅在騾血清中檢出陽性樣本4份，陽性率為1.04%，馬及驢未檢測出陽性，各種類間差異不顯著（P＞0.05）。

表3 不同動(dòng)物種類馬梨形蟲病抗體檢測結(jié)果

3 討論

本次血清學(xué)調(diào)查發(fā)現(xiàn)，云南省紅河州馬梨形蟲病血清學(xué)個(gè)體陽性率為0.87%（4/462），低于新疆富蘊(yùn)縣（17.58%）[10]及北疆四縣（56.4%）和南疆部分地區(qū)（1.1%）[11]的檢測結(jié)果。這可能與季節(jié)，當(dāng)?shù)伛R匹的飼養(yǎng)環(huán)境、地域環(huán)境，以及疾病預(yù)防措施有關(guān)。因本次樣品采集時(shí)間在1—2月份，氣溫較低，傳播媒介蜱蟲的活動(dòng)頻率及范圍較小，進(jìn)而減少了馬梨形蟲病的傳播。有研究發(fā)現(xiàn)，3—6月為馬梨形蟲病高發(fā)期，其中4—5月為高峰期[6]。本次調(diào)查顯示，地區(qū)間陽性率沒有明顯差異。這不同于Davitkov 等[12]在巴爾干中部地區(qū)馬匹中的調(diào)查結(jié)果。該報(bào)道顯示，不同地理區(qū)域間的陽性率差異顯著。這可能與區(qū)域內(nèi)是否有中間宿主蜱的存在有關(guān)。

對不同年齡馬屬動(dòng)物進(jìn)行檢測發(fā)現(xiàn)，只有7～13歲年齡段的馬屬動(dòng)物存在感染，陽性率為1.80%（4/222）。這與黑龍江省寧安縣[6]、吉林省延邊地區(qū)[7]的檢測結(jié)果相似，兩地6～10歲壯齡馬的感染率最高（23.88%）。這可能與采集的樣品數(shù)量有關(guān)。本次調(diào)查的7～13歲年齡段樣品量接近另外兩者總量的2倍，因而檢出的陽性數(shù)量偏多，即可能因樣本采集數(shù)量懸殊而造成了差異。但年齡差別對感染率影響并不明顯，這與Davitkov 等[12]的報(bào)道基本一致。此外，本次調(diào)查的騾、馬、驢3種動(dòng)物采樣數(shù)量不均勻，且數(shù)量較少，這也可能是導(dǎo)致3種動(dòng)物陽性率不同的原因之一。

云南省濕熱溫和的氣候十分適合蜱蟲的生長。雖然此次調(diào)查檢出的陽性率不高，但同時(shí)也表明該地存在馬梨形蟲病病原，因此需要做好防蜱和滅蜱工作。沒有疫情的地區(qū)，要對外來馬匹進(jìn)行嚴(yán)格檢疫，防止帶蟲馬匹進(jìn)入；政府也要加強(qiáng)宣傳教育，要求農(nóng)戶在蜱活動(dòng)季節(jié)，盡量避免在滋生蜱的草地放牧，對圈舍定期驅(qū)蟲，及時(shí)清理圈舍衛(wèi)生。而對于養(yǎng)殖場來說，在該病流行季節(jié)，要做好定期檢測和驅(qū)蟲工作。

另外，紅河州地處中越邊境，邊境線較長，用馬屬動(dòng)物進(jìn)行貨物托運(yùn)交易較為常見，加之越南邊境地區(qū)動(dòng)物防疫薄弱，這勢必增加了馬梨形蟲病傳入我國的風(fēng)險(xiǎn)[13]。因此加強(qiáng)我國境內(nèi)動(dòng)物疫病的檢疫和防控尤為重要。此次調(diào)查對于了解紅河州馬梨形蟲病流行情況具有參考意義，也為該地區(qū)馬屬動(dòng)物梨形蟲病的防控提供了數(shù)據(jù)支持。

4 結(jié)論

本次調(diào)查于2017年冬季，利用雙抗原夾心法，對云南省紅河州4個(gè)地區(qū)27個(gè)鄉(xiāng)（鎮(zhèn)）的馬屬動(dòng)物進(jìn)行了馬梨形蟲病血清抗體檢測，發(fā)現(xiàn)抗體陽性率并不高（0.87%），低于我國新疆地區(qū)的檢測結(jié)果。因該病具有明顯的季節(jié)性，該結(jié)果偏低可能與冬季蜱蟲活性低有關(guān)。但結(jié)果也表明，該地存在馬梨形蟲病病原，需要引起當(dāng)?shù)刂匾暎绕湓谖孟x活躍季節(jié)，要做好防蜱和滅蜱工作。