文/宮春波 王朝霞 董峰光
我國淡水產(chǎn)品中副溶血弧菌污染現(xiàn)狀及其研究展望 // 副溶血弧菌作為常見的食源性致病菌之一,主要侵染海產(chǎn)品而導(dǎo)致食源性疾病發(fā)生。近年來監(jiān)測表明,淡水產(chǎn)品中副溶血弧菌污染率一直維持在較高的水平,并呈現(xiàn)上升趨勢。為了強(qiáng)化淡水產(chǎn)品中副溶血性弧菌的監(jiān)管和監(jiān)測,了解污染途徑和追溯污染源,構(gòu)建安全管理體系,分析了近10年來我國淡水產(chǎn)品中副溶血弧菌的污染現(xiàn)狀,探討了其可能污染原因,闡述了陽性菌株優(yōu)勢血清型、耐藥性以及毒力基因特點(diǎn),并展望了未來研究趨勢,以期為了更好地控制淡水產(chǎn)品中副溶血性弧菌污染及減低其引發(fā)的食源性疾病提供借鑒。
食源性疾病為我國較為嚴(yán)重的公共衛(wèi)生問題之一[1],其主要誘因?yàn)橹虏∩镆蜃忧秩臼称匪隆,F(xiàn)階段病原微生物污染防控是食品安全的剛性需求,食品不合格的主因是微生物污染,也是導(dǎo)致食物中毒的主要原因[2]。細(xì)菌是我國食源性疾病的發(fā)生的主要致病菌,非傷寒沙門氏菌、副溶血性弧菌(Vibrio parahemolyticus,VP)和志賀氏菌(Shigella spp)是主要的3類食源性致病菌[1],VP則是近20年來我國食源性疾病爆發(fā)的最常見的病原菌[3],往往導(dǎo)致腹瀉、腹痛、惡心、嘔吐等典型腸胃炎現(xiàn)象。嚴(yán)重時(shí)會引起脫水和其它并發(fā)癥,甚至引起死亡[4],海產(chǎn)品是VP首要的致病食品和媒介食品[1,5]。
1 近十年來文獻(xiàn)報(bào)道不同省份淡水產(chǎn)品中VP的污染狀況[9-14]
副溶血性弧菌嗜鹽畏酸,在無鹽培養(yǎng)基上,不能生長,3%~6%食鹽水繁殖迅速,屬于弧菌屬,G-的菌棒狀、弧狀、卵圓狀無芽孢菌,嗜鹽性是其主要特征,廣泛分布在海洋環(huán)境如海水、海底沉積物、海產(chǎn)品及鹽漬食品中[4,6]。然而,近年來研究表明淡水產(chǎn)品中VP污染率一直維持在較高的水平,并呈現(xiàn)上升趨勢,且陽性菌株血清型、耐藥性以及毒力基因呈現(xiàn)多樣化,污染水產(chǎn)品種類不斷拓寬。為了強(qiáng)化淡水產(chǎn)品中副溶血性弧菌的監(jiān)管和監(jiān)測,追溯污染源和污染途徑,以期降低或杜絕淡水產(chǎn)品中副溶血弧菌導(dǎo)致的食源性疾病的暴發(fā)風(fēng)險(xiǎn),筆者分析了近10年來我國淡水產(chǎn)品中VP的污染現(xiàn)狀,探討了其可能污染原因,展望了未來研究趨勢,希望能拋磚引玉,為了更好地控制淡水產(chǎn)品中VP污染及減低其引發(fā)的食源性疾病提供借鑒。
2 近十年來文獻(xiàn)報(bào)道不同城市(地級)淡水產(chǎn)品中VP的污染狀況[10,12,15-29]
由于VP的嗜鹽特性,海產(chǎn)品中VP的污染狀況監(jiān)測以及菌株耐藥性、血清型、毒力基因等研究較多,表明海產(chǎn)品中VP污染較為嚴(yán)重,污染率25%~40%不等,最高到達(dá)80%[7]。對于淡水產(chǎn)品VP的調(diào)查,多為監(jiān)督抽檢,專項(xiàng)監(jiān)測始于2014年在6個(gè)省(自治區(qū))的內(nèi)陸地市開展的常見嗜鹽性弧菌的調(diào)查,表明淡水魚中存在VP污染,檢出率12.47%且養(yǎng)殖和存養(yǎng)水體均存在VP污染[8]。圖1是近十年(2005~2016年)來,各?。ㄊ校﹫?bào)道的淡水產(chǎn)品中VP污染水平,污染率數(shù)值范圍4.7%~41.4%,同省份按年度比較,山東、浙江具有逐年升高的趨勢,沿海與內(nèi)陸省份不存在明顯差異。具體到不同地級市調(diào)查報(bào)告[10,12,15-29],圖2表明淡水產(chǎn)品中VP的污染率數(shù)值范圍1.39%~80.07%,與報(bào)道的海產(chǎn)品中污染率數(shù)值范圍較一致,說明VP是水產(chǎn)品中常見食源性致病菌。沿海和內(nèi)陸城市淡水產(chǎn)品中VP中的污染率沒有顯著差異,筆者認(rèn)為一方面與水產(chǎn)品跨區(qū)流通銷售交叉污染相關(guān),另一方面淡水產(chǎn)品水體環(huán)境的變化導(dǎo)致VP生境改變,導(dǎo)致VP在淡水水體以及淡水產(chǎn)品中存活和生長。
考慮到年度不同,監(jiān)測樣本數(shù)量、樣本種類以及采樣環(huán)節(jié)的差異,導(dǎo)致各省份、各地市中淡水產(chǎn)品VP污染率的差異;但沿海、內(nèi)陸省份淡水產(chǎn)品中VP普遍檢出,尤其不同城市間淡水產(chǎn)品中VP檢出率普遍較高,且沿海與內(nèi)陸城市中淡水產(chǎn)品VP污染率無明顯差異,說明淡水產(chǎn)品中可能存在VP侵染的特定途徑及生長環(huán)境,與其嗜鹽性相悖,故需要針對淡水產(chǎn)品中VP污染水平、生化特征、血清分型、耐藥性、毒力基因以及分子水平分型和溯源等進(jìn)行連續(xù)、系統(tǒng)的研究,明確其污染途徑、污染源以及菌株特征和消長規(guī)律,制定防控措施,阻斷其侵染,降低其致病風(fēng)險(xiǎn)。
目前,調(diào)查分析表明流通環(huán)節(jié)淡水產(chǎn)品中VP污染率偏高,間接印證了交叉污染是淡水產(chǎn)品VP污染途徑之一。裴曉燕等調(diào)查發(fā)現(xiàn),流通環(huán)節(jié)、餐飲環(huán)節(jié)淡水魚及其存養(yǎng)水體中VP檢出率遠(yuǎn)高于養(yǎng)殖環(huán)節(jié),差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),淡水養(yǎng)殖場VP檢出率依次為淡水魚 5.81%、存養(yǎng)水體1.89%、水底沉積物1.50%[8],考慮到養(yǎng)殖場中魚體、水體以及沉積物中VP存在與交叉污染無關(guān),說明淡水產(chǎn)品中VP存在其他特定污染途徑,需要進(jìn)一步研究確認(rèn)。李海麟等也發(fā)現(xiàn)2006~2015年,廣州市超市、肉菜市場、零售店、批發(fā)市場中樣本VP檢出最高,其次為餐飲環(huán)節(jié)[19,29],與李葉青等報(bào)道結(jié)果一致[20],而農(nóng)貿(mào)市場高于超市,推斷農(nóng)貿(mào)市場攤位密集、擺放隨意,交叉污染嚴(yán)重于超市;餐飲單位VP較高污染,可能與加工流程和人員有關(guān)。同時(shí)考慮到海產(chǎn)品和淡水產(chǎn)品中VP污染水平因地域不同而差異較大,荊門市淡水產(chǎn)品和海水產(chǎn)品中VP檢出率均最高,分別為20.6%和 48.3%,兩者差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義 (P<0.001),發(fā)現(xiàn)在淡水產(chǎn)品有較嚴(yán)重的弧菌污染情況[31],而湖州市冰鮮保存淡水產(chǎn)品與鮮活保存海產(chǎn)品中VP檢出率最高,分別為66.67%、 37.50%[26]。表明淡水產(chǎn)品中VP污染途徑多樣,故針對流通環(huán)節(jié)、餐飲環(huán)節(jié)開展VP專項(xiàng)監(jiān)測,掌握VP污染途徑,以期阻斷其侵染降低風(fēng)險(xiǎn),為當(dāng)前急需解決的問題。
副溶血弧菌生長溫度范圍為5.5℃~47.3℃,最適生長溫度為34.6℃[32],因此溫度是VP生長的主要因子之一,加之我國7~9月份平均溫度最高分別為21~30℃、20~30℃、16~26℃,利于VP增殖,故7~9月份是淡水產(chǎn)品中VP高污染的時(shí)間節(jié)點(diǎn)。研究報(bào)道,2014~2016年湖州市VP檢出率在2~6月的檢出率相對較低,7~10月的檢出率相對較高,9月最高達(dá)55%,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0. 001)[26];2009~ 2014年 廣州市第3季度VP檢出率最高,為18.48%,其次為第2、1、4季度[19];2011~2013年防城港市7~9月VP檢出率高于5月、6月、10月,因?yàn)橄那锛竟?jié)溫度適合VP大量增殖[20];2015年浦東新區(qū)則是8月VP平污染率最高達(dá)到45.2%,1月份最低為20%[28]。
副溶血弧菌的血清型、毒力基因型以及耐藥性是其生物學(xué)特征,對于VP致病防控具有主要意義。尤其是VP分為致病菌株和非致病菌株,溶血素是VP致病的主要因素,包括:致熱性溶血素( thermostable direct hemolysin,TDH) 、 類溶血毒(thermo stable direct hemolysinrelated hemolysin,TRH)、不耐熱溶血素(Thermolabi lehemolysin,TLH),具有溶血活性、腸毒素和致死作用[33,34],其毒力基因分別為Tdh、Trh。盡管淡水產(chǎn)品中VP生物學(xué)特征報(bào)道較少,但也表明O群為其主要血清型,毒力基因以Tdh-、Trh-、Tlh+為主,存在耐藥菌株(包括多重耐藥)。湖州市水產(chǎn)品中VP的血清型以O(shè)3血清型為主,其次為O4血清型,毒力基因型分以Tdh-、Trh-為 主, 占 42.08%[26]。 吳 青等報(bào)道分離80株VP,均為Tlh+、Trh-,1株Tdh+,O抗原分型率達(dá)到97.5%,主要為O2、O1、O5群,O2群為最主要占35%[12];姚雪婷等分離到O1為優(yōu)勢血清型,其次O10,毒菌株則為O1和O3[13]。近十年來,淡水產(chǎn)品中分離的VP往往Tdh+攜帶率偏低[14,35],且絕大部分是Tdh-、Trh-[10,14,18,23,35];表明多為非致病菌株。耐藥性方面,張秀麗等報(bào)道分離80株VP同時(shí)耐鏈霉素、氨芐西林的有13株,耐復(fù)方新諾明、甲氧芐啶、鏈霉素有3 株[9]。
近十年來研究表明,我國淡水產(chǎn)品中VP污染率處在較高的水平,且分布廣泛,地域間污染率差異較大;流通環(huán)節(jié)中淡水產(chǎn)品的VP污染水平高,可能與交叉污染有關(guān),但不排除淡水產(chǎn)品中VP有特定的污染途徑;第三季度是淡水產(chǎn)品中VP高污染的時(shí)間節(jié)點(diǎn);淡水產(chǎn)品中分離的VP菌株多為O抗原群,Tdh-、Trh-、Tlh+菌株,非致病菌株占絕大多數(shù),Tdh+菌株所占比例較低。盡管淡水產(chǎn)品VP研究時(shí)有報(bào)道,但卻未針對VP在淡水產(chǎn)品中消長規(guī)律、生物學(xué)特征、分子分型、溯源分析以及防控措施等方面進(jìn)行系統(tǒng)研究。
筆者認(rèn)為今后研究重點(diǎn)為,其一,借助于國家食源性致病菌監(jiān)測平臺開展淡水產(chǎn)品中VP專項(xiàng)監(jiān)測。將淡水產(chǎn)品中VP監(jiān)測納入國家監(jiān)測計(jì)劃,全國范圍開展專項(xiàng)監(jiān)測,涵蓋養(yǎng)殖環(huán)節(jié)、流通環(huán)節(jié)和餐飲環(huán)節(jié),監(jiān)測樣本包含80%及以上淡水產(chǎn)品類別且包含環(huán)境樣本,進(jìn)行VP定量檢測,分析其污染特征及污染規(guī)律,明確污染源、污染途徑,陽性分離菌株進(jìn)行生化鑒定、血清分型、耐藥試驗(yàn)、分子分型、毒力基因以及與食源性疾病監(jiān)測VP菌株進(jìn)行溯源分析;其二,推進(jìn)水產(chǎn)品中VP快速檢測技術(shù)的研究,尤其是基于核酸指紋技術(shù)的敏感、高效、快速、可靠快檢技術(shù)的研發(fā);其三,基于預(yù)測微生物學(xué)研究方法,尤其分子生物技術(shù)的應(yīng)用,構(gòu)建模型;探索淡水產(chǎn)品中VP在養(yǎng)殖、貯運(yùn)、銷售以及餐飲加工環(huán)節(jié)消長規(guī)律,尤其致病菌株生長規(guī)律,并結(jié)合地域膳食特點(diǎn)推進(jìn)食源性致病菌風(fēng)險(xiǎn)評估體系的建設(shè);其四,針對水產(chǎn)品中食源性致病菌污染特征和消長規(guī)律,推進(jìn)防控措施的探索,積極推進(jìn)水產(chǎn)品養(yǎng)殖、貯運(yùn)、生產(chǎn)加工、銷售等環(huán)節(jié)的安全管理體系建設(shè)和應(yīng)用,實(shí)現(xiàn)對食源性污染的有效控制,降低食源性疾病發(fā)生。 ■